Способ идентификации возбудителя листериоза

Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 1 с присоединени (23) Приоритет (43) Опубликов (45) Дата опуб 936768/ 1) М, Кл." С 12 К 1/04 А 61 В 10,/00 заявки М Государственный комете Совета Министров СССР по делач изобретений и открытий5.1 2,76.Бюллетень 45 53) УДК 576,8,078 ;578.851.136 (088.8) иковаяпя сп санпя 28.02.77 .(54) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛИСТЕРИОЗА Из гностики лис - агов по литиения их на га естен также снос.б дс помощью бактерио еакции в месте нан .уемой культуры 2 ко с помощью изв идентифицировать едовачия штаммов терпозаческой он испи Однаестного способа лишь 45% Взят листерий. етс для исс Изобретение относится к ветеринарии иможет быть использовано в лабораторнойпрактике для идентификации возбудителя лтериоза,Известен способ идентификации возбудителя листериоза по комплексу бактериологических исследований 1. В качестве диаг - ностикума при идентификации .аппо лоа 1 орепы в настоящее время используют агглютинирую шие сыворотки, которые нередко дают перекрестные реакции с гетерологичными бактериями (стафилококками, энтерококками и некоторыми другими микроорганизмами), Кроме того, идентификацию проводят на основа нии культурально-морфологических биохимических тестов, постановкой биологической пробы на лабораторных животных и с помощью люминесцентно-серологических исследований. 20Однако некоторые из приемов бактериологического комплекса громоздки, занимают много времени, не всегда достаточно специфичны, что затрудняет правильность постановки диагноза на листериоз. 25 С целью повышения эффективности иссле -дования и сокрашения сроков проведения идентификации листерий, используют монофаги1, 2 А, 1 ЗА и Ь 4 А, которые поочереднонаносят на газон испытуемой культуры,Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.Набор листериозных бактериофагов включает три монофага ), 2 А, Ь ЗА и Ь 4 А,которые получены из лизогенных культур),тповосу 1 орепев после облучения их ультрафиолетовыми лучами,Бактериофаги имеют вид прозрачной желтой жидкости, представляющей собой взвесь фа.говых частиц в бульоне Мартена, Число инфекционных фаговых частиц,то есть титр бактериофагов составляет 5 10 - 1 10в, 9538025 Составитель Л, МураяРедактор Н. Скворцова Техред О. Луговая КорректорЯ Зорина Тираж 555 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская неб., д. 4/5Филиал ППП фПатентф. г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Индикаторной культурой для фагов Ь 2 Аи Ь ЗА является штамм 9 - 127, а дляфага Ь 4 А - штамм 9 - 72,Каждый из бактериофагов обладает свойственным лишь для него спектром литичес- Ькой активности. При исследовании культурбактериофаги используют в неразведенномвиде.Идентификации подвергают культуру,находящутося в экспоненциальной фазе роста (4-чаОсовая бульонная культура), засеянную на поверхность 1, 5% агара Мартена в бактериологических чашках, При этом на газон испытуемого штамма наносят по капле каждого из трех монофагов. Засеянные чашки по бмешают в термостат (22-28 оС). Учет реакции проводят через 16-18 час, При положительном результате в месте нанесениякапли фага образуется прозрачная зона лизиса на фоне выраженного роста культуры фна остальной поверхности агара.Для подтверждения возможности использования набора бактериофагов для идентификации возбудителя листериоза исследовано184 штамма гомологичных культурЛитическая реакция отмечена у 158 штаммов,что составляет 85,9%, Проведено также исследование диагностического набора бактериофагов на специфичность, Испытано 152штамма гетерологичных культур, включающих стафилококки, рожистые палочки, дифтероиды, сальмонеллы, пастереллы и кишечныепалочки, Ни в одном случае не наблюдалосьлитической реакции со штаммами указанныхвозбудителей, что свидетельствует о высокоиМ специфичности набора бактериофагов дляидентификации возбудителя листериоза,На проведение исследований по идентификации культур с помощью данного наборабактерисфагов, включая подготовительныеработы (получение 16-18-часовой культуры,разчивка питательных сред), требуется неболее 48 час.Предлагаемый способ характеризуетсяпростотой выполнения, сокращает сроки иматериальные затраты, связанные с исследованиями по идентификации возбудителялис ериоз а,Формула изобретения Способ идентификации возбудителя листериоза с помощью бактерио"агов по литической реакции в месте нанесения их на газониспытуемой культуры, о т л г ч а ю щ и йс я тем, что, с цэлью повышчия эффективности и сокращения сроков исси.дования, используют монофаги ы 2 А, . 3.,. и Ь 4 А,которые поочередно : осят на газон испытуемой культуры.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. "Руководство по микробиологическойдиагностике инфекционных болезней", подред,К.И, Матвеева, Медицина, 1 Ь 73 с,533536,2. Статья Щегловой М,К. в кн. "ТрудыЗооветинститута" г. Саратов, 196, т,16,стр. 133-137.