Питательная среда для учета численности почвенных грибов

СОЮЗ СОВЕТСНИХсамцвпмуапекРЕСПУБЛИН 0% (И) Ы 100 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ЕТЕЛЬСТВУ К АВТОРСКОМУ лий, серно натрий, р и воду, тем, что,ства учиты их учета,метиленовую ошении ком следователььтур Научдинения,098 чвенныхолитов 0,098-0,1 0,098-0,1 0,98-0,1 др. Лабораой микро 960, с. 94, ДА ДЛЯ УЧЕТА ИВОВ, содер- двузаме 0,9-10038-0,2,0-2,стальноеРЕ ГР ни ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССГЮ ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ(71) Молдавский научноский институт полевых кно-производственного обСелекция(54)(57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СЧИСЛЕННОСТИ ПОЧВЕННЫХжащая сернокислый аммо ценный фосфорнокислый к кислый магний, хлористы растворимый крахмал, аг о т л и ч а ю щ а я с я с целью повышения колич ваемых грибов и точност дополнительно содержит синь при следующем сост понентов, мас.Ъ:Сернокислый аммоний Двузамещенный фосфорнокислый калий Сернокислый магний Хлористый натрий Растворимый-крах- малМетиленовая синьАгарВода50 Изобретение относится к области микробиологии и может быть использо вано прн исследовании почв.Известна питательная среда Чапека, используемая для обнаружения и подсчета численности грибов в поч ве 1 .Недостатком среды Чапека является то, что на ней не растут грибы, которые не способны ассимилировать азот нитратов (например, мукоровые), 10известна также питательная среда- крахмал-аммиачный агар, " содержащая сернокислый аммоний, двузамещенный фосфорнокислый калий, сернокислый магний, хлористый натрий углекис лый кальций, растворимый крахмал, агар и воду Я фЭта среда в качестве источника азота содержит сернокислый агоний, хорошо ассимилируемый и тФми форма- ми грибов, которые не усваивают нитраты. Приготовление крахмально-аммиачного агара в лабораторных условиях не составляет трудностей.Но для количественных учетов гри" бов эта среда малопригодна, так как на ней развиваются преимущественно в большом количестве колонии бактерий и актиномицетови лишь единичные колонии грибов.Цель изобретения - повышение ко" личества учитываемых грибов и точность их учета.Поставленная цель достигается тем, что в питательную среду, содер., жащую сернокислый агний, двузамещенный фосфорнокислый калий, серно- кислый магний, хлористый натрий, растворимый крахмал, агар и воду, дополнительно вносят метиленовую синь при следующем соотношении ком" 40 понентов, мас.Ъ:Сернокислый аммоний 0,098-0,12Двузамещенныйфосфорнокислый 45калий , 0,098-0,12Сернокислый магний 0,098-0,12Хлористый натрий 0,098-0,12Растворимый крахмал 0,90-1,1Метиленовая синь 0,0038-0,0042Агар 2,0-2,1Вода ОстальноеП р и м е р. Перед употРеблением стерильную расплавленную питательную 55 среду подкисляют до рН .4 стерильным 5%-ным раствором соляной кислоты и охлаждают до 45 С. Затем вно-сят метиленовую синь в виде стерильного раствора. 60О., 0042,0Остальное Для посева по 1 мл суспензии исследуемой почвы, приготовленной на0,1 Ф-ном растворе пирофосфата натрия,вносят в стерильные чашки Петри,заливают 20 мл охлажденной до 45 фСпитательной среды и перемешивают содержимое чашек легким покачиванием.После застывания агара чашки инкубируют при 20-22 С.При проведении опыта соотношениекомпонентов среды меняют., варьируяколичество метиленовой сини, вводимой в среду, Результаты опытов сведены в табл,1,Лучший вариант получен при следующем соотношении компонентов питательной среды, мас.ЪгСернокислый аммоний 0,1Двузамещенный фосфорнокислый калий 0,1Сернокислый магний 0,1Хлористый натрийРастворимый крахмалМетиленовая синьАгарВодапри рН 4При введении в состав питательнойсреды метиленовой сини в количестве0,004 вес.Ъ удается учесть наибольшее количество грибоВ в почве (149)при меньшем варьировании результатов (М 3,3) и большей точностью(ЬЪ=1 к 7) еНа предлагаемой питательной средес метиленовой синью и без нее проводят учет численности грибов в почве. Результаты учетов представленыв табл.2. При использовании дляучета грибов крахмал-аммиачного агара на чашках Петри периодически обнаруживаются единичные колонии грибов,при этом количественный учет невозможен.Подкисление крахмал"аммиачногоагара до рН 4 (среда бу метиленовойсини) делает среду пригодной для количественных учетов грибов в почве,но колонии грибов быстро увеличиваются в диаметре и сливаются. Учет ихзатруднен.Введение метиленовой сини в подкисленную среду задерживает рост колоний грибов, в результате чего диаметр их увеличивается медленнее, чемна среде без метиленовой сини, колонии не сливаются. Это позволяетучЕсть большее количествб колоний,а следовательно, и грибов. По этойже причине снижается варьированиемежду повторностями в анализе, повышается точность учетов1076444 Таблица 1 15,3 100,0 6,9 3,5 19 5 127 5 4,1 2 1 0,000 0,001 0 002 18,9 123 5 5 1 2 б 3,31,7 149,0 0,004 22,8 0,006 20,1 131,4 4,0 , 2,0 16,6 108,5 8,1. 4,0 0,008 Таблица 2 Варианты опы тательная среда ы 1,4 Озимая пшеница 9(расчетнаядоза 9 РК наурожай 60 ц/га) 2 Среда+синь,иленов реда без мети еновой сини, Н 4 10,1 10,4 Озимая пшеница (расчетная доза РК на урожай 60 цуга 29У 1 реда+метиленая синь, рН 95 11 Среда без метиле новой сини, рН 4 5 5,7 17,00,0 Среда+метиленов синь, рН 4.У 1.8 3,2 Среда новой етиле 12 4 0 12,сини, рНметиленоврН 4 Сахарная све фро РМо Кго рединь.У 118 6 11 Ср но без син хилрН Кон- центрация метиленовой сини рмас. Ъ Численностьгрибов,тыс./гсухойпочвы Чис- ленность грибовЪ Коэффициентвариации,Относительнаяошибкасреднейе, 3 100,0 129 6,(навоз 80 т/га) 14.У 11.82 13,8 174,6 9,2 4,6 Среда без метиленовой сйнй,"рТ,4 7,9 100,0 13,4 6,7 СахаРная свекла(без удобрений) 14.У 11.82 131,9 5,9 2,9 12,4 Среда без метиленовой сини, рН 4 9 ф 4 100,0 25,9. 12,9 Составитель М. МирзаевРедактор Е. Папп Техред М.Гергель Корректор В. Бутяга Заказ 651/23 Тираж 522 Подписное ВНИИПИ ГЬсударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5