Способ получения n-карбоксиангидридов оксиаминокислот

- Ои( Й потекет ,:;-, у ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК П АТЕНТУ Союз Соеетокиз Социалистических РеспубликЗависимый от патентаКл. 12 т 1, 6/01 МПК б 07 с Заявлено 13.Х 11.1967 ( 1203105 23-4 Приоритет 24.Х.1965,504982, США12.И 1.1967,1087855/23-4, СССР Опубликовано 11,Х 1,1969, Бюллетень35 Квинтет ло делате изобретениЯ н открытиЯ лри Совете Министров СССРДК 547 965 07(088 Дата опубликования описания 13.11,1970 Иностранцы Ральф франц Хиршманн, Роберт Джордж Денкевальтер,Эрвин фредерик, Шоеньювалдт, Джон Байрон Кони, Роберт Ги Страчен, Даниил Фрэнк Вебер и Гарвей Швам(Соединенные Штаты Америки) Иностранная фирма Мерк энд КомпаниИзобретение относится к синтезу аминокислот и может найти применение в качестве физиологически активных веществ.Предложен способ получения И-карбоксиангидридов оксиаминокислот, заключающийся в том, что оксиаминокислоту обрабатывают основаниями или солями переходных групп, например сульфатом кобальта, и полученные при этом хелаты подвергают взаимодействию фосгеном в диоксане или тетрагидрофуране. 10 Целевой продукт выделяют известными способами.. Пример 1. Хелат серебра а-аминор-оксипропионовой кислоты (серина), Все количество (13 г) серина растворяют в 500 лил 15 дистиллированной воды и добавляют 14,33 г свежеприготовленной окиси серебра, Смесь перемешивают при комнатной температуре до полного растворения окиси серебра. В ходе проведения реакции образуется коллоидная 20 масса коричневого цвета, которую удаляют при помощи фильтрования через инфузорную землю. Полученный в результате фильтрат при перемешивании обрабатывают при комнатной температуре метанолом до помутне ния. Необходимый готовый продукт отделяют и выделяют фильтрованием.Пример 2, Хелат серебра а-амино- -11-ок",имасляной кислоты (треонина). Все количество треонина (11,9 г) растворяют в 25 ил воды, после чего в течение 10 иин добавляют 11,6 г свежеприготовленной окиси серебра. Смесь дополнительно перемешивают в течение приблизительно еще 1 час до полного растворения введенной окиси серебра. Полученная таким образом смесь содержит коллоидный гель, ее перемешивают в течение 1 час с активированным углем и фильтруют. Фильтрат охлаждают в бане со льдом, после чего обрабатывают вводимым приблизительно в течение 1 час 30,яин метанолом в количестве 270 лтл, Из смеси выделяют часть и вызывают искусственную кристаллизацию путем царапания стенок содержащего эту часть сосуда, Кристаллы смеси вновь помещают в основную баню, в которой поддерживают в охлажденном состоянии при температуре 0 С и перемешивании в течение последующих 16 час. Необходимый готовый продукт осаждают и выделяют по окончании реакции фильтрованием.Пример 3. М-Карбоксиангидрид с е р и н а. Все количество (21,20 г) продукта, приготовленного по способу, описанному в примере 1, суспендпруют в 250,цл свежеперегнанного диоксапа. Указанную операцию проводят в токе азота. Через полученную таким образом смесь пропускают 0,1 ноль фосгена, 257380при перемешивании магнитной мешалкой. В ходе введения фосгена смесь постепенно нагревается. К концу введения газа температуру смеси доводят до 70 С и поддерживают на таком уровне в течение 1 час. После этого смесь охлаждают, а выпадавший в осадок хлорид серебра удаляют фильтрованием. Фильтрат промывают несколькими порциями бензола; объединяют фильтрат и промывную жидкость и подвергают сушке при температуре 0 С, в результате получают готовый продукт.Пример 4. К-Кар боксиангидрид т р е о н и н а. Все количество (9,5 г) продукта, приготовленного по способу, описанному в примере 2, суспендируют в 100 мл,диоксана, после чего в течение приблизительно 7 - 12 мин через приготовленную таким образом смесь пропускают эквимолярное количество фосгена. В ходе продувания фосгена через смесь температура ее самопроизвольно повышается до 40 С, После этого смесь перемешивают в течение 1 час и, затем, фильтруют для удаления выпавшего в осадок хлорида серебра. Полученный фильтрат подвергают сушке при температуре 0 С. Остаток растворяют в 30 мл этилацетата, после чего вновь осаждают продукт путем добавления в этот раствор 70 мл гексана. Смесь оставляют стоять на ночь, после чего готовый продукт выделяют фильтрованием. Используя хелаты, полученные в ходе проведения процесса по способу, описанному впримере 2, по аналогии с вышеописаннымспособом приготавливают следующие соединения:И-Карбоксиангидрид тирозина,К-Карбоксиангидрид 3,5-дииодтирозина,Х-Карбоксиангидрид 3,5-дибромтирозина,Я-Карбоксиангидрид гидроксипролина,Ы-Карбоксиангидрид Р-гидроксилейцина,К-Карбоксиангидрид а-гидроксинорвалина,И-Карбоксиангидрид г-гидроксинорвалина. Нижеследующие описания методик иллюстрируют использование полученных в соответствии с изобретением продуктов в ходе проведения процессов приготовления К-карбоксиангидридов о-триметилсилилов гндроксилированных аминокислот и их превращение в пеептиды. В ходе, проведения процесса приготовления пептида блокирующая триалкилсилильная группа отщепляется самопроизвольно исключая, таким образом, необходимость проведения дополнительной реакции выделения, которая является обязательной в случае применения в качестве блокирующей группы (для защиты гидроксильной группы аминокислоты) таких обычно используемых групп, как бензильная и тому подобные. Пр и м е р 5. И.К а р б о к с и а н г и д р и д о-триметилсилилтреонина. Все количество 4,5 мл (35,1 моль) триметилхлорсилана посте 5 1 О 15 го 25 зо 35 4 О 45 50 55 бо 65 пенно прибавляют к 5,1 г (35,2 моль) Х-карбоксиангидрида треонина, растворенного в 65 мл сухого тетрагидрофурана. В ходе проведения этой операции над реакционной смесью поддерживают инертную атмосферу азота, температура смеси около 2 С. В полученный таким образом раствор постепенно вводят 2,98 мл (34 моль) сухого 4-метилтриазола, В ходе проведения операции добавления последнего выпадает в осадок гидрохлоридная соль основания. После этого реакционную смесь оставляют стоять до момента самопроизвольного достижения комнатной температуры, выпавший осадок затем удаляют фильтрованием под давлением азота. Затем из полученного фильтрата при пониженном давлении удаляют растворитель, а выделенный осадок растворяют в 35 мл этилацетата, после чего его оставляют стоять в течение 16 час при температуре 10 С. После этого находящийся в верхней части раствор декантируют, а растворитель удаляют в вакууме. Выпавший в осадок продукт растирают в порошок и кристаллизуют из гексана, после чего выделяют фильтрованием под давлением азота,Пример 6. Треонилфенил алании. Раствор, содержащий 145 мг фенилаланина в 10 мл воды и 10 мл 0,9 М борной кислоты, доводят в смесителе до значения рН 10,5 путем прибавления 500/,-ного водного раствора гидрата окиси натрия, после чего при быстром перемешивании и в токе азота пропорционально К-кар боксиангидрид о-триметилсилилгреонина. Последний вводят в количестве 326 мг в течение 3 мин, В ходе проведения процесса температуру смеси поддерживают около 5 С, а рН - на постоянном уровне постепенным введением по каплям 0,75 мл (общее количество) 2,5 н. водного раствора гидрата окиси натрия. После этого величину рН путем введения серной кислоты снижают до 3. В ходе проведения последующей реакции декарбоксилирования температура смеси повышается до 30 С, после чего смесь выдерживают при этой температуре в течение 5 мин до окончания процесса. Далее берут небольшую пробу реакционной смеси и подвергают электрофорезу через бумагу при рН 9,5 в 0,1 М растворе тетрабората натрия при напряжении 600 в. Эксперимент продолжается в течение 3 час, после чего путем сравнения подвижности испытанного образца с подвижностью пробы известного продукта при тех же условиях производят идентификацию полученного треонилфенилаланина,Значение рН реакционной смеси доводят до 6,5 добавлением 2,5 н. водного раствора соляной кислоты и подвергают лиофилизацин прн температуре 0 С. После этого остаток экстрагируют метанолом, фильтруют и высушивают до сухого состояния. Остаток растворя. ют в небольшом количестве воды и профиль. тровывают. Фильтрат выпаривают до сухого состояния, а остаток растирают в спирте о25380 Предмет изобретения Составитель М. Б. МещеряковаРедактор Л. Г. Герасимова Техред Л. В. Куклина Корректор С. М. Сигал Заказ 697/18 Тирак 480 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва Ж, Раушская наб., д, 45Типография. пр. Сапунова, 2 йорошок. Раствор продукта в метаноле подвергают хроматографическому разделению при помощи дезактивированного древесного угля и производят вымывание, сначала водой (девятнадцать Х 2 ял фракций), а затем смесью 50%-ной уксусной кислоты, ацетона и воды (47,5 лл ацетона; 47,5 лл воды и 5 лл уксусной кислогы). Выделение готового продукта производится соединением фракций с 20 по 26 включительно, каждая из которых содержит около 2 мл раствора, с последующей лиофилизацией при температуре 0 С. Способ получения Ы-карбоксиангидридовоксиампно-кислот на основе окспаминокислот 5 с применением фосгена в среде д оксана илитетрагидрофурана, отлииаюиийся тем, что оксиаминокислоту обрабатывают основаниями или солями металлов переходных групп, и полученные при этом хелаты обрабатывают фос геном, с последующчм выделением целевогопродукта известными методами.