Штамм бактериофага рsеudомоnаs aeruginosa, используемый для идентификации и индикации микробов рsеudомоnаs aeruginosa

/28-13 Изобретениеской вирусолог носи к медициниологии,икр и диагносаегидпоза именно к бактерио тике микробов Ряе иче ошоп специфических бактериофапом гов Гвь актериофаг Мционных сточнсобой смесь с иоцианеус иэ канали ых водпецифиРя, аегаг МТактериофаговеус бактериофМФв колвакцин и сывактеризуется то азличовгоЬаслед двухслойным методом на (рН 7,2-7,4) фаг огни стериальных пяДиаметр негативных ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Аналогов в патентной и научнотехнической литературе не обнаружено,(54) ШТАММ БАКТЕРИОФАГА РБЕБРОМОМАБАЕКБС 1 ЮОБА, ИСПОЛЬЗУЕМОИ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ И ИНДИКАЦИИ МИКРОБОВ РБЕЦРОМОНАБ АЕМ 101 ИОБА(57) Изобретение относится к медицинской вирусологии имикробиолои представляетческих клоновцапова, Пиоциадепонирован поТбилисского НИИФаг МТхащими свойствамПри посевена агаре МартеМТпо морфолтен полиморфенколоний (н,к,) гии, а именно к бактериолоическои диагностике микробов Ряеис 1 ошопая аегиядпояа с помощью специфических бактериофагов, и касается нового пиоцианеус бактериофага. Поливалентный пиоцианеус бактериофаг МТдепонирован.под номером Фв коллекции Тбилисского НИИ вакцин и сывороток и характеризуется свойствами, присущими для диагностических бактериофагов: специфичностью и стабильностью литического спектра, высокой активностью и т,д. Эффективность диагностики Ря.аегпвдпояа посредством нового пиоцианеус бактериофага МТподтверждена на клиническом материа- Я ле (4.1 проба). 2УСпецифичность фага МТизучалась в опытах перекрестного ливиса с гетерологичными видами микроорганизмов: эшерихиями (199 штаммов),. шигеллами (197 шт.), салмонеллами (224 шт,) протеем (61 шт,), Сегздпда епгегосо 1 дг.дса (94 шт.).Диапазон литической активности но- ар вого бактериофага МТопределяют на ю коллекции музейных культур: Ря,аего 8 дпова - 25; Ря.К 1 иогезсепв - 5; Рз. ша 1 йорЬд 1 да - 5; Ря.геягоягегопд - 5;1 з,рцгЫа - 5 Рз.виггегд - 5; и на с 1170 свежевыделенных штаммах р ных видов и серологических тип3 микроорганизмов семейства Епге йегдасесе.Бактериофаг МТобладает строгой специфичесностью и широким диапазоном действия в отношении штаммов1472500 формула изобретения Штамм бактериофага Рзецс 1 ошопаз аегцддпоза ТбНИИВС НФ, используемый для идентификации и индикации микробов Рвецйошопав аегццдпова,Составитель А.Маныкин Редактор И.Сегляник Техред Л.Сердюкова Корректор В,РоманенкоЗаказ 1674/28 Тираж 501 ПоциисноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5,Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина,10 Рз.аегцдпова (лизирует 93,47. свежевыделенных штаммов).Фаг МТпроявляет высокую стабиль.ность специфического действия, Послемногократного пассирования на гомологичных и гетерологичных штаммах, наих смеси и на устойчивых клонах гомологичных бактерий, фаг МТостается строго специфичным, лизируя только один вид - Рв.аегцц.поза,Таким образом, фаг МТудовлетворяет требованиям, предъявляемым кдиагностическим фагам как по специфичности, так и по стабильности литического спектра.В результате изучения фаз взаимодействия фага МТс клеткой (эталонная культура Рз.аегця 1.поза 1038) установлено, что бактериофаг обладает 20высокой адсорбционной способностью(максимальное время адсорбции 10 мин)и урожайностью (110 частиц ни 1 инфицированную клетку), коротким скрытымпериодом (60 мин). 25Высокий показатель эффективноймножественности является одним изважнейших качеств йндикаторного фага,исключающий воэможность передозировки фага в РНФ (реакция нейтрализации Фага), следствием чего можетнаступить лизис без размножения.В этих случаях РНФ будет отрицательной при нахождении в среде бактерий.Установлено, что специфический бактериофаг МТобладает достаточновысоким показателем эффективной множественности, Интенсивное размножение фаза наблюдается при множественности 1 и ниже, 40Пиоцианеус бактериофаг МТхарактеризуется довольно высокой термоустойчивостью - нижняя граница термоинактивации равняется - 55 , верхняя -85 С. Для апробации эффективности РНФ в диагностике Рв.аегц 1.поза в частности, эффективности бактериофага МТкак индикаторного фага, проведен ряд опытов на клиническом материале. Всего исследовано 41 проба (20 проб крови, полученных из инфекционной больницы от больных с заболеваниями невыясненной этиологии; 10 проб гноя из ожогового центра; 11 проб мочи из разных инфекционных больниц).П р и м е р, К исследуемому материалу добавляют мясо-пептонный бульон (МПБ) в соответствии 1:10 и 1 мл индикаторного фага МТ, взятый .в рабочем разведении 10 фаговых частиц в 1 мл. Параллельно ставят контроль на присутствие в исследуемом материале свободного фага, По истечении времени инкубации содержимое каждой пробирки разводят в 100 раз МПБ. Конечные разведения прогревают при 56-58 С в течение 30 мин. По 1 мл содержимого каждой пробирки исследуют по методу Грациа на эталонной культуре Рв.аегцдпова 1038. Результаты исследований считают положительными, начиная с трехкратного нарастания титра фага.Таким образом, бактериофаг МТпо своим биологическим свойствам удовлетворяет требованиям, предъявляемым к индикаторным фагам. К тому же литическая активность бактериофага МТвесьма высока, а негативные колонии хорошо просматриваются на поверхности агара.