Способ количественного определения дигидрокверцетина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК 401 А 1 ЕЛЬСТВ П раба- аллиствии соляк укющим вора,ализа требуетс обеспечивающа ехническои сдщеделения дигид- ВкаНйЕМ "орЕа КнцкИй ским магнием в ты.в водной или ип). ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИ(71) Центральный научно-исследовательский и проектный институт лесохимической промышленности(72) Т.П, Табачкова и Н.М. Бородина (56) 1, Экстрактивные вещества агх Оапцгса. Количественное содержание кверцетина и дигидрокверцетина. Н.А,Тюкавкина, К.И.Лаптева, В,А. Ларина и др. - Химия природных соединений, 1967, М 5, с.289-301.2. Запрометов М.Н, Основы биохимии фенольных соединений. МВысшая школа, 1974, с. 216. Изобретение относится к области аналитической химии, а именно к способам количественного определения дигидрокверцетина, и может быть использовано в производстве переработки сибирской лиственницы при анализе предгидролизата и продуктов его переработки,Известен способ определения дигидрокверцетина, основанный на образовании комплексного соединения с хлористым алюминием 1, и способ спектрофотометрического определения по максимуму собственного поглощения. Максимум поглощения комплексаобразующегося по реакции с хлористым алюминием, лежит в УФ-области (290 - 365 нм).Это создает определенные трудности в использовании этого способа для осуществления контроля за производством дигидрокверцетина и качеством полупродуктов й готовой продукции в заводских условиях,(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОДЕЛЕНИЯ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА(57) Сущность изобретения - пробу обтывают в водно-ацетоновой среде метческим магнием сначала в присутуксусной кислоты, затем добавляютную кислоту при объемном отношениисусной не менее 2;1 с последуфотометрированием полученного раст4 табл. так как для выполнения ан специальная аппаратура, анализ в УФ-области,Наиболее близким по т ности является способ опр рокверцетина с ИСпяользо восстановления металличе присутствии соляной кисло спиртовой среде 2) (прото Эту реакцию используют для качественного"обнаружения фяавоноияов, Дяя конине- )в ственного определения дигидрокварцетина способ по реакции с металлическим магнием не применяется и в литературе не описан, При использовании этого способа в количественном анализе наблюдается низкая точность анализа, При анализе предгидролизата (и продуктов его переработки) по этомуспособу окраска получаемого соединения неустойчива. Это приводит кнеточным результатам определения дигидрокверцетина в анализируемых объектах.Цель изобретения - повышение точности и чувствительности определения. Цель достигается тем, что в предлагаемом спосо бе определения дигидрокверцетина обработку анализируемой пробы металлическим магнием ведут в водно-ацетоновой среде, снабжала в присутствии уксусной кислоты принагревании, затем добавляют соляную 10 кислоту в объемном соотношении к уксусной не менее 2:1.Проведение реакции в две стадии (использованиее более слабой восстанавливающей системы для проведения реакции 15 восстановления металлическим магнием) обеспечивает стабильность окраски. Точ- ность анализа при этом значительно повышается.При использовании водно-ацетоновой 20 среды в качестве растворителя при проведении реакции с металлическим магнием в 3 раза повышается чувствительность реакции.Отличительными признаками предлага емого способа являются обработка пробы металлическим магнием сначала в присутствии уксусной кислоты, а затем - соляной, взятой в объемном отношении к уксусной не менее 2;1, и проведение реакции в водно ацетоновой среде.Объемное соотношение соляной кислоты к уксусной ограничено тем, что при уменьшении соляной кислоты окрашенное соединение неустойчиво, окраска быстро 35 исчезает. Анализ становится невозможным,Способ осуществляют следующим образом.П р и м е р 1. Определение дигидрокверцетина в предгидролизате. 40Отбирают 1,0 см пробы, помещают в коглодоннчю колбу вместимостью 50 - 100 см и разбавляют до 2,0 см дистиллированной водой. Затем приливают 2 см ацетона, добавляют 0,2 г Мц-стружки и колбу присо единяют к обратному холодильнику. Затем через холодильник приливают 2 см ледяной уксусной кислоты, колбу погружают в предварительно нагретую до 80 - 90 С водяную баню и оставляют на 30 мин, По исте чении указанного времени колбу отсоединяют от холодильника и к содержимому в колбе приливают 4 см концентрированной соляной кислоты (объемное соотношение НС к уксусной 2:1). Раствор 55. перемешивают и количественно переносят в пробирку вместимостью 20 см, ополаскивая колбу 5 см ацетона и дистиллированной водой до метки. Раствор в пробирке перемешивают и фотометрируют на ФЭКе в кювете с толщиной поглощающего слоя= =1,0 см при длине волны А = 530 нм относительно контрольного опыта. Для приготовления контрольного опыта предгидролизат в количестве, соответствующем основному опыту, помещают в пробирку и разбавляют водой до метки без добавления реактивов, Массовое содержание дигидрокверцетина, определяемое по калибровочному графику, составило 1,156 мг/см .П р и м е р 2. Определение дигидрокверцетина в фильтрате,Отбирают 5 см пробы и помещают взкруглодонную колбу., Приливают 2 см ацетона, добавляют 0,2 г Мц-стружки, 1 см уксусной кислоты и далее поступают, как при анализе предгидролизата, После нагревания содержимого колбы на водяной бане с обратным холодильником в колбу приливают 5 см соляной кислоты (объемное отнозшение НС к уксусной 5:1). После фотометрирования окрашенного соединения массовое содержание здигидрокверцетина составило 0,014 мг/см .П р и м е р 3. Определение дигидрокверцетина в товарном продукте,, Готовят раствозо пробы в ацетоне с концентрацией 1 мг/см, йля анализа отбирают 0,5 см приготовленного раствора, помещазют в круглодонную колбу и разбавляют до 2 см ацетоном, Затем приливают 2 см дисзтиллированной воды, добавляют 0,2 г М 9- стружки, колбу присоединяют к обратному холодильнику и через холодильник приливают 2 см ледяной уксусной кислоты. Послезнагревания к содержимому в колбе приливают 5 см концентрированной соляной кисзлоты (объемное отношение НС:СНзСООН = =2,5:1), Далее поступают, как при анализе предгидролизата. Массовое содержание дигидрокверцетина в пробе 9,42 мг/см .В табл, 1 приведены примеры, иллюстрирующие предлагаемый способ (примеры 1-5), а также примеры проведения анализа в условиях, выходящих за йределы условий предлагаемого способа (примеры 6-8),В примерах 1, 4, 5 приведены результаты анализов предгидролизатов одной и той же пробы, полученные при различных объемных соотношениях уксусной и соляной кислот.Точность и правильность предлагаемого способа проверена методом добавок заданных масс. В табл. 2 приведены результаты определения заданных масс со статистическими характеристиками.Результаты табл. 2 свидетельствуют о том, что предлагаемый способ обладает высокой точностью, так как воспроизводимость результатов высокая (относительное1767401 6 Таблица 1 Таблиц Относительная ощибкэ пределео Масса Добавле Среднее квадратическое отклонение единичного определения Ях драйдена ДКВ вробе, мг Степенправил арантируемая очность+Относительное стандарт чое откло нение, Я КВ вис- ходной ноДКВдо масггы мг ости е,мг+5,3 -5,0 -2,0 -0,4 0,014 0,016 ,0052 0,012 0,020 0,025 0,008 0,019 0,051 0,064 0,013 0,022 0,160 0,174 стандартное отклонение изменяется от 0,012 до 0,064 в диапазоне 0,15-0,50 мг ДКВ). Предлагаемый способ обладает и достаточной правильностью, о чем свидетельствует отсутствие систематической погрешности, невысокая ошибка определения (заданные массы находятся с ошибкой, не превышающей 5,0 Д) и высокий процент выявления, то есть процентная степень правильности (найденный результат, выраженный в процентах от истинного значения) в среднем 100 ,Для доказательства достоверности получаемых результатов предлагаемый способ был сравнен с методом УФ-спектрофотометрии (по максимуму собственного поглощения и по реакции с хлористым. алюминием). Результаты сравнительных анализов приведены в табл, 3.В табл. 4 показаны результаты, иллюстрирующие повышение чувствительности предлагаемого способа в водно-ацетоновой среде по сравнению с известным в водно- спиртовой среде,Предлагаемый способ обладает высокой точностью, не требует сложной аппаратуры, легок в исполнении и может быть использован в производственных условиях 5 для аналитического контроля за содержанием дигидрокверцетина в производстве переработки сибирской лиственницы при анализе предгидролизата и продуктов его переработки.10 Формула изобретения Способ количественного определениядигидрокверцетина путем обработки пробы металличес им магнием в присутствии 15 соляной кислоты в среде растворителя споследующим фотометрированием окрашенного соединения, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и чувствительности определения, обработку 20 металлическим магнием ведут в водно-ацетоновой среде сначала в присутствии уксусной кислоты при нагревании, затем добавляют соляную кислоту в объемном соотношении с уксусной неменее 2:1.1767401 Продолжение табл. 2 Та бл 3 лица Составитель Т, ТабачковаТехред М.Моргентал Корре ктор Н. Хорина маков 3544НИИПИ Государствен ГКНТ СССР113 Тираж Подписное ного комитета по изобретениям и открытиям при 035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 1