Способ получения антрациклиновых гликозидов

(5 ИЗОБРЕ ИСАНИ ТЕНИЯ ПАТЕН(72) Микеле Карузо, АнФранческо Анджелуччи иАркамоне (ТТ)) 657622,кл 131,4 Селеш СПОСОВ ПОЛУЧЕНИЯ АНТРАОЗИДОВ(57) Изооретение касается.гликозидов, в частности получения антрациклиновых гликозидов, обладающих противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание нового более активного соединения указанного класса, Синтез ведут удалением 7-гидрокси,группы в карминомициноне, растворенном в смеси диоксана и этанола (1;.1), с помощью гидрогенолиза в присутствии Я Рй/ВаЯО при комнатной температуре в течение 3 ч с последующей обработкой полученного 4-диметил-деоксидауномицинона в безводном метилен- хлориде 4-фторбензолсульфонилхлоридом в присутствии И,Л-диизопропилзтил-. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР 2амина и каталитического количествач-диметил-аминопиридина, Далее ведутреакцию полученного продукта в тетраогидрофуране с бензиламйном при 40 Св течение 36 ч с последующим удалением бензильной группы с помощью каталитического гидрирования в присутствии 5 Х Рс 1/ВаЯОб( при 1 атм и комнатто, ной температуре в течение 1 ч с использованием в качестве растворителясмеси этанола с уксусной кислотой икаталитического количества 377."нойводной НС 1, защитой ИН-группы в полученном 4-деметокси-амино-деокси-дауномициноне с помощью трифторук"сусного ангидрида в .безводном метиленхлориде при 0 С, защитой 13-кето"О, ч Щгруппы котализацией этиленгликолемпри температуре дефлегмации в присут- ЛИНОВЫХ ствии п-толуолсульфокислоты, бромированием в метиленхлориде бромом при40 С в присутствии 2,2 -азобисизобутиронитрила в течение 3 ч, обработкои водной трифторуксусной кислотойпри ОС в течение 1 ч. Затем полученныи 4-деметокси-И-трифторацетамидо-дауномицинон подвергают реакции схлорсахаро 1 ь( (защищенным) в безводном рметиленхлориде при 5-10 С в присутст-вии трифторметансульфоната серебра споследующей обработкой при 0 С в течение 3 ч 0,1 н. водным растворомИаОН. Целевой продукт вьдепяют в свободном виде или в виде гидрохлорида.обработкои метанольным раствором НС 1, ВЭ.:Новые вещества обладают активностью. науровне даунорубицина в клетках аденокарциномы толстой кишки человека.2 табл.1614764 водного 4-диметил-0-сульфоната, Другие 0,3 г продукта выделяют очисткойМаточного раствора на хроматогоайиче.- кой колонке, используя в качестве (1) злюента смесь толуопа и ацетона, Выход 80%. ТСХ на Кизельгеле Р 254(м, 2 Н,ОЬО ,О ); .7,80 (й20 1 способуантрациклиО Он 0 Н 2 дд, Л 7,9, 8, 1,3,х противоопуобладающи холевой активностью.Цель изобретения - разработка спо- "соба получения нового антрациклиново го гликозида, обладающего преимуществами в биологической активности.11 р и м е р 1. 4-Диметил-деокси дауномиципон,1,5 г 4-диметилдауномицинона, раст-,воренного в смеси 100 мл диоксана и100 мл этанола, гидрируют в присутствии 0,3 г 5% Рй/ВаБО при комнатнойтемпературе в течение 3 ч, После Фильтрования растворитель удаляют в вакууме и 4-деметокси-деоксидауномицинон выделяют с почти количественным35выходом, ТСХ на Кизельгеле 0254 (Мегск)с использованием смеси толуола и ацетона (9: 1 по объему), КХ = О, 30,40П р и м е р 2. 4-Диметил-0-(4 -Фторбензолсульфонил)-7-деоксидауномицинон,К перемешиваемому раствору 1,0 г4-диметил-деоксидауномицинона в200 мл безводного метилендихлорида,45содержащего 0,52 мл И,И-диизопропиламина и каталитическое количество4-диметиламинопиридина, при комнатнойтемпературе добавляют 0,52 г 4-ФторбензолсульФонилхлорида. Спустя 30 мин50превращение завершается, и реакционную ,смесь промывают 0,1 н. водной солянойкислотой, а затем водой,Органический раствор сушат над безводным сульФатом натрия, растворительотФильтровывают и удаляют в вакууме,Неочищен.ый продукт помещают в небольшое количество толуола и кристаллизуют до получения 0,6 г чистого произН, ОБ,77 (с Н Изобретение относится кполучения новых гликозидовна общей Формулы Гц, 1 Н, 2-Н); 7,62 (дд,.1 Гц, 1 Н, 3-Н); 7,23 (м,9-ОН); 3,1-2,8 (м, 4 Н, 7-СН10-СН); 2,38 (с, ЗН, СОСН); 2,0-1,9(м, 2 Н, 8-СН),П р и м е р 3. 4-Деметокси-бензиламино-деоксидауномицинон.0,8 г соединения примера 2 растворяют в 100 мл тетрагидроФурана и добавляют 0,5 мл бензиламина, Полученную смесь выдерживают при 40 С в те-чение Зб ч при перемешивании, затем,добавляют 50 мл 1 н. водной солянойкислоты и 100 мл метилендихлорида.Органическую Фазу промывают дваждыводой и сушат над безводным сульФатомнатрия, Растворитель удаляют в вакууме. Неочищенный продукт хроматографируют с мгновенным испарением, используя в качестве элюирующего растворителя смесь толуола и ацетона до получения 0,48 г 4-деметокси-бензиламино-деоксидауномицинона. Выход 69%.ТСХ на пластине Кизельгеля Р 254 (Мегск)с использованием смеси толуола и ацетона (9:1 по объему), Нй = 0,28.Полевая масс-спектро;етрия (Мф)457,Уф макс (МеОН): 548 нм,Н ЯМР (200 МГц, СОС 1),Х: 13,58(катализатора) и полученную смесьгидрируют при 1 атм в течение 1 ч прикомнатной температуре, После этого катализатор отфильтровывают, и растворитель выпаривают в вакууме. Неочищенный продукт хроматографируют с мгновенным испарением, используя в качестве элюента смесь толуола и ацетона дополучения 0,2 г 4-деметокси-амино-деоксидауномицинона. Выход 753. ТСХ 20на пластине Кизельгеля Г 254 (Мегс 1 с.);использованием смеси толуола и ацетона (9:1 по объему), КЙ = О, 17,Полевая масс-спектрометрия (М)367. 25Уф,74 макс (меОн): 536, 508 нм.(м 7-СНа, 10-СНа) 2 37 (с ЗНСОСН 9); 2,0-:Г,9 7 м, 2 Н, 8-СНН)П р и м е р 5. 4-Деметокси-Я-три 35фторацетамидо-деоксидауномицинон.О;2 г 4-деметокси-амико-деоксидауномицинона растворяют в 20 мпбезводного метилендихлорида, охлаждают до О С и добавляют 0,3 мл трифторуксусного ангидрида. Спустя 10 миндобавляют бикарбонат натрия. Органическую фазу дважды промывают водой ивьщеляют, сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме до получения соединения с количественным выходом. ТСХ на Кизельгеле,Р 254 (Мегс 1 с) с использованием смеситолуола и ацетона (9:1 по объему),П р и м е р 6. 2-Деметокси-0- -трифторацетамидодауномицинон,Суспензию 0,2 г соединения примера 5- в 15 мл бензола и 0,5 мл этиленгликоля кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч в присутствии 0,015 г п-толуолсульфокислоты, исполь" зуя аппарат Дина-Старка, Полученную,4С)смесь охлаждают, промывают воднымбикарбонатом натрия и водой, затем выпаривают досуха до получения 0,2 гцелевого кеталя.Полученный кеталь растворяют в1.25 мл метилендихлорида при 40 С и обрабатывают бромом (1,7 мл 0,6 М раствор в метилендихлориде) в присутствии0,25 г 2,2 -азобисизобутиронитрила,Спустя 3 ч полученную смесь охлаждают и экстрагируют водным раствором бикарбоната натрия, затем дваждыпромывают метилендихлоридом и растворитель удаляют в вакууме,Остаток растворяют в 3 мп трифторфуксусной кислоты и 0,3 мл воды при 0 Си перемешивают в течение 1 ч, затемэкстрагируют метилендихлоридом,Органическую фазу промывают водным бикарбонатом натрия и водой. Растворитель отфильтровывают, сушат надбезводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме до получения О,1 г 4-деметокси-1)1-трифторацетамидодауномицина. Выход 483. ТСХ на пластине Кизельгеля 7254 (Иегс 1)с использованиемСН С 1 и ацетона (95;5 по объему),КЕ = 0,23,Полевая масс-спектрометрия (М )+479.П р и м е р 7, 4-Деметокси-аминодаунорубицин (1 а),0,08 г 4-деметокси-И-трифторацетамидодауномицинона, полученного попримеру 6, растворяют в безводномметилендихлориде, и полученный растовор охлаждают до 5-10 С. Одновременно и быстро добавляют раствор 0,024 г1-хлор-И,О-дитрифторацетилдаунозамина 7. полученного по известному способув диэтиловом эфире, и раствор 0,150 гтрифторметансульфоната серебра в мети"лендихлориде при интенсивном перемешивании.Спустя 5 мин добавляют еще 0,070 гтрифторметансульфоната серебра испустя 5 мин реакцию гасят коллидином.Полученную смесь фильтруют, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой, сушат иконцентрируют. в вакууме.Остаток хроматографируют на колон-ке с силикагелем, элюируя метилендихлоридом до получения 4-деметокси-И-трифторацетамидо-Х-трифторацетилдаунорубицина (1 а). Полученное сое-.динение растворяют в 10 мл ацетона и1614764 обрабатывают 30 мл 0,1 н. водногогидроксида натрия при 0 С в течение3 ч. Затем к раствору добавляют 0,1 н,водную соляную кислоту до установле 5ния рН 4,5 и исключают агликон экстракцией метилендихлоридом, Затем рНводного раствора устанавливают 8,6 иэкстрагируют метилендихлоридом, сушатнад безводным сульфатом натрия, концентрируют до небольшого объема и подкисляют. до рН 4,5 0,1 н, метанольным раствором хлористого водорода дополучения указанного в заглавии соединения в виде гидрохлорида, 15 1,6 183 О/ 10 1,9 192 О/10 2,29 200 1/10 ан Гликозиды по изобретению являются противоопухолевыми агентами. Активность представительного соединения формулы (1) 4-деметокси-аминодауно-20 рубицина (1 а) определяли, сравнивая его цитотоксичность ин витро с цитотоксичностью даунорубицина (ПИК) в клетках аденокарциномы толстой кишки человека, чувствительных (Ьочо) илиустойчивых (Ьочо / РХ) к доксорубициа изобретени Способ получения антрациклинбвь: гликозидов формулы 1 Н В табл. 1 приведен тест на ингибирование колонии спустя 4 ч после об работки. абл осо 0 оединени Ьочо,ИИ 0,мха/мп 35/мп ОН отличающийс удаляют 7-гидроксильну 40 номицинона формулы 11 0 0тем, что руппу ка ОН кже активности ин виротив рассеянной лейОпределяли во (1 а) и ЭМК кемии Гросса. 4 0 диоксана инолиза в прикомнатной в смесиощью гид/ВаЯОтечение о пр 3 ч, полученный омицинон формуеоксидау С, % ТОКС г 0 О/10 О/10 1/10 133 167 200 52,5 Н Результаты приведены в табл,работка внутривенно +1 ч).Таблиц НО 0растворенногэтанола, с псутствии 5%температуре4-деметил-длы 111 Т/С(%) - среднее время выживания обработанных мьппей/среднеевремя выживания контрольных животныхХ 100,ТОКС - смертность оттоксикоза,1614764 с помощью реакции при О С с трифтор-.оуксусным ангидридом н безводном метилендихлориде, вводят заново 7-гидроксигруппу в полученное защищенное соединение формулы Ч 11 подвергают взаимодействию в безводном Метиленхлориде с 4-фторбензолсульфонилхлоридом в присутствии Х М -диизо.тУпропиЛэтиламина и каталитического ко-. .личества 4-диметил-аминопиридина, полученный ч-деметокси-4-фторбензолсульфонил-деоксидауномицинон формулы 1 Ч О ОН О ОН 10 СОСГ,ВН О ОН с помощью сначала защиты 13"кетогруппы кетализацией этиленгликолем притемйературе дефлегмации в присутствиип-толуолсульфокислоты, взаимодействияполученного кеталя при 40 С .с бромомв метилендихлориде в присутствии .2,2 -азобисизобутиронитрила в течение 3 ч и последукщей обработки7-бромированного промежуточного соединения водной трифторуксусной кислотой при ОС в течение 1 ч с получением 4-деметокси-М-трифторацетамидо-дауномицинона формулы Ч 111 20 Гв тетрагидрофуранедействию с бензиламичение 36 ч, удаляютиз полученного 4-деамино-деокси-даунлы Ч одвергают взаимоном при 40 С в теобензильную группу етокси-бензил мицинона формуО 30 Осгмн о он он О ОН которое подвергают взаимодействию с защищенным галоидсахаром формулы 1 Х На 1 осг О Фс помощью каталитического гидрирования в присутствии 57. Рй/ВаЯО при 1 атм при комнатной температуре в те 40н чение 1 ч, с использованием в качест ве растворителя смеси этанол-уксусная ос 3 кислота и каталитического количества где На 1 представляет собой атом хло-ной водной соляной кислоты, за- ра, щищают 4-.аминогруппу полученного 4-де" в безводном метиленхлориде при метокси-амино-деокси-дауномицино- . 5 - 10 С в присутствии трифторметан 45 . о, на Формулы Ч 1 сульфоната серебра с получением4-И,4 -В, 0-антрациклинтрифторацетил - защищенного гликозида, из ко О он торого после обработки при О С в течение 3 ч О, н, водной гидроокисью натрия при необходимости выделяют 0 О:соединение формулы 1 в виде гидрохлорида с помощью обработки метанольным