Способ получения вещества, обладающего

Номер патента: 390699

Автор: Иностранна

ZIP архив

Текст

есг.-6 А ТГ.,; .""-э А Й-Й"-е 390699 О П И СИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических РеспубликК ПАТЕНТУ Зависимый от патентаМ. Кл. А 611 с 25,/ОО Заявлено 23.1 Х.1966 (. 1102799/31-16) Приоритет 07,111.1966,6129, Народная Республика Болгария Государственный комитет Совета Министров СССР по делам изобретений и открытийУДК 615.771.7(088.8) Опубликовано 11.ч 11,1973, Бюллетень30Дата опубликования описания 29.Х 1.1973 Авторизобретения Иностранец Богданов Иван Георгиев(Народная Республика Болгария) Иностранная фирма Тексим Энтрепрайз Экономик дЭтаЗаявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИ ВОО ПУХОЛ ЕВОЙ АКТИ В НО СТЬЮИзобретение относится к области медицины, а именно к способам получения противоопухолевых препаратов.Известен способ получения вещества, обладающего противоопухолевой активностью, например антибиотика аураитина, заключающийся в том, что культуру продуцеита, выращенную на средах, содержащих питательные экстракты, экстрагируют органическим растворителем с дальнейшим выделением из экстракта целевого продукта.В качестве продуцента противоопухолевого препарата предлагают использовать один из штаммов культуры рода 1.ас 1 оЬас 111 цз, а именно 1.ас 1 оЬас 111 цз Ьц 1 дапсцз чаг. цтпогопцго 11- сапз 1.В - 5193 или100, 1.асоЬас 111 цв 1 е 1 че 11 сцз чаг. 1 цтпогопесго 11 сапз31 или Е,ас 1 оЬас 111 цз ас 1 дорЬ 111 цз чаг. 1 цгпогопесго 11 сапз43, который выращивают в аиаэробных условиях на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли в течение 18 - 24 час при температуре 28 - 50 С, цельные или разрушенные клетки экстрагируют водой или фенолом, а целевой продукт выделяют из экстрактов либо осаждением минеральной или органической кислотой при рН 1,5 - 4,0, либо высаливанием, либо осаждением посредством органических растворителей, смешиваюшихся с водой. П р и м е р 1. Культурой 1.ас 1 оЬас 111 цз Ьц 1 рапсцз чаг. 1 цгпогопесго 11 сапз 1.В - 51 засевают 200 мл,питательной среды, содеркащей (%) соевого экстракта - 3, пвптона - 5, мясного эк стракта - 0,5, дрожжевого экстракта - 0,5; сахарозы - 0,5 и сульфата магния - 0,1. Культивирование производится при температуре 37 С в течение 24 час, рН культуральной жидкости доводят до 6,5 и затем цеитрпфугируют при 10 5000 оомин в течение 30 мин.Мышам с хорошо развитой саркомой 180,имплантированной подкожным путем, вводят внутривенно 0,5 мл надосадочной жидкости.Ни у одной из 20 подопытных мышей ие обра зовалось некроза опухоли, Осадок бактериальиых клеточек измельчают в ступе с кварцевым,песком и экстрагируют посредством 100 лил дистиллированной воды. Смесь центрифугируют при 5000 д и надосадочиую жид кость дозой 0,5 мл вводят внутривенно мышамс саркомой 180. Через 24 час некроз опухоли обнаружили у 17 из 20 мышей, а через 10 дней 8 животных были излечены.П р и м е р 2. 3000 лл надосадочной жидкос 25 ти, полученной после гомогенизации разбавленных водой бактериальных клеток, приливают к 6000 лил 96%-ного раствора этанола, Смесь выдерживают в течение 2 час при 4 С, затем центрифугируют.390699 Предмет изобретения 35 40 45 50 Составитель С, ЩеиеваРедактор К. Шаиаурова Техред Л. Грачева Корректор А, васильева Заказ 3060/14 Изд.1753 Тираж 467 11 одш гспо с Ц 1-1 ИИПИ Государствснпого комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, )К, Раушская паб., д, 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 Надосадочпую жидкость огделшот и осадок раство 1 ряют в 600 л 1 л водызатем центрифутпръют для удаления 11 ерастворим 1 х ост 1 тко,200 д 1 л раствора подкисляют соляной ктчслотой, доводят,рН до 2, Осадок отдсля 1 от центрифугированием, промывают этаполом и высушивают. Получают 9,4 г сухого вещества,П р и м е р 3. 200 жл чистого раствора, полученного после обраоотки бактериальных клеток способом, описанным в примере 2, смешивают с сульфатом аммоги 1 я до 0,4 насыще 1 шя и ставят па 2 час в холодильник прп 4 С. Смесь цептрифугпруют. Надосадочпую жидкость удаляют, осадок растворяют в воде и доводят рН до 7. Раствор диализируют через целлофан в проточной воде в течение 18 час. Диализованную жидкость центрифугируют, чтобы отделить небольшой нерастворившийся остаток, затем лиофилизируют. Получаю" 7,4 г сухого вещества,П р и м е р 4. К 1000 мл надосадочной жидкости, полученной после гомогенизации разбавленных водой бактериальных клеток, приливают 10 мл 20%-ного раствора хлористого кальция. Осадок центрифугируют и растворяют в 100 мл дистиллированной воды, К этой суспензии добавляют 3 г амоерлита. После сильного взбалтывания смесь центрифугируют и надосадочную жидкость лиофилизируют. Получают 1,8 г сухого вещества.П р и м е р 5. 500 лл надосадочной жидкости, полученной после гомогенизации разбавленных водой бактериальных клеток, смешивают с 500 лл 90%-ного фенола. Смесь сильно взбалтывают в течение 1 час при 4 С и центрифугируют при 5000 об/мин в течение 30 л 1 ин. Водную и фенольную фазы отделяют. Водную фазу подкисляют соляной кислотой, доводя р 1-1 до 2. Осадок отделяют центрифугированием, затем промывают этанолом и ацетоном и высушивают.К фенольной фазе добавляют ацетат натрия до 1%-ной концентрации, после чего добавляют четыре объема этанола. Осадок цептрифугируют, промывают этаполом и ацетоном, затем высушивают.Пример 6. 100 г влажных бактсрпальных клеток, промытых 50 объемами физиологического раствора и отцентрифугироваппых, смешивают с 1000 мл свежедистиллировапного 90%-ного фенола. Смесь взбалтывают г, тсче 5 10 15 20 25 30 ние 1 час при 10 С и центрифугируют. Слой фенола отделяют, и к 100 мл этого слоя добавляют ацетат натрия (1%) и четыре объема 96%-ного эталона, Полученный осадок центрифугируют, промывают этанолом и ацетоном и высушивают.П р и м ер 7. 4800 г влажпых нативных бактериальных клеток разбавляют в 2000 лил яичного белка и добавляют солевой раствор, доводя общий объем до 14 000 мл. Суспепзию выдерживают при 37 С в течение 3 час при непрерывном взбалтывании,13 000 лил этой смеси центрифугируют при 8000 обл 1 ин в течение 30 мин, Надосадочную жидкость отделяют, Осадок обезжиривают в три приема смесью в равных объемах спирта и эфира. После выпаривания получают сухое вещество.10 г вещества разбавляют 100 мл солевого раствора. Подкислив смесь соляной кислотой до рН 2, добавляют 100 мг пепсина, Смесь выдерживают в течение 4 час при 37 С, постоянно взбалтывая. Затем смесь центрифугируют при 2700 обмин в течение 15 лаан. Надосадочную жидкость отделяют, Осадок растворяют в исходном объеме солевого раствора, нейтрализуют от рН 7 и центрифугируют при 800 об(чин в течение 30 мин. Осадок промывает спиртом и высушивают. Надосадочную жидкость лиофилизируют. Способ получения вещества, обладающего противоопухолевой активностью, отличающийся тем, что штамм культуры рода 1.ас 1 оЬас 11- 1 цз, а именно, 1.ас 1 оЬас 111 цз Ьц 1 даг 1 сцз наг, 1 цгпогопесго 11 сапз 1.В - 5193 или100, 1.ас 1 оЬас 111 цз Ье 1 уе 11 сцз аг. 1 цгпогопесго 11 сапз31 или 1.ас 1 оЬас 111 цз асЫорЬ 111 цз чаг. ЫгпогопесгоИсапз43 выращивают в анаэробных условиях па питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли в течение 18 - 24 час при температуре 28 - 50 С, цельные или разрушенные клетки экстрагируют водой или феполом, а целевой продукт выделяют из экстрактов либо осаждением минеральной или органической кислотой при рН 1,5 - -1,0, либо вь 1 салпванием, лиоо осакденпем посредством оргаDичеоких растворителей, смешива 1 ощпхся с водой,

Смотреть

Заявка

6129

Иностранна фирма Тексим Энтрепрайз Экономик Эта Народна Республика Болгари

МПК / Метки

МПК: A61K 35/74, C12P 1/04

Метки: вещества, обладающего

Опубликовано: 01.01.1973

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-390699-sposob-polucheniya-veshhestva-obladayushhego.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения вещества, обладающего</a>

Похожие патенты