Способ получения лизата бактериофага

ОПИСАНФГ ИЗОБРЕТЕН И 56 БО 6 О Союз СоеетскнК Социалистических Республик61) Дополнительное к авт. свид-ву22) Заявлено 17.02,76 (21) 2321201/13с присоединением заявки23) ПриоритетОпубликовано 15.07,77. Бюллетень26Дата опубликования описания 24,08.77 1, Кл.- С 12 К 7/ Государственный комитет Совета Министров СССР по делам изобретенийи открытий) Заявите остовский-на-Д 54) СПОСОВ ПОЛУт 1 ВНИЯ ЛИЗАГЛ ВАКтГРИОфДГЛ Полученнь бл. 1. результагы приведень аблица 1 итр фага в лизате, частиц/мл Температура выращиваиия смеси, С 1 Х 10 4,4 Х 101 Х 10 6,4 Х 10" З,ЗХ 1081 Х 10 ц ЗХ 10 1 Х 10 а 1; 10 1,3 3 26 26,а фага по предлавыращивают прои ьной для культиО6,4 Наиболее высский ти лучен при 23 С, в то вр 30 С - о бщеп р и ня той о ного микроба температ тол ько 1 - 3 Х 10 а.Таким образом, за сче туры выращивания см можно получить увел 21 - 64 раза,ате потр фага в . емя как птпмальной уре выращдля чумивания -т снижения темпераеси бактерии - фаг 1 чение титпа фага в 1изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к получению бактериофагов микроорганизмов, которые применяются для диагностических целей.Известен способ получения лизата бактериофага путем совместного выращиваниякультур бактерий и фага на твердых илижидких питательных средах, при которомтемпература для выращивания бактериофагов является температурой оптимума ростабактерии - хозяина фага 11,Однако титр полученного лизата бактерио,фага недостаточно высок.С целью повышения титргаемому способу культурытемпературе ниже оптималвирования бактерий.Для получения чумного фага ДЭреллякультуры выращивают при 21 - 25 С, для получения холерного фага С культуры выращивают при 30 - ЗЗС.П р и м е р 1, Опытные пробы, содержащие смесь 5 Х 10 бактерий чумы штамма ЕВ1290 и 5 К 16 частиц чумного фага ДЭрелляв 5 мл казеиново-ферментативного бульона,выращивают в течение 20 ч при разных температурах, и клетки бактерий убивают хлороформом. Полученный фаголизат осветляютцентрифугированием, титруют, подсчитываютобразовавшиеся негативные пятна и вычисляют титр фага. н, В. И, Марченков, Н, Н. Новосельцеи А, В. Суичмезоваственный научно-исследовательскийумный институтПример 2. Опытные пробы, содержащие по 5 мл бульона Мартена рН 7,6 со смесью клеток холерного вибриона штамма М.124 с холерным фагом С (концентрация клеток бактерий 1 Х 10, концентрация фага 1 Х 10 частиц на 1 мл среды), выдерживают при за данных температурах в политермостате 18 ч. По окончании инкубации фаголизаты обрабатывают хлороформом, осветляют центрифугированием и раститровывают, В зависимости от температуры выращивания титры фага в лизатах изменяются следующим образом (см. табл. 2),Таблица 2 Титр фага в лизате,ч асти ц/млТемпература выращивания, смеси, С Следовательно, при температуре 33 - 35 С титр фага в лизате был в 3 - 3,5 раза выше, чем при 37 С - общепринятой оптимальной Составитель С. Малютина Техред А. Камышникова Корректор Л. Орлова Редактор В. Блохина Заказ 1661/12 Изд.596 Тираж 563 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская набд. 45Типография, пр. Сапунова, 2 1823,629313334,636,538,340 1 Х 102,9 Х 10 2 Х 10 в 1 Х 105,1 Х 10 6 Х 101,8 Х 1091,4 у,10 Зу 10 ф температуре для выращивания холернйх вибрионов.Таким образом, выра 1 цивание смеси бактерий и фагов при температурах нийе обще принятых оптимальных для данного видамикроорганизмов постоянно сопровождается повышением титра фага в полученных лизатах. Поэтому введение предлагаемого способа в производственные условия позволит по лучать исходные фаголжзаты с более высокой литической активностью, чем обычно выпускаемые препараты, что значительно улучшит их качество и приведет к снижению как себестоимости готовой продукции, так и по следующих операций, связанных с получением чистых препаратов бактериофагов. Формула изобретения1, Способ получения лизата бактериофага20 путем совместного выращивания культурбактерий и фага на питательной среде с последующим отбором фаголизата, о т л и ч а ющийся тем, что, с целью повышения титрафага, культуры выращивают при температу 25 ре ниже оптимальной для культивированиябактерий.2. Способ по и. 1, отличающийся тем,что для получения чумного фага ДЭреллякультуры выращивают при 21 - 25 С.30 3. Способ по п, 1, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что для получения холерного фага С культуры выращивают при 30 - 35 С.Источниии информации, принятые во внимание при экспертизе35 1. Адамс М. Бактериофаги, М Изд. Иностранная литература, 19 б 1, стр. 29, 30, 401 -403,