Способ определения гистамина в вине

(19) (11) 3(51) 6 0 1 И 3 3 / 4 8 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(71) Технологическо-конструкторский институт Научно-производственного агропромышленного объединения Яловены(56) 1. Авторское свидетельство СССР М 578619, кл. С 01 И 33/16, 1976.2. Е. 1,еЬепяп 1 йе 1. ЖГегяцсйепу цпа Рогяс)шпд. 1973, р. 321-323.(54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЕНИЯ ГИСТАМИНА В ВИНЕ путем выделения гистамина нонообменной хроматографией споследующим исследованием на анализаторе аминокислот, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, выделениягистамина осуществляют на катионитеКРСп Т 40, колонку аминокислотногоанализатора заполняют ионитом Хромекс УА, а целевой продукт элюируют натрий-цитратным буфером при 1,5 н.концентрации ионов натрия.1062608 1 г ИМ Е Н О Н а Н И Е ЭИ Н а 252 Санньо 11 Отсутствует Мерло 0,83Отсутствует Херес крепкий Херес сухой Кабернс Изобретение ОтносиС 1 к О 1 ас",биОхимии и мажет быть испОльзОэана для Определения гистамина н нине,Известны способы определения гистамина, основанные на его предварительном ныделении из образцов и последую в 5щем определении либо спектрафлуориметрированием продуктов конденсациигистамнна с о-фталеным альдегидом,либо хрома(аграфирсванием на аминокислот-ом анализаторе 111,.:д 11 ако зти методы требу:от большойпадготснител Най рабаты с образцами,Громоздки н длительнь во времени.Известен также способ определениягистамина, редусмаринающий выделе-ние еГО из вин=. Яегсдам кОлОночнсйхрама то.оа(о 1(1 на ионите Био-рад АГ50 К Х 8 злюирование 8 н.растворомгидраксида аммония и .1 аследуюцеехрамт 1 О 1 фираваниз а а.1 алиэатареаминск и:1 ат . Г,",е Нста 1 ин Отделяют наианнте Аминекс Аи пик Гистаминарегистрируют через 45 мин 1 аале наа,л. э 31 юирснанияНедостатками иэнестногс способа.ЯвляютсЯ невысОкаЯ тОчнссть спОсобаа та:(хе длитель ность записи хромато.рп (мь По выхода пика гистамина, чтоведет к большому расходу реактивови увеличивает П 1 оодс.лжитсльность анае 11 ью:1 з обре:ен 1 ЯнлЯетс Я поньшеьие точности и ускОрение спОсоба,Пас.;ангенная цель достигаетсятем ч:"1 .С.ла: на способу ОпределенияГст,:х; :; - , вич 1 и, т 1,1 выделения гис - -5тами(а ианссбмен 1 аи хрОматОГрафиейс послепуюши.: иседаванием на аналиэата е ам:;нак ислат, выделение гс -тамина :;, лествляют на катианитеКРС.".40 .(О.анку аминОкислОтнОГО 4 Оанализатора заполняют хОнитом ХромекУА;: целевой продукт элюируют:-1 атрий - Цитрат 1 ым буферам при 1,5и, касе.-,".аци ионов н 1 три 1.Спа(.б асцд;.СтвляюОленующимобразо,. Хересный виноматериалр:-: за вина пропускают через коанку с 1 атионитом КРСПТ 40 в Нфформе и промывают ее сначала дистиллированной надай, а затем 1 н.раствором гидраксида аммония. Промывныеводы выбрасывают. Гистамин и смесьосновных аминокислот злюируют 8 н,раств.,ром гидроксида аммония и промывают катионит дистиллиронаннойводой. клюат и громывные воды объединяют и упаринают под вакуумом при40-45 фС, "ухой остаток растворяют вцитратном буфере, и растнор хроматографируют на аминокислотном анализаторе АААна колонке, заполненной ионитом Хромекс УА, с которойгистамин элюируют натрий-цитратнымбуфером 1,5 н.по ионам натрия. 11 икгистамина выходит на 22 мин посленнедения проб:, Содержание гистаминанаходЯт па калибразОчнсму Графику.П р и м е р . 100 мл вина Алиготе 11 рапуска:от через колонку скатионитсм КРСПТ 40 в водороднойформе и промьвают смолу 30 мл дистиллированной воды, Затем ионит промывают 30 мл 1 н,раствора ГидрОксидааммония. .1 ромынные воды выбрасынают.Гистамин и смесь основных аминокислот эл 1 оируют 30 мл 8 н,раствораидраксида аммония и промывают 30дио;тиллирананнсй воды. Элюат и промыннье воды объединяют и упариваютпад вакуумом при 40 С досуха. Сухойоа(.таток растворяют н 1 мл цитратногобуфера с рН 2,.2. Полученный растворанализиру от на аминокислстном анализаторе ААА. Разделение Основных аминокис 1 лот и гистамина проводят .1 а исните Хромекс УАэлюируютгистамин натрий-цитратным буферомс р.-. = 6,6 1,5 н, па ионам натрияпри скорости перекачинания буфера100 мл/ч, а нигидрина 50 мл/ч и.-емпературе колонки, равной 65 С.Результаты определения гистаминав различных образцах нин принедены втаблице,Сслержание .Гистамина, мг/л1062608 Продолжение таблицы Отсутствует Фетяска 2,6 Алиготе Отсутствует Днестровское Составитель Н, Хрусталева Редактор Н. Бобкова Техред М. Костик Корректор Г. ОгарЗаказ 10210/45 Тираж 873ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Изобретение позволяет повыситьточность определения гистамина засчет более качественного и четкого разделения пиков на анализаторе, атакже ускорить исследование в 2 разапо сравнению с известным способом.