Способ получения лимонной кислоты

СОКИ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН 684 1 оЮС 1 г ь .-:,ь,ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬПИЙ(56) 1, И 11 ь И.Е., Нелеп Т.,Вгепда Н."ТЬе еГ 1 есй о 1 . 1 р дя опС.йге Асд Ргодосйоп Ьу опАврег 9 нв и 9 еп Иийапй", 1, Оеп.Нсгорд. ро. 1963, 30, 365.2. Патент ЧССР 9 100940,кл б Ь 16/02. опублик. 1961.(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИМОННОЙ . КИСЛОТЫ, предусматривающий выращивание посевной культуры гриба-продуцента, ферментацию в питательной среде, содержащей источник углерода, источник азота, минеральные соли, при аэрации и перемешивании, введение в среду стимулятора процесса, выделение целевого продукта, о т л и ч аью щ и й с я тем, что, с целью увеличения выхода лимонной кислоты, в качестве стимулятора используют комплекс горьких веществ хмеля в количестве 0,003-0,01, при этом стимулятор вводят в среду при выращивании посевной культуры гриба-продуцента или через 24-48 ч от начала ферментации.Изобретение относится к пищевойпромышленности, в частности к способам получения лимонной кислоты вприсутствии стимулятора.Известен способ получения лимонной кислоты, включающий введение впитательную среду в процессе ферментации растительного масла: льняного, миндального, оливкового 1,Недостатком способа является использование в больших количествах 10(2-10 к объему среды) дорогостоящих и дефицитных масел, что делаетэтот способ неприемлемым для производства.Ближайшим к изобретению техническим решением по технической сущности и достигаемому эффекту являетсяспособ получения лимонной кислоты,предусматривающий выращивание посевной культуры гриба-продуцента, 20ферментацию в питательной среде,содержащей источник углерода, источник азота, минеральные соли, приаэрации и перемешивании, введениев среду стимулятора процесса, выделение целевого продукта. Согласноизвестному способу гриб Аврегд 111 цьо 1 дег культивируют на мелассных средах со стимулятором-фильтратом кальция, добавляемом в количестве 1 млна 1 л среды. Стимулирующий эффектв среднем составляет 25 2.Недостатком способа является относительно невысокое стимулирующеедействие, а также то, что действиестимулятора проявляется лишь на меласЗ 5сах высокого качества, что делаетего использование на мелассах низкого качества нецелесообразным,Цель изобретения - увеличениевыхода лимонной кислоты. 40Поставленная цель достигаетсятем что в способе получения лимонной кислоты, предусматривающем выра"щивание посевной культуры грибапродуцента, Ферментацию в питательной среде, содержащей источник углерода, источник азота, минеральныесоли, при аэрации и перемешивании,введение в среду стимулятора процесса, выделение целевого продукта,в качестве стимулятора используют солянокислый комплекс горьких веществ хмеля в количестве0,003-0,01,при этом стимуляторвводят в среду при выращиваниипосевной культуры гриба-продуцента 55или через 24-48 ч от начала ферментации,П р и м е р 1. Навеску мелассы 60 г растворяют в 850 мл горячей водопроводной воды. Полученный раствор обрабатывают щавелевокислым калием (иэ расчета 2,6 г на 100 г мелассы), гексацианоферратом (1,3 г на 300 г мелассы), Устанавливают рН в пределах 7,0 стерилизуют, охлаждают, добавляют соли, г/л: хлористого аммония 2,2; однозамещенного фосфата 0,12; сульфата магния.0,25; сульфата цинка 0,005. Доводят концентрацию сахара в среде до 30 г/л путем добавления стерильной воды.Полученный питательный мелассный раствор помещают в качалочные.колбы по 100 мл в каждую, засевают конидиями гриба Аьр.п 1 дег, предварительно выдержанными в течение 5-6 ч в в среде А, и вносят стерильный раствор солянокислого комплекса горьких веществ. хмеля в концентрации 0,003 от объема среды, Выращивание посевного мицелия осуществляют на качалке при 160-180 .об/мин при 35 С в течение 24 ч,Через сутки подрощенным мицелием засевают мелассную среду, приготов ленную так же, как и для выращивания посевной культуры, с тем отличием, что в нее не добавляют соли магния и уменьшают количрство хлористого аммония до 1,7 г/л. Предлагаемый способ получения лимонной кислоты заключается в следую щем.Мелассу разводят. водой в соотношении 1:1, обрабатывают полученный раствор содой, щавелевокислым калием и гексацианоферратом калия, коррек тируют рН до 7,0. После чего растворстерилизуют, охлаждают, вносят питательные соли азота, фосфора и цинкаи доводят концентрацию сахара всреде до 30 г/л путем добавлениястерильной воды. Подготовленную пи"тательную среду засевают суточнойкультурой гриба-продуцента. Посевную культуру получают, засевая конидиями гриба питательную меласснуюсреду, которую готовят как и исходную, но наряду с солями азота, фосФора и цинка в нее вводят соли магния, при этом, поддеРживая температуру в процессе выращивания культуры на уровне 35 С, обеспечиваютперемешивание и подачу воздуха; После перевода посевной культуры в питательный мелассный раствор проводятферментацию при 30 С в аэробныхусловиях в течение 5-7 суток. Дляподкормки погруженной культуры через сутки процесса вводят стерильный мелассный раствор с концентрацией сахара 18-25, чтобы достигнутьсумарного содержания сахара в среде 11. Стимулятор процесса биосийтеза лимонной кислоты - солянокислый комплекс горьких веществ хмелявносят в среду в концентрации0,003-0,1, либо при выращиваниипосевной культуры, либо непосредственно в ходе .Ферментации в течениепервых 48 ч.1011684 Составитель В. ГолимбетРедактор Т. Парфенова Техред А.Ач Корректор М. Демчик Заказ 2688/32 тираж 521 Подписное ВННИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, М, Раушская наб., д. 4/5филиал ППП "Патент", г, Ужгород, ул. Проектная, 4 В.качалочные колбы помещают мелассный раствор н подрощенный мицелий ,в соотношении 10:1 и проводят ферментацню при 30 фС в течение 5 суток. Через сутки после засева мелассного раствора посевным мицелием для5 подкормки погруженной культуры вводят дополнительно мелассный раствор с тем, чтобы суммарное количество сахара за процесс составило 11.При таком способе ферментации 0 съем лимонной кислоты составляетэ 9,2 кг/(мЪ.сут) против 7,02 кг/(м .сут) в контроле (выращивание посевного материала беэ стимулятора). Увеличение съйма лимонной кислоты состав ляет 31.П р и м е р 2. Подготовку сред для выращивания посевного мицелия и основной ферментации осуществляют так же, как н в примере 1, с тем от- р личием, что в мелассный раствор для выращивания посевной культуры не добавляют солянокислый комплекс горьких веществ хмеля.Условия ферментации те же, нто . р и в примере 1Через 24 ч после засева питательной мелассной среды суточной культурой продуцента в.культуральную жидкость вносят. стерильный раствор солянокислого комплекса горьких веществ хмеля концентрацией 0,003 от объема среды. Съем лимонной кислоты при введении процесса с добавлением солянокислого комплекса горьких веществ хмеля составляет 9,58 .гк/(м сут). контроль - 7,15 кг/(м сут. Увеличение съема лимонной кислоты составляет 33,9. П р и м е р 3. Те же условия ферментации и подготовки сред, что и в примере 2 с тем отличием, что через 48 ч от начала ферментации в культуральную жидкость вносят соляиокислый комплекс горьких веществ хмеля в количестве 0,01 от объема среды. Добавлением стимулятора позволяет получить в сутки с 1 м 9,92 кг лимонной кислоты (контроль - 7,22 кг/(м сут). Увеличение съема лимонной кислоты составляет 37,39,Преимущества предлагаемого способа по сравнению а известным заключаются в увеличении выхода, лимонной кислоты на 6-12 и упрощении технологии. Кроме того, стимулятор, полученный, иэ растительного сырья, обладает нативным комплексом биологически активных веществ, ста" бильных по составу, что поэволяет получить устойчивый эффект от его ,применения.