Способ получения 14 -оксиандрост-4-ен-3, 17-диона

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 0 04 С 073 АНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ОП ЕТЕЛЬСТВУ ТОРСКОМ о гидрокси-.3,7-дионаратуре 27 й с я тем,выхода целе-.роводят с исигчц 1 агдаандрост"ентличаю" пользуют растдиона в спирте щийс явор андросили диметил ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР(56) ЯопдЬеипег. Г. апд ойЬегв. ЯупйЬез 1 з оГ Вцйад 1 епо 11 дез ТЬе ЯупгЬез 1 з оЕ ВцГа 1.п апд КезьЬцйо 8 еп 1 п.Л.Ав. СЬев. Яое, 91,1229, 1969.СаЪог А. апд Их 0.7. ТгапвГогваТ 1 оп ой Ягего 3 дв Ьу АЬв 1 да огсЬ 1 дв. 1 Нудгоху 1 аг 1 оп ой апдговг4 епе - 3,17 - допе. Асйа сЬ 1 в.Асад. Ясь. Нцпд 55,99. 968.Я 1 пяЬ ег а 1 Тгапвйогваг 1 оп оЕвсегода. Сападап Тоцгпа 1 оГ М 1 сго"Ьь.о 1 ояу, 13,1273, 1967,54)(57) 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 14 К-ОКИАНДРОСТ-ен,7-ДИОНА формулы0 0 ОН путем микробиологическ лирования андрост-ен в водной среде при темп 28 С, о т л и ч а ю щ что, с целью увеличени вого продукта, процесс пользованием культуры 1 цпага при концентраци 3,17-диона 0,5-1,5 г/л 2. Способ по п.1, отем, что ис т-ен,17 формамиде.Изобретение относится к усовершенствованному способу. получения 14 Ы, - оксиандрост-ен,17-диона формулыО о он который находит применение в синтезе гормонов.Известен способ получения 14 М,-оксиандрост-ен,17-диона, заключаю.щийся в том, что 14 о -оксикортексолон подвергают взаимодействию с висмутатом натрия в разбавленной уксусной кислоте. Выход целевого продукта - 73%. Однако, используемое в этом способе исходное вещество - 14 е 6-оксикортексолонмалодоступен, так как он является побочным продуктом произ" водства 11-оксикортексолона и выход его не превышает 5-10%.Известны также способы микробиологического 14 о-гидроксилирования андрост-ен,17-диона. Так, под дейст вием культуры АЪзйьа огсЬЫдв образуется смесь 63, -7 Ы -11 о- и 1 Ы- оксипроизводных, однако в ней преобладает продукт 7 юс-оксистероид.Наиболее близким к описываемому является способ получения 14 Ы.-оксиандрост-ен,17-диона, заключающийся в том, что андрост-ен,17- дион подвергают гидроксилированию с использованием культуры М.8 гзсо-суапцз в водной среде при температуре 25-28 С, Выход целевого продукта - 10%.Недостатком этого способа является низкий выход целевого продукта.Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.Поставленная цель достигается описываемым способом получения 14 Ы -оксиандрост-ен,17-диона, заключающимся в том, что андрост-ен,17- дион при концентрации 0,5-1,5 г/л подвергают микробиологическому гидроксилированию с использованием культу"50 ры Сцгчц 1 аг 1 а 1 цпага в водной среде при температуре 27-28 С, Выход целевого продукта -35-70%,Андрост-ен,17-дион предпочтительно используют в виде раствора в 55 спирте или диметилформамиде.1Отличительным признаком способаявляется использование культуры Сцгчц 1 аг 1 а 1 цпаа и андрост-ен,17- диона в концентрации 0,5-1,5 г/л.Следует отметить, что только в пределах укаэанной концентрации соединения процесс, протекает. однозначно. Увеличение концентрации исходного соединения приводит к снижению выхода и качества продукта.1Следует отметить, что культура Сцгчц 1 аг 1 а 1 цпага ранее использовалась только для 11 -гидроксилирования соединений прегнанового ряда, например кортексолина и 16 еЕ-метилкортексолона, Использование этой культуры для гидроксилирования соеди- нения адростанового ряда .в литературе не описано и полученный эффект при этом является неожиданным.П р и м е р 1. Культуру Сцгчц 1 агьа 1 цпага поддерживают на агаровых косяках. 1 мл водной суспензии мицелия вносят в колбу емкостью 0,5 л со 100 мл водной среды (рН 6,0-6,1) следующего состава, г/л:Сахароза 30Дрожжевой автолизат 2,5Азотнокислыйнатрий 2Фосфорнокислыйаммоний двузамещенный 3Фосфорнокислыйкалий двузамещенный 1Хлористый калий О, 5СернокислыймагнийВыращивание мицелия проводят на качалке (220 об/мин) при 27-28 С, Через ЗО ч выращивания мицелия в колбу емкостью 0,5 л со 100 мл среды того же состава переносят стерильно 3 мл культуры и продолжают выращивание мицелия Сцгчц 1 агьа 1 цпага еще в течение 24 ч. Затем. переносят по 7 мл выросшего мицелия в каждую иэ 30-ти колб (емкостью 0,5 л) со 100 мл среды указанного состава, далее прбдолжают выращивание культуры в течение 24 ч, после. чего мицелий иэ каждой колбы отделяют от среды фильтрованием, промывают стерильным фосфатным буфером (рН 6,0-6,1) и переносят в колбу (емкость 0,5 л) со 100 мл стерильного фосфатного буфера.Составитель.Редактор Н. Сильнягина Техред М,Дидык Корректор В, Бутяга Заказ 7104 Тираж 348 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5, Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 801517Затем в каждую колбу вносят по кристаллизуется, отделяют 2,2 г (703) 2 мл раствора андрост-ен,17-дио- целевого продукта, т.пл. 250-252 С на, приготовленного растворением 3 г (из метанола) оь+ 178 ф (с=1),сп, (0,0105 г/м) в 60 мл этанола. П р и м е р 2, В условиях примеГидроксилирование проводят при 27- ра 1 с использованием культуры СцгчцФ28 С1 аг 1 а 1 цпайа и 40 мл раствора, приготовленного из 2 г (0,007 г/м) исходКонтроль за ходом гидроксилирова- ного вещества и 40 мл этанола, провония осуществляют методом ТСХ на плас дят гидроксилирование и прерывают его тикках силуфола 117254 с использо- через 66 ч, когда в среде еще имеетванием системы хлороформ-ацетон-цик- ся исходный стероид. Выделение целе" логексан (6;3:1), Гидроксилирование вого продукта проводят в условиях ведут до исчезновения исходного веще- примера 1. Выделяют 1,6 г продукта в ства. Через 40 ч встряхивания обье-:15 виде масла, которое обрабатывают, как диненную культуральную жидкость (вл) описано в примере 1. Получают 0,74 г вместе с промывными водами трижды (357) целевого продукта, т.пл. 245- экстрагируют хлороформом (1,7 л, 247 С (иэ метанола), С+166 (С 1, 0,9 л, 0,9 л). Хлороформный экстракт спирт).промывают водой (вх 0,5 л), сушат сульМицелий промывают хлороформом. По фатом натрия и упаривают, получают данным ТСХ экстракт содержит исходное 3,6 г продукта в виде масла, которое вещество и небольшое количество целе- после кипячения с гексаном (2 х 10 мл) вого продукта.