Штамм васiвlus suвтilis

Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ 8 У 1 ц 594769(51)М. Кл.12 О 13 Л 6 с присоелинением заявкиГоеударстесннцй кои нтет(23) Приоритет до делам нэобретеннй н открытий(54) ШТАММ ВАС 1.035 5 ОВТ 1.15 ЦМПМ В- ПРОДУЦЕНТ ИНОЗИНА 1Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения нового штамма,продуцирующего иозин, используемый в фармакологии и в качестве исходного соединения при получении иноэиновой кислоты и других пуриновыхпроизводных,Известен штамм Вас 111 цэ зцЬс 111 зЦМПМ В- - продуцент иноэина 1,Однако он не обладает высокой продуктивностью.Цель изобретения - получениештамма с высокой продуктивностьюинозина.Это достигается путем выделениямутанта исходного штамма Вас 111 цззцЬ 111 з ЦМПМ Вв результатеприменения генетико-селекционных методов.Штамм Вас 111 цз зцЬс 111 з ЦМПМВ- продуцент инозийа хранитсявколлекции Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов под номером ЦМПМ Ви характеризуется следующими признаками,Культурально-морфологические признаки. Спорообразующая палочка раз мером 3-5 х 0,6-0,8(ц, Размер спор1,О,2 Х 0,6-0,7 Р.Мясо-пептонный агар. При инкубации в течение 48 ч при 37 С образу"ет желтовато-серые круглые колонии,в центре выпуклые, диаметром 2,53,0 мм, с лопастными краями, срастаются с субстратом, Поверхностьшероховатая, морщинистая, матовая.Мясо-пептонный бульон. При инкубации в течение 24 ч при 37 ОС безвстряхивания наблюдают помутнениесреды, на поверхности образуетсяморщинистая, сухая пленка, при встря 2 охивании на качалке - сильное помутнение среды. При стоянии образуется осадок.Агаризованная среда Хоттингера,При инкубации в течение 48 ч при35 3 5947637 С образует желтовато-серые круголые колонии, в центре выпуклые с белым оттенком, диаметром 2-2,5 мм слопастными краями, срастаются с субстратом. Поверхность морщинистая,шероховатая, матовая,Синтетическая среда с минераль"ным азотом. Рост отсутствует.Ломтики картофеля, Пигмента необразует, Имеет матовую, сухую морщинистую поверхность,физиолого-биохимические признаки,Грамположительный, аэробный, ростповерхностный,Желатину разжижает, 15Крахмал гидролизует,Молоко пептонизирует и подщелачивает.Отношение к источникам углерода.Усваивает глюкозу, галактозу, лактозу, фруктозу, мальтозу, маннозу, рамноэу, сахарозу, глицерин,При росте на синтетической среденуждается в аденине, тирозине, гистидине. 25Оптимальный выход иноэина 1012 г/л за 65- 12 ч ферментации,П р и м е р 1. Культуру со скошенного агара Хоттингера (или МПАА) переносят на жидкую посевную средуследующего состава, 3;Глюкоза техническая 2,0Дрожжевой экстракт 1,0йаС 0,25Пептон 1,0Посевной материал выращивают вколбах емкостью 750 мл, содержащих150 мл среды, на качалке с 220250 об/мин в течение 18-24 ч при 28300 С. Инокулят передают в ферментао 40ционную среду в количестве 4-6 об,4,Состав ферментационной среды, 4:Глюкоза техническая 10,0БВК 2,0ННОГО 2,0СаСО 3 2,0Вода водопроводная, рН 7,2 доводят до стерилизации 5 й КОН. Глюкозув виде 40/-ного раствора стерилиэуютсовместно с мелом при 0,5 атм 30 мин.Процесс ферментации проводят ме 50тодом глубинного культивирования вколбах Эрленмейера емкостью 750 мл,содержащих 30 мл среды, на качалке с220-250 об/мин или в металлическихферментерах емкостью 30 л при расходе воздуха 1 об. на 1 об. среды в1 мин и скорости мешалки 400-500 об/мин,Оптимальная аэрация для указанной 9 4среды в колбах обеспечивается прискорости растворения кислорода 2,03,0 г О л/ч.Оптимальная температура процессабиосинтеза инозина 30-31 С. При оптимальных условиях ферментации в колбах максимальное накопление инозинанаблюдается на 96-120 часу. Уровеньобразования инозина составляет 1011 г/л,.При культивировании штаммаЦМПА Вв условиях ферментеравыход инозина составляет 11,0 г/лна 65 часу,П р и м е р 2. Штамм продуцент,условия ферментации те же, что и впримере 1, Отличие состоит в составе ферментационной среды,Состав ферментационной среды, 3:Глюкоза техническая 10,0БВК 2,0М 9 С 1 0,5ИНИО 2,0СаС 05 2,0Вода водопроводная, рН 7,2 доводятдо стерилизации 5 й КОН.Содержание инозина на 120 ч ферментации в колбах составляет 1112 г/я,П р и м е р 3. Штамм продуцент,условия Ферментации те же, что и впримере 1. Отличие состоит в составеферментационной среды,Состав ферментационной среды, 3;Гидрол 15,0БВК 1,3Кукурузныйэкстракт 1,5йн 4 ИО 2,5Сасо 2,0Вода водопроводная, рН 7,2 доводят до стерилизации 5 Н КОН,Содержание инозина на 96-120 чферментации в колбах составляет 1012,0 г/л соответственно,П р и м е р 4, Штамм - продуцент,условия ферментации те же, что впримере 1, Отличие состоит в составе ферментационной среды.Состав ферментационной среды,Сахар 10,0БВК 2,0О 2,0СаСО, 2,0Вода водопроводная, рН 7,2 доводят до стерилизации 5 й КОН.Содержание инозина на 120 ч ферментации в колбах составляет 10,0 г/л,Штамм Вас. 5 цЬС 1115 ЦМПМ В является новым более активным штам мом, синтезирующим в процессе глубинной ферментации инозин в количестве 10-12 г/л за 65-120 ч на средах с доступным не пищевым сырьем,формула изобретенияШтамм Вас 111 и 5 эоЬй 1115 ЦМПМ В1 - продуцент иноэина. Хранится в коллекции Всесоюзного научноисследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов под номером ЦМПМ В,Культурально-морфологические признаки, Спорообразующая палочка размером 3-506-0,8 (11, Размер спор 1,0-1,20,6-0,7.Мясо-пептонный агар. При инкубации в течение 48 ч при 37 С образует желтовато-серые круглые колонии в центре выпуклые, диаметром 2,5- 3,0 мм, с лопастными краями срастаются с субстратом, Поверхность шероховатая, морщинистая, матовая,Мясо-пептонный бульон, При инкубации в течение 24 ч при 370 С без встряхивания наблюдают помутнение среды, на поверхности образуется морщинистая, сухая пленка, при встря. хивании на качалке - сильное помутнение среды, При стоянии образуется осадок.4769 6Агаризованная среда Хоттингера,При инкубации в течение 48 ч при37 С образует желтовато-серые круголые колонии, в центре выпуклые с бепим оттенком, диаметром 2-2,5 мм слопастными краями, срастаются с субстратом, Поверхность морщинистая,шероховатая, матовая,Синтетическая среда с минераль 0 ным азотом, Рост отсутствует,Ломтики картофеля, Пигмента не образует, Имеет матовую, сухую морщинистую поверхность,Физиолого-биохимические признаки,15 Грамположительный, аэробный, ростповерхностный.Желатину разжижает,Крахмал гидролизует,Молоко пептонизирует и подщела 20 чивает,Отношение к источникам углерода.Усваивает; глюкозу, галактозу, лактозу, фруктоэу, мальтозу, маннозу,рамнозу, сахарозу, глицерин,25 При росте на синтетической среденуждается в аденине тирозине гистидине,Оптимальный выход инозина 10-12 г/л за 65-120 ч ферментации.30 Источники информации,принятые во внимание при экспертизеАвторское свидетельство СССРй 382676, кл. С 12 0 13/06, 1973.Редактор Л, Письман Техред 3, Палий Корректор О. БилакЗаказ 10 5 /11 Тираж 0 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, ЖРаушская наб д, 4/5 филиалПатент", г, жгород,уа, Проектная,