Способ получения антибиотика ципропоптипа

; ИЗОЬРЕТЕЙИЯК АВТОРСКОМУ СВИДНЕДЬСУВУ 563027 г(опал нител ьн Ое Заявлено 06.12. ЯВТ. СВИЛ-Вг(51) М. Кл. С 12 Р 9(14 оединением зая Гк)(даретееаы аметет СЫР пв делам изобретениевт)(ртиЙ(23) Приоритет Опубликовано 15.11.79. Бюллетень42 3) УДК 615.77 .931 (088,8) ата отбликов ия описания 25,11.7 я. А. Л. Кузовков.,(". М. Тдй Н. К. Соловьева И. Фрол(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИКА ЦИНРОПЕПТИНА, ). 1) с .("сВ( ли прел КЕ,(Т СН(. 200 ОЦ( Из 01 е геци( огцо( ит( я к цроизволствъ анти(и)(икВСпособ (юлучсиия яцтипентина В дтсцтцой 1; постРЕ ЦС ПЦСЯ 1.1(Рец и С( мый с)псоо пол, чеиЯ с 11 тиб И ОИ Кс)( ц),С ц Т С 1 ц с 3 я КГПОс Е 1 С я В Т ОМ ЧТО Кс,151 Р . (С(. С 1 ПЕ 1 Я(ЕЦВ П. ВР. о ВЬРсЦнвс)ЮГ В РСЛ( 1:с ОСНОВС К(КМ. ЭКСТРс)КТЯ, С(КВ)й И,15 РЫОНОЙ РО,Ю ( 11 С.СЛОШИс ВЬПС,(Е ИС,1 ПРО (,1, : ); КЦ 1(.Ч 11 Ц С 5,);О;С( . И ц 5 П)Г 1 яетея .с 1 Е . сс. (,( Гасев и. Вр. Оц бесцветный или свет,н)- й) Р 6),4" (С 0,36,ш:ствя Вклят С, Н, Х. 1 д(ОС сС Об 1".)5); Н,"26,12,28, 2,23; 8 6,15, 16.37..1)л. В; с.072 (си(. ктрофтс метри Секи )"Л 1 "1( "1 РИЧЕ(КИ)Гз У) - с,трс (ин )О(е(т 111 (в сп)1,.),(, -Р;СГВОРЕ ПЯО,1 Ю;1 Я)ОГ(Я МсКСИМ) МЬ ПОения цри 28, 232, 304 и 364 н.с). Б ИК-спектре имеотся полоспения 3370 см(ОН- или Н1660 см(дмипцые связи). 1600, 11100 (ароматические системы).Цинроп(птиц рс 1 ворим в клороформе, б( цз 1, Ли 1( тил(1) Орм д мипе, ледяной уксусной кислтс, водном р(Створе дОН, труд ;1 растворим и спирте, не растворяется в эфире, воле, В(лцык раствора; кислот и аммиака. Растворы антибиотика имеют желтую флуор.сцепцик в УФ-свете.Ьц)1сптиц 5:влясгся серосолерждшим ПО,ИПС;:Г 1-Он явг 51 сгся активным в отношении грамл)ложтелиык бактерий, резистентны( к а)п 1:.бпотикд(1, )п(:.роко применяемым в ме- ЦИЦИЦСКИ Ц)с 1 К 1 ИК(1 р; (ц с( гли ц ного биосинтеза антибиотикад ) н(ест 15 яОт путем культивироВдн;)я Ас). с(псгдс.Ив цд среда.; с кмкрмзцым экст 1)дкто)А. рыбной мукой и кукуруз ЭКСтрс)КТОМ, С)СВОИ ММКОП. ПрсдиоЧТИГСГ 1 ЬЦОИ 51 ВЛ 51(.Т.и СРЕЛс) С КМКМРЗЦЫ)М ЭКСТ- рд кто".Ацт)кбц;тИК ЭКСТРс)ГИРУОт ИЗ МИЦЕЛИЯ ОР- гяппчсским рдс 1 воритслем, экстракт упари(1 ример 5. Светло-жел (0,5 г), полученный ио ир ряют и 300 мл кипящего с лаждеиия из раствора вьша осадок, ко 1 орый отделяют ваку уме. Полхчагот 0,4 г ц гыи цинроиептин гмсру 1, раствои 1 рта. После. охдает бесцветныйвысхшиваю 1 в ииропепгина рлгула изобретенггя Составитель СМалютинаРедактор Л. Письман Техред О, Луговая Корректор М. Шаров Заказ 7008/43 Тираж 526 Подписное ЦИ И И П И Государственного к по делам изобретений и 113035, Москва, Ж - 35, Раущс лиал П П П к Патент, г, Ужгородмитета СССРоткрытийая наб., д, 4 г 5ул. Проектная вают в вакууме до 1/5 первоначального об.ьема, при 4 С выпадает осадок неочищенного цинропептина, который отделяют и очищают переосаждением из органических растворителей или хроматографированием на кремневой кислоте. Из органических растворителей предпочтительным является ацетон.Пример 1. Процесс глубинного биосинтеза антибиотика осуществляют культивированием Аст. спегасецз на среде следующего состава, %:Кукурузный10экстракт 0,5 (по сырому весу) Аммонийсернокислый О, 5Натрий хлористый 0,5Мел 0,5Крахмал 1,0Глюкоза 1,5рН 6,8 - 7,0 в колбах емкостью 750 мл.Через 96 ч ферментации от 3 л глубинной культуры отделяк)т мицелий (300 г). Антибиотик извлекают из мицелия эксп рак цией 900 мл ацетона. Экстракт уиаривакгт в вакууме до 0,2 л. Из упаренного экстракта выпадает светло-желтый аморфный осадок, который отделяют и многократно промывают петролейным эфиром. Остаток высушивают в эксикаторе иад СаСа при 20"С. Выход неочищенного продукта около 0,5 г.0,8 г неочищенного антибиотика растворяют в этилацетате при комнатной температуре, отфильтровывают нерастворившийся темный осадок, фильтрат наносят на 4 г крем невой кислоты и высушивают на воз гухе Полученную взвесь антибиотика на кремне.вой кислоте вносят в колонку с кремневой кислотой в эфире и промывают эфиром до получения бесцветного элюата. Затем антибиотик элюируют этилацетатом, раствори- тель упаривают досуха. Остаток (0,45 г) растворяют в минимальном обьеме хлороформа и выливают в пятикратный об.ьем эфира.и40 Светло-желтыи осадок отделяют и вьгсх - шивают в вакууме при 60 С. Вес около 0,4 гаВ - 169,4 (С - 0,36, СНС з) По примеру 1 выделяют 0,05 г цинропептпна.Ори.кер 3. Мицелий (300 г) получают ио примеру 1, промывают его многократно эфиром и экстрагируют антибиотик хлороформом. Хлороформный раствор упаривают досуха и очищают полученный продукт по примеру 1. Получают 0,3 г цинропеитина.Пример 4. 0,5 г неочищенного антибиотика, полученного по примеру 1, растворяют в хлороформе ири комнатной температуре, отфильтровывают нерастворившийся осадок и фильтрат вливают в 3-кратный обьем спирта. Г 1 олучают аморфный желтый антиоиотик, который отделяют от смеси растворителей и высушивают в вакууме. Получают 0,3 г цинропеитина в виде темно-желтого порошка. Способ получения антибиотика цинропептина, от гггчаюгг(ииея тем, что культуру Лс 1, сепегасецз и. вр. ЛЪ 1 выращивают на среде иа основе кукурузного экстракта, соевой или рыбной муки и углевода с последующим выделением целевого продукта экстракцией мицелия органическим растворителем.