Способ фракционирования гумусовых кислот

(1% 11 1/28, 3324 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНПРИ ГКНТ СССР ИЯМ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ,1 О, Прив гель ние атогра(57) ль сел тноси почвоведению и касаеи почв по выделению х Я 4615945/30-1531.05.8815,10,90, БюлМГУ нм, М,Л,С, Йрлов,Сальников,Б. Измайлова631.411.4(088Милановский Рого детергентагумусовых кисле 1984, Р 8,СПОСОБ ФРАКЦИСЛОТИзобретение оозяйству иаздела хими Изобретение относится к сельскомухозяйству и почвоведения и касаетсяраздела химии почв по выделению иопределению состава и свойств спеАицических продуктов почвообразования -гумусовых соединений, а именно Аракционированию гумусовых кислот по мо-.лекулярным массам,Целью изобретения является повышение точности Аракционирования гумусовьтх кислот.На Аиг. 1 изображена кривая Аракционирования гумусовых кислот по известному способу; на Аиг. 2 - то же,по предлагаемому способу,П р и м е р. Гумусовые кислоты,экстрагируют из почвы 0,1 н раство.ром ИаОН, ;центрифугируют при10000 об,/мин 20 мин, Ьильтруют определению состава и свойств специАических продуктов почвооборудования -гумусовых соединений почв, Пелью изобретения является повьппение точностиАракционирования гумусовых кислот,Для этого гумусовые кислоты обрабатывают 0,8-1,2 М раствором этилендиа"минтетрауксусной кислотой при 20-25 Св течение 20-30 ч. Способ позволяетполучить индивидуальные Аракции гумусовых кислот почвы и увеличивает выход низкомолекулярной Аракции в 1011 раз, что дает возможность на качественном уровне определить его рои влияние на почвенное плодородие,герезис и эволюцию почв. 2 табл,2 ил,сквозь мембранныи Аильтр с диаметромпор 0,45 мкм, К 5 мл полученногораствора гумусовых кислот добавляютв кристаллическом виде 1,86 г этилендиалинтетрауксусную кислоту (Э/ТУА),что соответствует раствору с концентрацией 1 М ЭНТА, и после растворенияЭАТА, раствор выдерживают при 22 С24 ч, Затем 2 мл раствора обессоливают на колонке с гелем Г, используя в качестве элюентной системыактрис-НС 1-буАер (рН 9), Собирают Арак-. фцию гумусовых кислот, выходящего всвободном объеме геля. Элюированиепроводят 0,05 М раствором трис-НС 1с добавлением 0,57, додецилсульфатанатрия (рН 9), Количественное выделение Аракций ведут на препаратив,ной колонке размером 2,6" 60 см с ге1599701 лем Г, на которую наносят 2-5 мл подготовленного раствора гумусоных 1 кислот.Условия Аракционирования: колонка стеклянная размером 0,9 к 70 или 2,660 см, заполненная декстранавым гелем; детектор с проточной кюветой, регистрация оптической плотности при 280 нм; скорость элюирования 5 мл/ч обеспечивается с помощью перестальтического насоса.В табл, 1 представлены данные (средние величины из определений), показывающие, что при 20-25 Г. достигается полная диссоциация агрегатов молекул гумусоных кислот за 20-30 ч,Увеличение времени взаимодействия гумусоных кислот с ЭЛТА удлиняет вре" мя анализа, а повышение температуры не приводит к дальнейшему росту количественного содержания низкомолекулярной Аракции гумусоных кислот. Кроме этого, увеличение времени взаимодействия и повышение температуры реакции повышают вероятность протекания вторичных. реакций, При низкой температуре (15 С) и времени взаимодействия гумусоных кислот с ЭДТА до 20 ч не обеспечивается полнота выхода низкомолекулярной Аракции.В табл, 2 приведены данные, снидетельствующие о том, что наиболее полное разрушение молекулярных агрегатов гумусовых кислот достигается при добавлении к их раствору 0,8-1,2 М Э)ТТА (температура - 22 С, время взаимодействия - 24 ч).В качестве примера приведены результаты Аракционирования гумусовых кислот по молекулярным массам надекстрановом геле 7-50 по известному (Аиг. 1) и предлагаемому (Аиг, 2) Т а б л и ц а 1 оТемпература, С 15 20 22 25 30 47 52 56 58 59 49 54 56 56 58 45 56 57 55 56 36 41 44 44 47 38 52 54 54 53 15 20 25 30 40 Время взаимодействиягумусовых кислот сЭДТА, ч способам, Полученные данные свидетельствуют о том, что количество низкомолекулярной Аракции возрастает (максимум 3) при одновременном уменьшении количества Аракций с РМ 10- 30 тыс. и выше (максимумы 1 и 2 на Аиг. 2), Обнаруженное изменение относительного содержания молекулярных Аракций обусловлено разрушением агрегатов молекул гумусовых кислот после их взаимодействия с ЭТА.Таким образом, обработка гумусовых кислот перед их обессоливанием на геле Гпри 20-25 С в течение 20- 30 ч приводит к максимальному разрушению агрегатон молекул гумусовых кислот и позволяет увеличить выход низкомолекулярных Аракций в 10-11 раз, что повышает точность определения молекулярно-массового распределения гумусовых кислот методом Аракционирования на декстрановых гелях. Увеличение выхода низкомолекулярной Аракции сокращает трудозатраты при препаративном выделении этих соединений по сравнению со способом-прототипом. Формула из обретения Способ фракционирования гумусовых кислот по молекулярным массам путем извлечения их из почвы, очистки, обессолинания и фракционирования на декстрановом геле с выделением низкомолекулярной Аракции, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности, перед обессоливанием их дополнительно обрабатывают 0,8- 1,2 М раствором этилендиаминтетрауксусной кислоты при 20-25 С в течение 20-.30 мин.Таблица 2 Показатель 1,0 0,6 1,2 58 56 Концентрация ЭПА, И Относительное содержание гумусовых кислотс ИМ 5"6 тыс., Я 43 57 57 Насьпцениепо раство римости По прототипу1599701 Составитель В. Раскатоведактор Т, Парфенова Техред А.Кравчук Корректор М рявая Заказ 313 Тираж 51 б Подписное и ГКНТ Сч Государственного комитета по изобретениям и открытия 113035 Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 НИИПИ ственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 10 рои