Средство, проявляющее антиоксидантную активность

(19) (1) А ц 5 А 61 45 БРЕТЕ ПИС ТЕЛ ЬСТВ К А ТОРСКОМУ АНТИОКедицине, а шений, свям эндогенетения иоксидант ьзуют бисксиметил)в качестве сидантную арственныи меди- В.Мегераекарственные средкотерапии для врад, Х, т.2, с, 37 - 39. ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(71) Черновицкий госудцинский институт(56) М.Д.Машковский "Лства", Пособие по фармачей, Медицина, 1987, из Изобретение относится к;биологическиактивным веществам, а именно,к группесинтетических антиоксидантов,Цель изобретения - выявление в рядучЕтвертичных аммониевых соединенийпрепаратов, обладающих наиболее высокой антиоксидантной активностью. Это достигается тем, что в качестве антиоксидантаиспользуют бис-й,й-диметил-й-(карбоментилоксиметил)аммонийэтил сульфид дихлорида (БДАСХ),Изобретение иллюстрируется следующими примерами.Опыты проведены на крысах-самцахмассой 180+15 г, получавших ежедневномолоко и хлеб. Животных убивали декапита.цией под легким эфирным наркозом, быстрозабирали печень, замораживали и на льдуготовили 5-ный гомогенат, используя0,15 М фосфатный буфер (рН 5,9), В гомогенате печени определяли: скорость НАДФНзависимого (НАДФН) перекисногоокисления липидов (ПОЛ) в инкубационнойсреде следующего состава (в конечной концентрации):5 10 М НАДФН,2 10 МАДФ(54) СРЕДСТВО, ПРОЯВЛЯЮЩЕ СИДАНТНУЮ АКТИВНОСТЬ (57) Изобретение относится к м именно к фармакотерапии нару занных с перекислым окислени ных липидов. Цель изобр повышение специфической ант ной активности, Для этого испо й, й-диметил-й-(кар бомвкгило аммонийэтил сульфид дихлорид средства, проявляющего антио активность. 3 табл,и 12 10 М Ре 804; скорость аскорбатзави-осимого ПОЛ (АС) в среде; 8 10 М аскорбата, 2 10 М АДФ и 12 10 М Ре 304. Скорость ПОЛ в гомогенате печени исследовали по образованию малонового диальдегида (МДА) и рассчитывали в мкмолях МДА на 1 г ткани за 30 мин инкубации. Активность супероксиддисмутаэы (СОД) измеряли по скорости торможения реакции восстановления нитросинего тетразолия в присутствии НАДН 2 и фенадинметасульфата. За единицу активности СОД принимали количество фермента. необходимое для 50-",ь.-ного торможения восстановления тетразолия в условиях определения и выражали в единицах на 1 мг белка за 1 мин. Содержание белка определяли биуретовым методом, активность глутатионредуктазы (ГР) - спектрофотометрическим методом, глутатионпероксидазы (ГП) и содержание восстановленного глутатиона - титрационным методом, Антиоксидантную активность заявляемого соединения сравнивали с такими известными антиоксидантами: витамином Е, восстановленным глутатионом и дигидроаскорбиновой кислотой. Получен1804841 Таблица 1 Влияние бис-й,й-диметил-й-(карбоментилоксиметил) аммонийэтил сульфид дихлорида на скорость ПОЛ печени белых крыс (в мкмолях МДА/г ткани эа 30 мин)Таблица 2 Влияние восстановленного глутатиона и аскорбиновой кислоты на скорость НАДФН-зависимого ПОЛ печени белых крыс (в мкмолях МДА/г ткани за 30 мин) (М +пз; и = 6)ные экспериментальные данные обрабатывались методом вариационной .статистики,В табл,1 представлены результаты изучения влияния БДАСХ на скорость НАДФН- и аскорбатэависимого ПОЛ печени белых крыс.Как видно из данных табл.1, ферментативное (НАДФ-зависимое) ПОЛ более чувствительное к действию предлагаемого соединения, чем аскорбатэависимое,Действие заявляемого соединения на скорость перекисного окисления эндогенных липидов в сравнении с антиоксидантной активностью восстановленного глутатиона и аскорбиновой кислоты представлены в табл.2. Приведенные данные показывают, что аскорбиновая кислота и восстановленный глутатион проявляют выраженное ингибирующее влияние на скорость ферментативного окисления эндогенных липидов лишь при относительно высоких, по сравнению с заявляемым соединением (табл.1), конечных концентрациях (400 - 2000 мкмоль/л), Следовательно, БДАСХ является более мощным (в 5-10 раз) ингибитором скорости ферментативного окисления эндогенных липидов печени, чем восстановленный глутатион и дигидроаскорбиновая кислота. В опытах 1 и чиччо изучено влияниеБДАСХ и витамина Е на состояние антиоксидантных ферментов печени (табл,З), В этой серии опытов животным, предваритель но голодавшим 12 часов, внутрибрюшинновводился БДАСХ в дозе 10 мг/кг и витамин Е - 100 мг/кг. Через 12 ч после введения препаратов животных убивали и в гомогенатах печени изучали показатели активности 10 антиоксидантных ферментов печени, содержание МДА и восстановленного глутатиона.Введение животным БДАСХ и витамина Е - ацетата вызывает достоверное понижение уровня МДА в печени. Оно обусловлено, в 15 первую очередь, повышением активностиСОД, обезвреживающей супероксид анионрадикалы,Таким образом, заявляемое соединениеобладает более высоким антиоксидантным 20 действием, чем применяемые природныеантиоксиданты: витамин Е, восстановленный глутатион и дигидроаскорбиновая кислота. 25Формула изобретения Применение бис-М М-диметил-й.(карбоментилоксиметил)аммонийэтил сульфид дихлорида в качестве средства, проявляюЗ 0 щего антиоксидантную активность,1804841 Продолжение табл, 2 Таблица 3 Влияние бис-й,й-диметил-й-(карбоментилоксиметил) аммонийэтил сульфид дихлорида и витамина Е на активность антиоксидантных ферментов печени крыс (М+тп; п = 6)Б АСХ Из чаемые показатели Конт оль Витамин Е 6,6 +0,15 3,94 +0,31 240+3,68 0,36 ф 0,0239+1,62 0,48 М,0526+0,87 0,58+0,06 28+1,24П р и м е ч а н и е. Звездочкой отмечены достоверные изменения по сравнению с контролем (Р/0,05). Составитель И, МещищенТехред М,Моргентал Корректор Л, Филь Редактор Заказ 912 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и.открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Глутатион восстановленный, мкмоль на 1 гткани,Глутатионредуктаза, нмоль НАДНФ на 1 мгбелка/мин Глутатионпероксидазэ, нмоль восстановленного глутатиона на 1 мг белка/минСупероксиддисмутаза, единиц на 1 мг белка/минМалоновый диальдегид, мкмоль на 1 г ткани 7,14 Ж,43 3,86+0,25 246-ф 4,92 8,67 й 0,37 3,88.0,35 252+5,67