Способ качественного определения 4-оксикумарина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 19) (11) 182 4 1 6 51) 4 ГОСУД АРС ПО ДЕЛАМ ЕНИЯ д,; ЕТЕПЬСТ ВТОР СНОМ36А.А. Хабаровственный медицин 8 П др. физикобиологичес стительного Ылым, 1976 ал абад ННЫЙ НОМИТЕТ ССС ЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬ САНИЕ ИЗО(71) Курский госудаский институт(56) Георгиевский Вхимические методы аки активных соединенпроисхождения, - Ашхс. 45.Там же, с. 139-144.(54)(57) СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ 4-ОКСИКУМАРИНА путем растворения анализируемой пробы с последующеиндикацией в Уф-области, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с цельюповьппения селективности и чувствительности определения и сокращенияего продолжительности, растворениепроводят в смеси этилового спирта иэтиленгликоля при их объемном соотншении 1:2-3 соответственно, полученный раствор обрабатывают 11 оследовательно 407.-ным раствором формальдегида и 657.-ной азотной кислотой ииндикацию проводят по флуоресценцииполученного раствора.1182348 Таблица 1 Ярко голубая 10-20 20-25 Диметилформамид Ярко голубая Диоксан Бледно-голубая 25-3030-40 30-40 35-45 35-40 Бутиловый спирт Изобутиловый спирт Изоамиловый спирт Иетиловый спирт Ярко-фиолетовая Этиловый спирт Флуоресценции нет Уксусная кислота Уксусный ангидрид Ксилол Изобретение относится к фармацев тической химии и аналитической химии пестицидов, а именно к способам определения 4-оксикумарина, и может быть применено для качественного об наружения этого соединения как в чистом виде, так и в виде примеси в различном материале при фармацевтических, токсикологических и санитарных исследованиях. 1 ОЦелью изобретения является повышение селективности и чувствительности определения и сокращение его продолжительности путем применения Флуоресцентной реакции. 15П р и м е р 1. Качественное определение 4-оксикумарина в субстанции.. К 1-2 мг исследуемого порошковидного образца прибавляют 2 мл этилового спирта, взбалтывают до растворения 20 препарата и прибавляют 3 мл 407.-ного формальдегида (формалина) и 0.,1 мл концентрированной азотной кислоты. В ультрафиолетовом свете со светофильтром УФСили УФСнаблюдают 25 яркую фиолетовую флуоресценцию.П р и м е р 2. Обнаружение примеси 4-оксикумарина в лекарственных препаратах и пестицидах кумаринового ряда. 30 5-10 мг исследуемого образца растворяют в 2 мл этилового спирта и прибавляют 4 мл этиленгликоля, перемешивают. К полученному раствору прибавляют 3 мл 407.-ного формальдегида (Формалина) и 0,1 мл концентрированной азотной кислоты. Если в ультрафиолетовом свете со светофильтром УФСили УФС-Ь наблюдается Фиолетовая флуоресценция, то это свидетельствует о наличии в образце примеси 4-оксикумарина.Подобной реакции не дают и не мешают определению другие органические и неорганические соединения, а также органические соединения, близкие по структуре к 4-оксикумарину: кумарин, 7-оксикумарин, 6-метилкумарин, герниарин, зоокумарин, фепромарон, неодикумарин, синкумар, псорален, ксантотоксин, ксантотоксол, бергаптен, келлин, салициловая кислота, бензойная кислота и пр.Данные по влиянию различных растворителей на длительность и характер флуоресценции 4-оксикумарина (С =25 мкг/мл) после обработки 407- ным раствором формальдегида и концентрированной азотной кислотой представлены в табл.1.1182348 Лрдолжение табл. Гексан ГлицеринЭтилацетатАцетон Слабо-фиолетовая 15-20 30-35 10-15 Этиленгликоль Та блица 3 Количество96,67-ногоэтиловогоспирта, мл Длительностьфлуоресценции, с Количество этиленгликоля мл 50-60 30 Таблица 2 50-60.60-65 70-80 Концентрация этилового спирта, Х 85-95 10 40 20 30 40 50 60 50 70 55-65 80 60-70 90 55 60-7.0 96,6 Влияние концентрации этилового спирта и соотношения этилового спирта (96,6 Ж) и этиленгликоля на длительность флуоресценции 4-оксикумарина (С = 25 мкг/мл) после обработки 407-ным раствором формальдегида и концентрированной азотной кислотой представлено в табл.2 и 3. Длительность флуоресценции, с 3545-50 45-50 45-50 50-60 50-60 55-60 55-60 1 05-115 100-105 80-90 60-65 В табл, 4 представлено влияние концентрации формальдегида на длительность флуоресценции 4-оксикумарина (С = 25 мкг/мл) в среде этилового спирта и этиленгликоля (.1:2) после обработки формальдегидом и концентрированной азотной кислотой. В качестве оптимальной выбрана 40 Х-ная концентрация, что соответствует процентной концентрации формалина,,1182348 Т а б л и ц а 4 Продолжение табл.5 Концентрация фор-. Длительностьмальдегида, % флуоресценции, с 5 100-110 90-95 80-85 40 104 30 Ц Влияние концентрации азотной кислоты (объем 0,1 мл) на длительностьфлуоресценции 4-оксикумарина (С == 25 мкг/мл) после обработки 40%-нымраствором формальдегида и азотной 20 кислотой представлено в табл. 6.В качестве оптимальной концентрацииазотной кислоты выбрана 65%-наякислота. 20 Флуоресценциинет 10 25 Концентрация азотфной кислоты, % Длительностьфлуоресценции, с Таблица 5 50 Длительность З 5флуоресценции, с Количество,смеси растворителей,Количество40%-ногоформальдегида, мл 40 30 70-75 20 60-70 10 45 Влияние запредельных количестви концентраций реактивов (в сторону увеличения и уменьшения) на флуоресценцию 4-оксикумарина (С = 25 мкг/мл) после обработки 40%-ным формальде гидом и азотной кислотой представлено в табл.7. При изменении параметров методики определения снижается длительность флуоресценции, что затрудняет анализ. 90-95 105-115 105-115 100-105 100-105 80-90 60-65 10-15 Влияние соотношения количеств смеси растворителей (этанол-этиленгликоль, 1:2) и 40%-ного формальдегида на длительностЬ флуоресценции 4-оксикумарина (С = 25 мкг/мл) после обработки 40%-ным раствором формальдегида и концентрированной азотной кислотой представлено в табл.5. 60-70 75-85 80-90 80-90 100-115 100-10590-95 85-90.30 65 30 65 5-10 20 20 50 40 0,5 50 40 30 40 0,5 30 40 Продолжение табл.8 Существенныеоперации Снятиеспектра 30 Нет Предлагае-мый способ 45 Известныйспособ Наблюдениев УФ-светефлуоресценции Взятие наНет вески препарата Нет Растворениепрепарата Добавлениереактивов Нет В табл. 8 представлены сравнительные данные по продолжительности определения 4-оксикумарина известным и у предлагаемым способами.Таблица 8 40Необходимое время, мин 20-25 10-15 10-15 5-10 10-15 20-30 25-35 15-20 10-15 Итого 40 8 Данные об органических соединениях, сходных по строению с 4-оксикумарином, но не дающие подобной реакции и не мешающие определению, представлены в табл.9..1182348 Т а б л и ц а 9 Производные4-оксикумарина Кумарины Фурано- ипиранокумарины Прочие соединенияи группы соединений Кумарин Псорален Зоокумарин Келлин 7-Оксикумарин Фепромарон Салициловая кислота Ксантотоксин 6-Метилкумарин НеодикумаринСинкумар Метилсалицилат Ксантотоксол Бензойная кислота БергаптенИмператорин Герниарин Ацетилсалициловаякислота Виснадин СульфаниламидыБарбитураты Карбокромен ПеуценидинДигидросамидинСфондин Витамины Алкало иды Флавоноиды Изопимпинелин Составитель В. Шкилькова Редактор А. Лежнина Техред А.Бабинец Корректор М, ДемчикЗаказ 6095/39 Тираж 896 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5Таким образом, предлагаемый способ по сравнению с известньк являет ся более селективным, чувствительным (чувствительность известного способа 10 г, а предлагаемого 0,1 мкг/мл) и значительно менее продолжительным.Он может использоваться в фармацев б тических и контрольно-аналитических лабораториях для качественного определения 4-оксикумарина в субстанции и примеси его в лекарственных препаРатахф производных этОГО соединения 45 согласно требованиям техническойдокументации), в центральных заводскихлабораториях для контроля производства данных препаратов, в сельскохозяйственной химии для определения 4-оксикумарина в ратицидных приманках(зоокумарине) и в санитарно-гигиенических исследованиях для обнаруженияследов 4-оксикумарина в воздухе производственных помещений, сельскохозяйственных продуктах, почве и организме отравленных животных.