Способ получения фосфонатных эфиров нуклеозидов

(23) Приоритет Опубликовано 25.04,80, Бюллетень 15 ао делам изобретений и открытийДата опубликования описания 28.04,80(72) Авторы изобретения Ю, В, Хропов, Н. Н. Гуляев и Е, С. Северин Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им, М. В. Ломоносова(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФОСФОНАТНЫХ ЭФИРОВ НУКЛЕОЗИДОВ ОВ, - Р - ОСИ1ОН О йСЗНСН -2 В,= С 1 С ГСИ СН - ; С тато аденина, урацилогов природныхдля биологичес нукле стру дов, след на ких ис необходимований. ия фосфо лдчающ,3 -0 уклеози их фосф хлорангтен способ получ ат- обнуклеозидов, втветствуюших 2производных ни соответствуюшчем в качестведихлорангибридь эфиров "ку соо деновых изопродов хлор оновых идридов сутстель достигается использотве хлорангидрида фосфоноохлорангидрида, а в качесто основания - триэтиламипили анги вавых ислот м ганичес кисл пр ве споль 11 редлагается усовершенствованный способ получения фосфонатных эфиров нуклеозидов обшей формулы вии органического основания - пиридина, - снятие изопропилиденовой защиты с помощью 01 н. раствора серной кислоты,нейтрализацию реакционной смеси гидроокисью бария и выделение продукта с помощью 5высоковольтного препаративного электроореза, Выход целевого продукта 15-20%Недостатками известного метода являются невысокий выход целевого продукта,необходимость использования для выделения целевого продукта дефицитной и дорогостоящей аппаратуры (установка высоковопьтного электрофореза), продолжительность способа: обработка гидроокисью бария для нейтрализации реакционной смеси,отделение сульфата бария фильтрованием,Целью изобоетения является увеличение выхода целевого продукта и упрощение процесса,Указаннйя цкием в качес7291 пропилиденаденозина. Реакционную смесьперемешивают 1 ч при 0-5 С и 15 ч приокомнатной температуре, затем упариваютдо объема 1-2 мл и продукт высаживаюч,добавляя 100-200 мл абсолютного эфира,Дальнейшую очистку осушествляют припомощи препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле с флуоресцентным индикатором в системе метиловыйспирт - хлороформ (3:1 по объему), Полосу силикагеля, содержащую продукт, обнаруживают по поглошению в Уф-свете,высушивают и вещество элюируют метанолом. После отгонки растворителя остаток выдерживают 30 мин в 1 мл 90%-но-го раствора трифторуксусной кислоты прикомнатной температуре, Далее кислотуудаляют в вакууме, остаток высушивают):затирают с абсолютным эфиром до кристаллического состояния и получают 146 мго/аденозин-Я -хлорацетиламинометилфосфоната, выход 32%,Найдено, %: С 34,59; Н 4,51; Р 6,97,С 45 Н 48 йбО СР Р Н 0Вычислено, %: С 34,34; Н 4,43;Р 6,81.Соединение охарактеризовано хроматографической подвижностью в системе нбутиловый спирт - уксусная кислота - во.да (5;2;3 по объему), й 0,32.Соединение охарактеризовано электрофоретической подвижностью относительноlаденозин-монофосфата в системе уксусная кислота - 0,05 М ацетат аммония(рН 6,5), Е 0,7,П р и м е р 3, Аденозин-хлорметилфосфонат,Раствор 130 мг (1 ммоль) хлорметилфосфоновой кислоты и 208 мг (1.ммоль)40пятихлористого фосфора в 5 мл абсолютного хлороформа выдерживают при комнатной температуре 30 мин без доступа влаги. Затем раствор упаривают и остатоквысушивают в вакууме (0,01 мм рт,ст,)при 50 С в течение 1 ч, Полученный моО 45нохлорангидрид хлорметилфосфоновой кислоты растворяют в 8 мл абсолютного хлороформа и к раствору добавляют при О 0,5 мл (3,5 ммоль) триэтиламина, а затем 123 мг (0,4 ммоль) 2,3 -0-изо ыпропилиденаденозина, Реакционную смесьперемешивают 1 ч при 0-5 С и 15 ч приОкомнатной температуре, затем упариваютдо объема 1-2 мл и продукт высаживают,добавляя 100-200 мл абсолютного вяра.55Дальнейшую очистку осушествляют припомощи препаративной тонкослойной хрсматографии на силикагеле с флуоресцент96 ным индикатором в системе метиловый спирт - хлороформ (2;3 по.объему). Полосу силикагеля, содержашую продукт, определяют по поглощению в Уф-свете, высушивают и вещество элюируют метанолом. После отгонки растворителя остаток выдерживают 30 мин в 0,5 мл 90%-ного раствора трнфторуксусной кислоты при комнатной температуре, Далее кислоту удаляют в вакууме, остаток высушивают, затирают с абсолютным эфиром до кристаллического состояния и получают 186 мг аденозин-хлорметилйосфоната, выход 45%, Найдено, %: С 32,02; Н 4,76; Р 7,18; С 44 Н И 505 С 9 Р 2 НО Вычислено, %: С 31,77; Н 4,60; Р 7,45.Соединение охарактеризовано хроматографической подвижностью в системах н-бутиловый спирт - уксусная кислота- вода (5;2:3 по объему), Р 0,34; изопропиловый спирт - концентрированный аммиак - вода (7;1:2 по объему), Р 0,49,Соединение охарактеризовано электрофоретической подвижностью относительно аденозин-монофосфата в системах: уксусная кислота - 0,05 М ацетат аммония (рН 6,6), Е 0,7; триэтиламмоний-бикарбонатный буфер (рН 7,5) Е 0,5. Формула изобретенияСпособ получения фосфонатных эфиров нуклеозидов обшей формулы О 0 Я, Р ОСНОК ОН гдЕ Х= С 1 СНВгСН,СК С 1 СН СжНСН, - ;В - остаток апенина, урацила, включающий обработку 2 ,3 -0-изопропилиденовых производных нуклеозидов обшей формулы НОСНа В О О/ /3 3729196 Составитель Л, НикулинаРедактор О. Кузнецова Техред М. Петко Корректор М, Демчик Заказ 1907/23 Тираж 495 ПодписноеЦН ИИПИ. Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская набд. 4/5 Филиал ПГ 1 П "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 где В имеет указанные значения,хлорангидридом фосфоновых кислот обшей формулы где Й. имеет укаэанные значения,в присутствии органического основания, 10снятие иэопропилиденовой зашиты и очистку целевого продукта, о т л и ч а юш и й с я тем, что, с целью упрощенияпрадесса и увеличения выхода целевогопродукта, в качестве хлорангидрида фосфоновых кислот используют монохлорангидрид, в качестве органического основания - триэтиламин, очистку целевого продукта осуществляют перед снятием нзопропилиденовой защиты с помошью тонкослойной хроматографии на силикагеле сфлуоресцентным индикатором а последующее снятие зашиты проводят 90%-нымраствором трифторуксусной кислоты.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Гуляев Н, НШаркова Е. Вдедюкина М. МСеверин Е. С., Хомутов Р. М.Избирательное ингибирование ацетил-КоАсинтетазы структурными аналогами ацетиладенилата. -"Биохимия, 36, % 6,1971, 1267 (прототип),