Способ разделения смеси лимонной и -изолимонной кислот

ц 438637 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУявки осударственныи комитетСовете Министров СССРпо делаи иэобретениРн открытий Опубликовано 05.08,74. Вюллетен 5) УДК 547,477,1:547Ъ 29 ата опубликования описания 24.01.75 72) Авторы изобретени нова и С сипо В, А, Поротикова, И, Б. Рнститут биохимии и физиолог икроорганизмов АН СССР аявител ВПБ4) СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ СМЕСИ ЛИМОННОЙ 1 .";:,". -.-;,-:гтИ т 1-ИЗОЛИМОННОЙ КИСЛОТ Изобретение относится к способу выделения и разделения смеси лимонной и Й-изолимонной кислот, широко применяемых в различных областях народного хозяйства.Известен способ выделения этих кислот из культуральной жидкости, содержащей:почти эквивалентные количества Й-изолимонной и лимонной кислот, путем осаждения смеси кислот из раствора в виде солей бария с последующей обработкой полученных солей серной кислотой. Смесь лимонной и с 1-изолимонной кислот, полученную после упаривания водного раствора превращают в смесь метиловых эфиров квпячением с метаноломвприсутствии катализатора - эфирата трехфтористого бора с последующим разделением смеси путем фракционной перегонки и выделением кислот известными приемами. Выход каждой из кислот 36 - 55%,Недостатками такого способа являются применение для выделения смеси кислот дорогого реактива-гидрата окиси бария, необходимость ректификационной установки для разделения смеси метиловых эфиров, неизбежные потери целевых продуктов при фракционной ттерегонке эфиров, а также недостаточно высокий выход кислот.Целью изобретения является повышение выхода индивидуальных, кислот, упрощение, удешевление процесса.,Поставленная цель достигается тем, чтосмесь кислот выделяют из культуральнойжидкости в виде солей кальция, смесь лимонной и д-изолимонной кислот, полученную5 после обработки солей серной кислотой, переводят в смесь лимонной кислоты и лактонат 1-изолимонной кислоты нагреванием в вакууме при 100 С, полученную смесь обрабатывают этилацетатом, отфильтровывают выпавО ший осадок лимонной кислоты с последующим выделением из маточного раствора лактона П-изолимонной кислоты и превращениемего действием щелочи в Й-изоцитрат натрия.Выход лимонной кислоты 76 - 93 , с 1-изо 5 цитрата натрия 75 - 80%.П р и м е р К 1 л культуральной жидкости,полученной ферментацией дрожжей Сапйт 1 а11 ро 1 у 11 са, добавляют концентрированную соляную кислоту до рН 1,0, дрожжевые клетки0 отделяют центрифугированием и промываютдистиллированной водой. Центрифугат вместес промывными водами пропускают через колонку, содержащую 150 об. ч, катионита КУ в Н+-форме, для освобождения от катионов,5 входящих в состав питательной среды Ридер.Кислый элюат упаривают при температурекипящей водяной бани до объема - 250 мли затем при 70 - 80 С добавляют насыщенныйраствор гидрата окиси кальция, нагретый до0 70 - 80 С, до рН 9 - 10,438637 15 Предмет изобретения Составитель Т, Юдинцева Техред Г. ВасильеваКорректор Л. Орлова Редактор 3. Горбунова Заказ 3670/7 Изд. Уо 137 Тираж 506 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 475Типография, пр. Сапунова, 2 Осадок солей кальция отделяют торячим фильтрованием, промывают юрячей водой и смесью этанол-вода (1: 1) и сушат на воздухе, Полученную смесь солей суспендируют в 200 мл дистиллированной воды и при постоянном перемешивании постепенно прибавляют к суспензии 49%-ную серную кислоту до рН 1 - 2. Выпавший сульфат кальция отфильтровывают и промывают водой, Избыток Нв 504 в фильтрате удаляют осторожным добавлением 5%-ного раствора хлористого бария и фильтрат упаривают в вакууме при 100 С до сиропа.Выпавший дополнительно при упаривании сульфат кальция отфильтровывают, промывают дистиллированной водой и фильтрат снова упаривают в вакууме до получения светло- желтого сиропа. Затем к сиропу добавляют 30 мл толуола, который испаряют в вакууме при температуре кипящей бани. Эту операцию повторяют трижды. В остатке получают 7,0 г очень густого желтого сиропа.К 7,0 г смеси добавляют 25 мл этилацетата. При растирании отделяется белый кристаллический осадок, который отфильтровывают и промывают этилацетатом. Получают 3,5 г (76%) лимонной кислоты, Затем из фильтрата упаривают этилацетат и твердый остаток (3,5 г) растворяют в 10 мл абсолютного этанола, К полученному раствору приливают эфирный раствор диазометана до слабо- желтой окраски. Выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из абсолютного этанола. Получают 2,2 г (80%) 4диметилового эфира лактона, т, пл. 105 - 160 С, 1 а 1 в - 66,9 (С 1,7, в ацетоне). 2,2 г ,диметилового эфира лактона Й-изолимонной кислоты нагревают с 38 мл 1 н. раствора едкого натра в течение 45 мин при 100 С, после чего раствор упаривают досуха. К твердому остатку добавляют 20 мл абсолютного этанола, осадок отфильтровьгвают, несколько раз промывают абсолютным этанолом и затем эфиром. Получают 2,52 г (8,5%) тринатриевой соли д-изолимонной кислоты. Способ разделения смеси лимонной и дизолимонной кислот путем осаждения послед них из раствора в виде солей металлов Птруппы с последующей обработкой полученных солей серной кислотой, разделением смеси и выделением индивидуальных кислот, отличающийся тем, что, с целью повы щения выхода индивидуальных кислот и упрощения процесса, смесь, полученную после обработки солей серной кислотой, нагревают в вакууме при 100 С, полученную смесь обрабатывают этилацетатом, отфильтровывают 30 вьгпавший осадок лимонной кислоты с последующим выделением из маточного раствора лактона с 1-изолимонной кислоты и превращением его в натриевую соль известными приемами.