Способ получения 13-1-оксил-2, 2, 6, 6 тетраметилпиперилиденил-4-гидразона рубомицина хлоргидрата

1. Способ получения 13-(1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперилиденил-4)-гидразона рубомицина хлоргидрата формулы

из хлоргидрата рубомицина в спиртово-хлороформенной среде, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения процесса, хлоргидрат рубомицина обрабатывают гидразингидратом или безводным гидразином при молярном соотношении 1:(1,1-1,2) соответственно в среде метанол-хлороформ или этанол-хлороформ, взятых в объемных соотношениях 2:1 соответственно, при температуре 20-40^oС с последующим взаимодействием полученного гидразона рубомицина с 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидоном-4, взятых при их молярном соотношении 1:(2,5-4) соответственно.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процесс осуществляют в присутствии уксусной кислоты, взятой в количестве 10-25% от веса хлоргидрата рубомицина.

Данное изобретение относится к усовершенствованному способу получения спин-меченого антибиотика, обладающего противоопухолевой активностью, производного рубомицина - 13-/1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперилиденил-4/-гидразона рубомицина хлоргидрата.
Известен способ получения 13-/1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперилиденил-4-/-гидразона рубомицина хлоргидрата формулы I

заключающийся в том, что хлоргидрат рубомицина обрабатывают щелочным агентом, затем осуществляют взаимодействие полученного основания рубомицина с гидразоном 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 при молярном соотношении 1: (1,5-2) соответственно в среде хлороформ метанол, взятых в объемном соотношении 8: 1 соответственно, в присутствии уксусной кислоты, взятой в 4-кратном молярном избытке по отношению к основанию рубомицина, при 20-25^o с последующей обработкой отделенного от осадка раствора спиртовым раствором НСl, взятым в 2-кратном молярном избытке по отношению к основанию рубомицина и выделением целевого продукта осаждением диэтиловым эфиром. Выход целевого продукта около 40% [1]
Данный способ имеет следующие недостатки:
cравнительно невысокий выход целевого продукта (41,5%);
сложность получения, связанная с необходимостью перевода хлоргидрата рубомицина в основание, а также стадия обратного перевода основания в хлоргидрат, требующая использования абсолютных растворителей и строго аналитического контроля среды (незначительная передозировка НСl приводит к гибели нитроксильного радикала, деструкции целевого продукта);
использование гидразон-1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 тоже имеет недостатки, так как парамагнитный гидразон нестоек при хранении и в чистом виде практически не существует (очень сложная методика его получения из 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 дает малый выход гидразона).
Целью данного изобретения является повышение выхода целевого продукта и упрощение процесса в целом.
Поставленная цель достигается согласно изобретению способом получения 13-/1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперилиденил-4/-гидразона рубомицина хлоргидрата вышеприведенной формулы 1, заключающимся в том, что хлоргидрат рубомицина обрабатывают гидразингидратом или безводным гидразином при их молярном соотношении 1:(1,1-1,2) соответственно в среде метанол-хлороформ или этанол-хлороформ, взятых в объемных соотношениях 2:1 соответственно, при температуре 20-40^o с последующим взаимодействием полученного гидразона рубомицина с 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидоном-4, взятых при их молярном соотношении 1:(2,5-4)соответственно.
Процесс обычно осуществляют в присутствии уксусной кислоты, взятой в количестве 10-25% от веса хлоргидрата рубомицина. Выход целевого продукта 85-90%
Использование более 4 молей 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 нецелесообразно, так как выход целевого продукта не увеличивается. При использовании менее 2,5 молей 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 недостаточно связывается избыточный гидразингидрат, от которого известными физико-химическими методами избавиться невозможно. Избыток гидразингидрата берут для того, чтобы подавить реакцию образования нерастворимого азина рубомицина и максимально увеличить выход конкурентного гидразона рубомицина.
Существенными отличиями способа являются взаимодействие непосредственно хлоргидрата рубомицина с новыми исходными компонентами: с гидразингидратом или безводным гидразином при молярном соотношении 1:(1,1-1,2) соответственно в среде метанол-хлорформ или этанол-хлороформ, взятых в объемных соотношениях 2:1 соответственно, при температуре 20-40^oС с последующим взаимодействием полученного гидразона рубомицина с 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидоном-4, взятых при их молярном соотношении 1:(2,5-4) соответственно.
Пример 1. К 1 г рубомицина хлоргидрата (ХГ) добавляют 70 мл абсолютного метанола, 35 мл безводного хлороформа и прикапывают при перемешивании 0,11 мл гидразингидрата. Раствор перемешивают в течение двух суток, контролируя реакцию методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) на силуфоле в системе СНСl₃ СН₃OH Н₂O (13:6:1). Для гидразона рубомицина R_f 0,4. Для хлоргидрата рубомицина R_f 0,55. Затем добавляют 1 г 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 и перемешивают реакционную смесь в течение суток, контролируя по ТСХ образование конечного продукта. Отгоняют в вакууме наполовину растворитель при температуре в бане не выше 40^o, добавляют 200 мл сухого эфира, выпавший осадок отфильтровывают и промывают на фильтре эфиром. Получают 1,1 г (86%) 13-/1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперилиденил-4/-гидразона, препарат "эмоксил" с т. пл. 175-176^o с разл. R_f 0,64 при ТСХ на силуфоле в вышеуказанной системе. Найдено, N 7,45. С₃₆H₄₅N₄O₁₀. HСl. Вычислено, N 7,68% Спектр ЭПР в воде анизотропный триплет а_N 16,8 Э.
Пример 2. 6 г рубомицина ХГ растворяют в 420 мл абсолютного метанола, добавляют 210 мл сухого хлороформа и прикапывают при перемешивании сначала 0,66 мл гидразингидрата, а затем 0,66 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь перемешивают 16 ч при 25^oС, затем добавляют 6 г 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 и перемешивают еще 12 ч. Растворитель отгоняют наполовину в вакууме, добавляют к раствору 1,2 л сухого эфира, осадок отфильтровывают, промывают на фильтре эфиром. Получают 6,75 г (88%) эмоксила с т. пл. 175-176^o (с разл.). R_f 0,64 при ТСХ на силуфоле в системе СНСl₃ СН₃ОН Н₂O (13:6:1). Найдено, N 7,60. С₃₆Н₄₅N₄O₁₀. Вычислено, N 7,68.
Пример 3. В условиях примера 2 из 6 г рубомицина ХГ, 0,42 мл безводного гидразина, 0,66 мл ледяной уксусной кислоты и 6 г 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидона-4 получают 6,9 г (90%) эмоксила, R_f 0,64 при ТСХ на силуфоле в системе СНСl₃ СH₃OH H₂O (13:6:1).
Пример 4 В условиях примера 2 вместо абсолютного метанола используют абсолютный этанол. Выход эмоксила практически не изменяется.
Пример 5 В условиях примера 2 реакцию проводят при 40^oC. При этом время для завершения реакции на первой стадии (образование гидразона рубомицина) сокращается до 10 ч, а вторая стадия процесса (получение эмоксила) заканчивается за 8 ч. Выход эмоксила составляет 86%
1. Способ получения 13-(1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперилиденил-4)-гидразона рубомицина хлоргидрата формулы

из хлоргидрата рубомицина в спиртово-хлороформенной среде, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения процесса, хлоргидрат рубомицина обрабатывают гидразингидратом или безводным гидразином при молярном соотношении 1:(1,1-1,2) соответственно в среде метанол-хлороформ или этанол-хлороформ, взятых в объемных соотношениях 2:1 соответственно, при температуре 20-40^oС с последующим взаимодействием полученного гидразона рубомицина с 1-оксил-2,2,6,6-тетраметилпиперидоном-4, взятых при их молярном соотношении 1:(2,5-4) соответственно.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что процесс осуществляют в присутствии уксусной кислоты, взятой в количестве 10-25% от веса хлоргидрата рубомицина.