Способ получения 11 -гидроксистероидов

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Сфеэ СеаетскииСоциалистическихРеспублик876059 К ПАТЕНТУ(23) Приоритет Государственный комитет СССР по делам изобретений и открцтий(53) УАК 547.689. .6.07(088,8) Дата опубликования описания 231081(72) Авторы изобретения Иностранцыьфред Вебер,ахим-Фридрихри Лаурент и(ФРГ)транная Фирмеринг АГ" арно Кен апп, Хан Удольф В Эрнст Шеттле,Хельмут Даль,Клаус Аннен, Х Иноп 1 1) Заявитель ОСОБ ПО НИЯ 11 ф-ГИДРОКСИСУЕРОИДОВ Изобретение относится к способу по.лучения 116-гидроксистероидов общейформулы5 олоы се 15 фтор, хлор или вод тил мет илик еновая, этилиденов инилиденовая групп с 1-8 атомами угл О й "ал. 1дай ил с 1-4 а водород или алкмами углерода, водород или гидр х фармакологиче о ксилкой ак тивяЮ- ряда,цилокобладающиностью.Извеотлоксиючающи-аци закл О н способ получениятероидов прегнановойся в том, что 17 А 2снстероид гидроксилируют в 119-и жение с помощью гибковой культур мейства,Снгчн 1 аг а,Использование известного способа гидрокснлировання стероидов в 11 Р- -положениепозволяет получать новые фармакологические активные 11 Р-гидрокснстероиды общей формулыГ 13.Цель изобретения - получение новых 11(о-гидроксистероидов общей формулы Г.Поставленная цель достигается спо собом получения 11-гидроксистероидов общей формулы 1., заключающимся в ,том, что 11-дезоксистероид общей фор мулыгде Х, Я, й и й 9 имеют указанные1значения, й - водород, гидроксил илиалканоилокснгруппа с 1-6 атомами углерода, Ферментируют грибковой культурой семейства "Сцгчц 1 ага и полученное соединение в случае необходимости дегидрируют в положении 1, 2 с 5последующим выделением целевых продуктов известными методами.Пригодными для гидроксилнрованиягрибками семейства Сцгчц 1 аг 1 а являются Сц гчи 1 аг 1 а дцпайа ййй 1. 2380, ййй 102434, АТСС 12017 или 1 ГО(6286), Сцгчцага Га 1 сцйа ОМН, Сцгчц 1 аг 1 а9 епе 1 сцайа 1 ГО (6284) или Сцгчц 1 аг 1 ааасцацв 1 ГО (6292),При условиях, обычно применяемыхдля этих микроорганизмов, культурывыращивают в пригодной питательнойсреде прн аэрировании. Затем к культурам добавляют субстрат, растворенныйв пригодном растворителе, преимущест Овенно в эмульгированной Форме и ферментлруют, пока не достигается максимальное превращение субстрата.Пригодными растворителями для суб"страта являются, например, метанол,этанол, гликольмонометиловый эфир, дифметилформамид или диметилсульфоксидДля эмульгирования субстрата,в микронизированную форму его или раствор всмещивающемся с водой растворителе ф(метанол, этанол, ацетон, гликольмонометиловый эфир, диметилформамидили диметилсульфоксид) при сильномтурбулентном перемешивании вдуваютв преимущественно декальцинированнуюводу, содержащую обычные способствую- Ищие эмульгированию средства. Такимисредствами являются неионогенныеэмульгаторы, например аддукты этиленоксида или эфиры жирных кислотполигликолей, 40Дегидрирование насыщенных в первой позиции Ьф -стерои)цов общей формулы Т осуществляют как с помощьюмикробиологических методов, так и спомощью химических методов.Так Ь-стероиды при обычных условиях могут быть дегидрированы в пер"вой позиции культурами бактерйй семейства Вас 111 це (например, Вас 11 це1 еоцз или Васс 1 це зрЬаегсцв) илиАгйЬгоЬасйег (например, АгеЬгоЬасйе г фО5 ер 1 ех),Ь" -дегидрирование проводят такженагреванием й-стероидов в инертныхрастворителях с обычными для этой ре"акции окислителями, например диоксидом селена или 2,3-дихлор,б-дицианобенэохиноном.Соединения общей формулы 1 при локальном применении проявляют высо- -кую противовоспалительную активность цОв сочетании с низкимсистемным побочным действием,П р и м е р 1. а) 21,63 г 31,21-диацетокси;гидрокси-прегнен-она растворяют в 150 мл безводного метиленхлорида и 100 мл безводного формальдегиддиметилацеталя. Затем раствор охлаждают водой и в него вносят смесь 21,6 г полупятиокиси фосфора и 43 г кизельгура и переме-. шивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь Фильтруют и остаток промывают метиленхлоридом, к фильтрату добавляют триэтиламин, пока рН не достигнет 9, и сгущают в вакууме. Остаток перекристаллизовывают из смеси, метанол-метиленхлорид и получают 22,68 г 3,21-диацетокси-метоксиметокси- -5-прегнен-она с температурой плавления 182-184 С.в) В двухлитровой колбе Эрлен- мейера с 1 л стерильного питательного раствора, содержащего 0,3 дрожжевого экстракта, 0,3 Согпяеер .9 оцг и 0,2 крахмального сахара, установленного на рН 7,0, засевают сухую культуру Р 1 ачоЬа 1 сегцв деЬудГ 09 еоале АТСС 13930 и при 30 С встряхивают в течение 2 дней (175 об./мин),В поллитровой колбе Эрленмейера с 85 мл равной питательной среды прививают 10 мл выраженной культуры Г 1 ачоЬассегцв деЬудго 9 еЬаьв и при 30 еС встряхивают в течение 7 ч (175 об./мин) . Затем к культуре добавляют 5 мл стерильного раствора 0,5 г 39,21-диацетоксиА-метоксиметокси-прегнен-она в диметилФормамиде и встряхивают при 30 С в течение 65 ч (175 об./мин). После ферментации культуру дважды экстрагируют 100 мл этиленхлорида, экстракт сгущают в вакууме, остаток очищают с помощью хроматографии через оксид алюминия и получают 402 мг 21-гидроксис 1,-метоксиметокси-прегнен,20- -диона е температурой плавления 152- 153 С.с) В двухлитровой колбе Эрленмейе. ра с 1 л стерильного питательного раствора, содержащего 2 глюкозы и 2 Согозсеер .роцг, установленного на рН 6,5, прививают с промывкой сухой культуры Сцгчц 1 ага цвейга ййй. 2380 и при 30 С встряхивают в течение 60 ч (175 об,/мин) .В поллитровой колбе Эрленмейера с 90 мл стерильной питательной среды, содержащей 1,0 Со,говеер .9 оцг и 1,25 соевой пудры и установленной на рН 6,2, прививают 10 мл выращанной культуры Сцгчцаг 1 а 1,одаа и при 30 С встряхивают в течение 7 ч (175 об./мин). Затем к культуре добавляют стерильный раствор 30 мг 21-гид" роксий-метоксиметокси-прегнен- -3,20-диона в диметилформамиде и ферментируют в течение 65 ч.Перерабатывают культуру ферментации, как описано в примере 1 в, и получают 27 мг 119,21-дигидрокси- -метоксиметокси-прегнен,20-диона с температурой плавления 180-182 еС.-она смешивают с 50 мг безводной П р и м е р 5, а) 10 г 21-ацеп-толуолсульфокислоты и 350 мл без- токси-гидрокси-прегнен-.З, 20 водного метиленхлорида, охлаждают -диона обрабатывают 4 г изобутилвидо 0 С и после добавления 10 г метил- нилового,эфира при условиях примеовинилового эфира перемешивают при ра За и получают 13,5 г 21-ацетокси 0 С в течение 4 ч. Затем добавляют -176-(1 -изобутилоксиэтокси) -4-прег-:триэтиламин, пока рН не достигнет. 9, нен,20-диона в виде масляной диасы концентрируют в вакууме, Получают тереомерной смеси.58 г 3 9,21-диацетоксиЫ-(1-меток- О в) Раствор 0,1 г смеси 21-ацетоксиэтокси) -5-прегнен"она в виде ди- сий- (1 -изобутилоксиэтокси) -4 астьреомерной смеси с температурой -прегнен,20-диона в 2 мл диметилплавления 80-118 С (перекристалли- Формамида гидроксилируют Сцгчц)агфазованная из метанола проба плавится цпаса МРВ). 2380 при условиях примеопри 132-134 С) . ра 1 с и получают 119,21-дигидроксив) При условиях примера 1 в ра -173 (1-изобутилоксиэтокси) -4-прег. створ 600 мг ЗР,21-диацетоксиМ- нен,20-дион,в (1 -метоксиэтокси) -5-прегнен-онав виде диастереомерной смеси в 5 млдиметилформамида обрабатывают куль- -диона смешивают с 5 мг безводнойтурой Г)ачоЬасйе гане Оебудгодепапз 20 п-толуолсульфокислоты, 25 мл безводАТСС 13930 и получают 394 мг 21-гидроксис(;(1 -метоксиэтокси) -4-прегпропана и перемешивают при комнатнойнен,20-диона в виде диастереомер- температуре в течение 13 ч. Реакцион ной смеси с температурой плавления166-17 ОСную смесь перерабатывают, как опи 166-178 С.с) Раствор 100 мг диастереомерной 21-ацетоксиа-(2 -тетрагидропирасмеси 21-гидроокиси-.17 сЬ-(1-метокси-диона в видеэтокси) -4-прегнен,20-диона в 2 мл диастереомерной смеси с температ ойемпературодиметилформамида при условиях приме- плавления 185-200 С.ра 1 с ферментируют культурой Сцгчц 1 а- О в) Раствор 0,1 г смеси 21-ацетокг 1 а Ьцпаа Мйй). 2380 и получают 105 мг си.-(2 -тетрагидропиранилокси)- 11 ф,21-дигидрокси-,(1 -метоксиэток- -4-прегнен,20"диона в 2 мл диметилси)-4-прегнен,20-диона в виде масля- формамида гидроксилируют Снгчцаг)аной диастереомерной смеси, . ццпаеа Мйй 2380 цри условиях приме. ра 1 с и получают 115,21-дигидроксиП р и м е р 3. а) 10 г 21-ацеток- -170 (2 -тетрагидропиранилокси) -4 сисб-гидрокси-прегнен,20-диона -пре гнен-З, 20-дион.смешивают с 13 мг безводной и-толу- П р и м е р 7, а) 50 г 21-ацетоколсульфокислоты и 130 мл безводного сис-гидрокси-бс-метил-прегненметиленхлорида, охлаждают до ОфС и -3,20-диона при условиях примера Запосле добавления 2,3 г метилвинило обрабатывают 13,9 г метилвиниловогового эфира перемешивают при ООС при- эфира и получают 59 г 21-ацетоксимерно 7 ч, Реакционную смесь обраба- -17 А-(1 -метоксиэтокси) -бс(-метилтывают, как описано в примере 2 а, и -прегнен,20-диона в виде аморфнойполучают 11,6 г 21-ацетоксие- (1 - массы.-метоксиэтокси) -4-прегнен,20-диона 45 в) Раствор 200 мг 21-ацетоксин.с температурой плавления 135-150 С, в (1 -метоксиэтокси) -бсср-метил-прегв) Раствор 0,1 г диастереомерной нен,20-диона в 0,4 мл диметилформасмеси 21-ацетокси(1-метокси- мида гидроксилируют Сцгчц 1 аг 1 а Ьцпаа.этокси) -4-прегнен,20-диона в 2 мл МВВЕ 2380 при описанных в примередиметилформамиде при описанных в при 1 с условиях и получают 111,21-дигидмере 1 с условиях ферментируют куль- роксиА- (1 -метоксиэтокси) -6 А-метилтурой Сцгчц)агфа ццпаа Мйй 2380, и -4-прегнен,20-дион,получают 11,21-дигидроксис-(1 в , 1-метоксиэтокси) -4-прегнеи,20-дион. П р и м е р 8. а) 2 г 21-ацетокП р и м е р 4. а) 10 г .21-ацеток- си-гидроксиВ-метил-прегненси-гидрокси-прегнен,20-диона . -3,20-диона смешивают с 5 мг безводпри условиях примера За обрабатывают ной и-толуолсульфокислоты и 25 мл беэ 2,5 г этилвинилового эфира и получа- водного метиленхлорида и охлаждают доют 12,5 г 21-ацетокси, - (1 -эток- ОС. Затем при перемешивании к смесисиэтокси) -4-прегнен,20-диона в ви-добавляют О,5 гметилвинилового эфира,де масляной диастереомерной смеси, 60 перемешивают при ОеС в течение 5 чв) Раствор 0,1 г смеси 21-ацеток- и еше в течение 12 ч при комнатнойсио 1- (1 -зтоксиэтокси) -4-прегнен- температуре. Перерабатывают реакцион,20-диона в 2 мл диметилформамкда ную смесь, как описано в примере За,гидроксилируют Сцгчц)агфа Ьцпаса Мйй и получают 2,1 г 21-ацетоксиа,2380 при условиях примера 1 с и полу в (1 -метоксиэтокси) -16 Р-метил-прегнен,20-диона в виде масляной диастереомерной смеси.в) Раствор 50 мг смеси 21-ацетоксиА-(1 -метоксизтокси) -16-метил- -4-прегйен-Ииона в 1 мл диметилФормамида гидроксилируют Согчц 1 ага 1,цпаса Мйй. 2380 при описанных в примере 1 с условиях и получают 11 ф,21- -дигидрокси,-(1 -метоксиэтокси) - -169-метил-прегнен,20-дион.П р и м е р. 9. а) 50 г 17 Ж-гидрокси-прегнен,20-диона при условиях о примера За обрабатывают 15 г метил" винилового, эфира и получают 51,2 г 173, в (1-метоксиэтокси) 4-прегнен,20- -диона с температурой плавления 115- 152 фС. 15в) Раствор 0,1 г 17 с(-(1-метокси- этокси) -4-прегнен,20-диона в 1 мл диметилформамиде Ферментируют культурой Сцгчц 1 ага 1,цпайа Мйй. 2380. при описанных в примере 1 с условиях Я и получают 119-гидроксис.- (1 -метоксиэтокси) -4-прегнен,20-дион с температурой плавления 85-103 оС.П р и м е р 10. а) 5, г 39,21" -диацетокси.-гидрокси-прегяен- -2,-она при описанных в примере 1 а условиях в 150 мл метиленхлорида об- рабатывают 380 г ацеталя формальдегид-бис-гликольмонометилового эфира, 50 г полупятиокиси фосфора и 100 г кизельгура и получают 45,8 г 39,21- -диацетоксиЫ-(2-метоксиэтоксиметокси) -5-прегнен-она с температурой плавления 160-161 оС.в) При условиях примера 1 в 0,5 г 31,21-диацетокси-2 -метоксиэток си-метокси) -5-прегнен-ояа обрабатывают культурой ГачоЬасегцм де" ЬуЬгодепапв АТСС 13930 и получают 390 мг 21-гидрокси; (2-метоксиэтоксиметокси) -4-прегнен,20-диона 4 О в виде стекловидной массы.с) При условиях примера 1 с ЗО мг 21-гидрокси; (2 -метоксиэтокси-метокси) -4-прегнея,20-диона обрабатывают культурой Сц гчц 1 а га цпайа 4 Мйй 1. 2380 и получцот 24 мг 1.1 ф,21- -дигидроксис; (2-метоксиэтокси-метокси) -4.-прегнен,20-диона с температурой плавления 143-147 С.-П р и м е р 11. В двухлитровой колбе Эрленмейера с 500 мл читатель- фО ного раствора, содержащего 0,1 дрожжевого экстракта, 0,5 Согпаеер 11- дцог и 0,1 крахмального сахара и установленного на рН .7,0, прививают с промывкой сухой культуры АгсЬгоЬас" 55 сег в 1 щр 1 ех АТСС 6946 и при 30 С в течение 48 ч встряхивают (190 об./мин)В 0,5 литровой колбе Эрленмейера с 90 мл питательной среды прививают с 10 мл выращенной культуры АгйЬ го" 6 О ЬасВег звр 1 ех и при 30 С в течение б ч Встряхивают (165 об,/мин) . Затем к культуре добавляют 1 мл стерильного раствора 50 мг 115,21-дигидрокси-. -17 сЬ-метоксиметокси-прегнен,20-диона в диметилформамиде и ферментируют в течение, 42 ч.Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1 в, и получают 44,5 мг 11 з,21-дигидроксие 1,--метоксиметокси,4-прегнадиен,20 диона с температурой плавления 229231 фС.П р и м е р 12. В двухлитровойколбе Эрленмейера с 500 мл питательного раствора, содержащего 1 дрожжевого экстракта (ЬЕсо); 0,45 динатрийгидрофосфата, 0,34 калийгидрофосфата и 0,2 Тиееп 80 и установленного на рН 6,7, прививают с промывкойсухой культуры Мосагда д 1 оЬегцаАТСС 9356 и при 30 С в течение 72 ч,встряхивают (190 об./мин),В.двухлитровой колбе Эрленмейерас 950 мл питательного раствора, содержащего 2,0 Согпвйеер 1,1 цог,0,3 диаммонийгидрофосфата и 0,5Тиеей 80 и установленного на рй 6,5,прививают с 50 мл выраженной культуры Мосагда д 1 оЬегц 1 а и при ЗО С втечение 24 ч встряхивают (190 об./мин) .Затем в культуру добавляют 5 мл стерильного раствора 0,25 г 119,-21-дигидроксис 6- (1 -метоксиэтокси) -6-метил-прегнен,20-диона в диметилформамиде и ферментируют в течение 72 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1 в,и получают 0,21 г 11 ь,21-дигидроксис-(1 -метоксиэтокси) -бе(-метил,4-прегнадиен,20-диона с точкой плавления 173 ос.П р и м е р 13. а) 50 г 21-ацетоксиЫ,-гидроксипрегнен,20-дионасуспендируют в 600 мл формальцегиддиэтилацеталя и 600 мл метиленхлорида и охлаждает до (-30) - (-40) С.При перемещивании вносят смесь 75 гполупятиокиси фосфора и 150 г кизельгура и перемешивают в течение 30 чпри -30 оС. Раствор Фильтруют и нейтрализуют триэтиламином. После отгонкирастворителя перегоняют сметаноломи остаток перекристаллизовывают изметанола. Получают 35,9 г 21-ацетокси-этоксиметокси-прегнен,20-диона, который после повторной перекристаллизации плавится,при 137-139 оС.в) В двухлитровой колбе Эрленмейера с 1 л питательного раствора, содержащего 1 Согпьеер 1 ццог и 1,25соевой пудры и установленного на рН6,2, прививают с проьвявной сухой культуры Сцгчцага 1,цпаса Мйй 2380 ипри ЗОоС в течение 72 ч встряхивают(175 об./мия) .В 50-литровом ферментаторе с 23 лстерильной питательной среды прививают1 л выращенной культуры Сцгчцага1 цпа 1 а и при 30 С в течение 24 ч приаэрации с 2 м /ч культивируют.В 50-литровом ферментаторе с 36 лпитательного раствора, как описано выше, прививают 4 л предварительно ферментированной культуры Сцгчц 1 аг 1 а,.ннайа и при 30 С в течение 10 ч культивируют при аэрации 2 м 9/ч и перемешивании 220 об;/мин . Затем к культуре добавляют 10 г 21-ацетокске- -этоксиметокси-прегнен,20-дионаз 200 мл монометклового эфира этиленгликопя. С десятого часа рН держится между 6,5 и 7,0Через 4 ч добавляют 10 г 21-ацетокскК-этокскметокси-прегнен,20-диона в 200 млмоноэтилового эфира эткленгликоля и Оферменткруют 23 ч при указанных условиях.Культуру ферментацик трижды экстрагируют 10 л этиленхлоркда к затем перерабатывают дальше так, как.описано в примере 1 в. Получают 13,8. г11,21-дигидроксио-этоксиметокси-лрегнен,20-диона с температуройплавления 153-154 С.П р и м е р 14. а) 25 г 21-.аце- Щтокси.-17 сЬ-гидрокси-прегнен,20-диона суспендируют в 200 мл формальдегкддипропилацеталя и 320 мл меткленхлорида и охлаждают до -2 ООС. При перемешивании вносят смесь из 49,3 г полупя тиокиси фосфора и 97 г кизельгура иперемешивают в .течение 22 ч при "20 С.Раствор фильтруют и нейтрализуют трк"этиламином. Метиленхлорид отгоняют в вакууме и формальдегидципропилацетапьную фазу сливают с высадившегосямасла. После отгонки растворителя в вакууме выкристаллизовываются .19 г 21-ацетокскпропоксиметокси- . -регнен,20-диона с температурой плавления 145-147 фС. . 35в) 10 г 21-,ацетоксиА-пропоксиметокси-прегнен,20-диона перема-. лывают с 1 г Тиееп 80 и трехкратном количеством воды в Оупо-мельнице типаК 01. (Га, ЗасЬоеп, Ваве 1),. Эту измель-Щ ченную массу стерилизуют с 1%-ной НОминимум 4 ч.Сцгчц 1 аг 1 а .Ьцпайа ййй 1. 2380, как описано в примере 13 в, выращиваютв колбе для встряхивания и предферментаторе и затем прививают в главном ферментаторе. Этот ферментатор устанавливают так же, как описано.в при;мере 13 в, и выращивают в течение 10 ч лри условиях примера 13 в. Затем к .культуре прибавляют измельченную мас- су 21-ацетоксиЫ;лропоксиметокси- -4-прегнен,20-диона .и .Ферментиру- .ют в течение 44 ч при рН 6,4-6,7. Культуру ферментации, как описано в , примере 13 в, перерабатывают и получают 6,5 г 11 Р,21-дигидрокси-лро. локсиметокси-прегнен20"диона сУтемпературой плавления 134/135-136 С.П.р и м е р 15. а) 50 г 21.-ацетоксид,-гндрокси-прегнен,20-. Щ -диона суспендируют с 500 мл формальдегидцибутилацеталя и 500 мл метиленхлорида и охлаждают до -35 аС. При леремешивании вносят смесь из 74 г полулятиокиаи Фосфора и 150 г кизель гура и перемешивают в течение ЗО чпри -35 фС. Раствор фильтруют и нейтрализуют триэтиламином. Метиленхлорид отгоняют в вакууме и Формальдегиддибутилацетальную фазу сливаютс высадившегося масла., После отгон"ки растворителя в вакууме выкристаллизовываются 38,7 г 21-ацетоксия;бутоксиметокси-прегнен20-дионаф ьс температурой плавления 123,5-124,5 С.в) 8 г 21-ацетокси;бутоксиметокси-прегнен,20-диона перемалывают с 0,8 г Тиееп 80, как описано впримере 14 в. Сцгчц 1 а,г 1 а Ьцпаа Мйй2380 выращивают и Ферментируют вколбе для встряхивания в.качествекультуры для выращивания, в предферметаторе и основном Ферментаторе,как описано в прймере 13 в, Через 10 чв основной ферментатор,добавляют1вещество и ферментируют 50 ч.Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13 в, иполучают 3,7 г 111 ь,21-дигидроксиИ-бутоксиметокси-прегнен,20-диона с температурой плавления 79-81 С,Пример 16, а) 10,6 г 21-ацетокси-бс-фторЫ-гидрокси-прегнен,20-диона растворяют в265 мл метиленхлорида и 47,7 млформальйегидднметилацеталя, добавляют смесь из 7,95.г полупятиокиси Фос"Фора и 15,9 г кизельгура и в течение90 мин под азотом перемешивают прикомнатной температуре. Раствор фильтруют и смешивают с 2,1 мл триэтиламина, Растворитель отгоняют и остаток выкристаллизовывается из метанола, получают 7,6 г 21-ацетокси-бг 1,- -Фторс-метоксиметокси-прегнен- -3,20-диона с температурой плавления 161-167 С.в) Сцгчц 1 аг 1 а Ьцпаса ййй 1. 2380 выращивают, как описано в примере 13 в, в колбе для встряхивания, предварительном н основном ферментаторе. Через 10 ч в основной Фрементатор добавляют 5 г 21-ацетокси-б 6.;Фтора- -метоксиметокси 4-прегнен,20-диона .в 100 мк.моиометилового эФира этиленгликоляК этому времени рН составляет 6,5-7,0. Через 14 ч добавляют 5 г 21-ацетокси-бсср-фторе-метокси- -прегнен,20-диона в 100 мл монометилового эфира эткленгликоля н ферменткруют 26 ч.Культуру ферментацик перерабатывают, как описано в примере 13 в, и получают 4,2 г 119,21-дигидрокси-бсср,-фтор- -17-метоксжметокск-лрегнен,20- -диона с температурой плавления 190- 192 С.П р и м е р17. а) 43 г.39 21-диацетокси,-гкдроксиб-метил" -прегнен-она растворяют в 800 мл формальдегиддиметилацеталя и охлаждают до -15 фС. Порциями вносят смесь 43 г лолупятиокиси фосфора и 86 г кизельгура и перемешивают при ;15 Св течение 15 ч. Раствор. фильтруют,нейтрализуют триэтиламином и растворитель отгоняют в вакууме, Остатоквыкристаллизовынается из метанола, получают 31,5 г ЗФ 21-диЪцетоксиЫ-метоксиметокси-метил-прегнен-она с температурой планления 1175118 Св) Г 1 ачоЬасег 1 цв депудго 9 епапвАТСС 13930 выращивают и ферментируют,как описано в примере 1 н. Через б чк культуре добавляют 4 мл стерильного раствора 0,2 г 31 Ь,21-диацетоксис 1.-метоксиметоксиЬ-метил-прег"нен-она в диметилформамиде и встряхивают еще 65 ч.После прошедшей ферментации куль- г 5туру перерабатывают, как описано впримере 1 в, и получают 163 мг 21-.гидроксиН;метоксиметокси-метил-прегнен,20-диона с температурбйплавления 126/128-129 фС. 20с) Сцгчцаг 1 а ццпайа ййй 1. 2380 ныращивают и Ферментируют как описанов примере 1 с, Через б ч к культуредобавляют раствор 50 мг 21-гидроксис 1-метокси-метил-прегнен,20-25-диона в диметилформамиде и ферментируют 65 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере1 в, и получают 34,5 мг 11,21-дигидроФксий-метоксиметоксибр-метил-прегнен,20-диона с температуройплавления 204/205-20 баС,П р и м е р 18, а) 29,1 г 21-ацетокси-б-хлорс-гидрокси,б-прегнадиен,20-диона растворяют в 730 млметиленхлорида и 131 мл формальдегид- З 5диметилацеталя добавляют смесь из22,12 г полупятиокиси фосфора и 44 г кизельгура и смесь перемешивают под азотомв течение 2,5 ч при комнатной темпе -ратуре. Раствор фильтруют и смешивают с 5,8 мл триэтиламина, Растворитель отгоняют и остаток перекристаллизовывают из метанола при добавленииактивированного.угля и 1 Ъ триэтиламина, Получают 15,6 г 21-ацетокси-б"-хлорс 1,-метоксиметокси,б-прегнадиен,20-диона с температурой плавле"ния 183-186 С.в) Сцгчц 1 аг 1 а 1.цпайа ййй 1. 2380,как в примере 13 в, выращивают в колбе для встряхивания, предварительноми основном Ферментаторе. Через 9 чв основной ферментатор добавляют 3 г21-ацетокси-б-хлоре.-метоксиметокси,б-прегнадиен,20-диона в 60 млмонометилового эфира этиленгликоля.При рН 6,4-6,7 Ферментируют 20 ч.Культуру ферментации перерабатывают,как описано в примере 13 в, и получают1,8 г 119,12-дигидрокси-б-хлоре- -метоксиметокси,б-прегнадиен,20" 60/235-236 ас,Пример 19. а) 38,85 г 21-ацетокси-гидрокси-прегнен,20-диона перемешивают с 235 мд формаль- б 5 дегиддиизопропилацеталя и 500 мл метиленхлорида и охлаждают до -20 С. При перемешивании вносят смесь из 75 г полупятиокиси фосфора и 150 г кизельгура и перемешивают при -20 С в течение 20 ч. Смесь фильтруют, промывают метиленхлоридом и триэтиламином, доводят до рН 9, Растворительотгоняют в вакуугле и остаток экстрагируют метиленхлоридом. Раствоо промывают полчнасыщенным оаствооом хлооипа натрия, счшат сульФатом натоия, обоабатывают активированным углом, отсасывают через кизельгур и концентоирчют в вакууме, Остаток хроматогоафируют на силикагеле смесью толуолуксусный эфир, получают 35,8 г 21- -ацетокси-изопропоксиметокси- -прегнен,20-диона, который после кристаллизации с пентаном имеет температуру плавления 111-117 С.в) Сцгче 1 ага Ьвпаса ййй 1. 2380выращивают, как описано в примере 13 в,в колбе для нстряхивания, предварительном и основном ферментаторе. Через 9 ч в основной Ферментатор добав. ляют 12 г 21-ацетокси,-изопропоксиметокси-прегыен,20-диона в 240 мл этиленгликольмонометилового эфира при рН 6,5-7,0 и ферментируют в течение 15 ч, Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13 в, и получают 8,4 г 11 9,21-дигидроксиаС-изопропоксиметокси- -прегнен,20-диона с температурой плавления 71/73-78 С.с) Аг 1 И гоЬасе г в 1 врех АТСС 6946 выращивают, как описано в примере 11, в колбах для выращивания и Ферментации. Через 5 ч в колбу для ферментации добавляют 1 мл стерильного раствора 50 мг 11,21-дигидроксис- изопропоксиметокси-прегнен,20-диона в этиленгликольмонометиловом эфире и ферментируют в течение 42 ч. Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 1 в, и получают 32 мг 11 В,.21-дигидроксис-изопропок симетокси,4-прегнадиен,20-диона с температурой плавления 58/63-65 С.П р и м е р 20. а). РачоЬасег 1 цвдеЬудгодеац АТСС 13930 выращивают в колбе для встряхивания, предварительном и основном ферментаторе. Через 24 ч в основной ферментатор добавляют 19,5 г 1 б-метилен-Зф,21-диацетоксиметоксиметокси-прегнен-она в 500 мп диметилформамида и Ферментируют в течение 28 ч. Культуру Ферментации перерабатывают, как описано в примере 13 в, и получают 15,5 г 16-метилен-гидроксис- -метоксиметокси-прегнен,20-диона с температурой плавления 147/150- 151 С.в) Сцгчц 1 аг 1 а 1,впала ййй 1. 2380 выращинают, как описано в примере 13 в, в колбе для встряхивания, преднарительном и основном ферментаторе. Че876059 сн,у1СОХ О- фЮВ,формации,е при экспертиз1618599,66. Составитель Т. Левашовадактор Г, Кацалап ТехрЕд М.Голинка ректор С к еж 400 Нодпиственного комитета СССРобретений и открытийЖ, Раушская наб., д, 4 лиал ППП фПатентф, г. ужгород, ул. Проект рез 9 ч в основной ферментатор добавляют 20 г 1 б-метилен-гидроксиЫ,- -метоксиметокси-прегнен,20-диона в 400 мл этиленгликольмонометилового . эфира при рН 6,4-6,7 и ферментируют 8 ч.Культуру ферментации перерабатывают, как описано в примере 13 в, и получают 11 г 1 б-метилен,21-дигидроксий-метоксиметокси-прегнен,20- -диона с те ературой авления 205/ О 206-208 ф С.П р н м е р 21. АгейгоЬасеег е 1 юр 1 ех АТСС 6946 выращивают, как описа- но в примере 11, в колбах для выращивания и ферментации. Через 5 ч в колбы для ферментации добавляют 1 мл сте 15 рильного раствора 50 мг 11,21-дигид. рокси,-пропоксиметокси-прегнен- -3,20-диона в этиленглккольмонометиловом эфире и ферментируют в течение 42 ч. Культуру Ферментации перераба Щ тывают, как описано в примере 1 в, и дополучают 41 мг 11,21-дигидроксисЬ-, -пропоксиметокси,4-прегиадиен.,20- -диона с температурой плавления 121/ /125-127 а С.25Фюрмула изобретенияСпособ получения 11 Ь-гидроксистероидов общей Формулы 13 каз 9397/88 ТирВНИИПИ ГосУдаРпо делам и113035, Москва,где Х - водород, Фтор, хлор или метил,У - метиленовая, этилиденоваяили винилиденовая группа,й - алкил с 1-8 атомами углерода,й - водород или алкил с 1-4 ато-.мами углерода,"й 4 - водород или гидроксил, пунктирная линия .означает возможную двойную связь, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что 11-дезоксистероид общей формулыде Х., Ю й и й имеют укаэанные зн Мения, й 4 - водород, гидроксил или алканоилоксигруппа с 1-6 атомами углерода, ферментируют грибковой культурой семейства Согча 1 ага и полученное соединение в случае необходимости дегидрируют в положении 1,2 с последующим выделением целевых продуктовПриоритет по признакам:25.01.78 Х - атом водорода, Фтора или метил,й - алкил С-Сб;19.12.78 ", Х - атом хлора,й - длкил Су-С 8источники инпринятые во внимани е1. Патент ФРГ 9кл. С 07 Т 5/00, 19