Способ получения белкового корма

(19) (1 2 й 1/14, 1/16, 1/2 ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР) ЕТ АТЕНТ 2(71) Всесоюзный научноинститут охраны природла(73) Всесоюзный инстии заповедного дела сследовательский и заповедного дери роды А.Висло тут охраны(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВОКОРМА Изобретение относится к микробиолоическому синтезу белка и может быть исользовано в сельском хозяйстве,Смеси микроорганизмов, например; грибы и дрожжи, используют для совместного выращйвания на измельченном крахмал- или целлюлозосодержащем субстрате, в частности, соломе, гречневой или рисовой лузге и др.Известны споСобы обогащения соломы белком микроорганизмов, обладающих целлюлозолитической активностью (1,2),Эти способы имеют серьезные недостатки, такие как малая скорость роста, возможност.ь быстрого инфици рова ни.я процесса, трудности хранения полученной биомассы,Более эффективным является способ совместного культивирования гриба Тг 1 спобегаа чЫбе и дрожжей (3), согласно которому солому измельчают, обрабатйва(57) Использование: в сельскохозяйственном производстве и может быть использовано для получения корма для с/х животных. Сущность изобретения: совместное культивйрование мицелиального термотолерантного. гриба АзрегцИ из Ьгпдавз ВКМГД и дрожжей Сапйа гпа 1 оза ВМПЬНпри глубинной ферментэции на питательной среде, состоящей из соломы, воды, источников азота; фосфора, калия, натрия, кукурузного экстракта, Предлагаемый способ обладает следующими преимуществамиобеспечивает увеличение выхода продукта. с единицы рабочего обьема, повышение в продукте содержания белка и уменьшение жидкостных потоков,ФС ют 40%-ной щелочью, затем готовят питательную среду: 2% соломы, 0;05% глюкозы,0,010 пептона, витамина - которую используют для культивирования смеси культурпри аэрации; перемешивании и температу"ре 27 С, При этом сначала выращивают 4гриб, спустя сутки всреду вносят новую Опорцию соломы (0,2%) и глюкозы(1%), всреду инокулируют дрожжи и ведут процесс 0шесть суток; гюлучая продукт с содержанием белка 8 - 10%, Недостатком этого способа ф,является невысокое (в 2-.2;5 раза) увеличе-.ние содержания белка в продукте по срав- "нению с исходной необработанной соломой ф(3,0-3,5%), длительное (шесть суток) культи- Ывирование ассоциации микроорганизмовпри невысокой температуре (270 С), что вызывает инфицирование среды. Усложняетсяпроцесс и реагентная обработка соломы40%-ной щелочью, от которой необходимоделать отмывку, что приводит к нежелательному увеличению жидкоСтных потоков,Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ (4) совместногокультивирования грибов и дрожжей на измельченной соломе, смешанной с водой в соотношении 1:50, В среду вносят азотнокислый аммонит 0,7 - 0,8 г/л, азотнокислый натрий 0,7-0,8 г/л, одно замещенный фосфорнокислый калий 1 г/л. Для активации вносят 0,05.;ь глюкозы и 0,40 кукурузного эсктракта.В среду инокулируют одновременно грибы (АезсЬег теггезтцз ВКМ-Г. Яроготг 1 сМв рцчегц 1 ептцв ВКМ, АзрегдИцз 1 цв 1 оаозз ВКМ-Е) и дрожжи (Сапс 1 ба гцрозэ ЦПМП-Ц, Сапб 1 ба васоза ЦМПМ-Ц, 1 соботогца ацсобаса ВКМ-Ц) в соотношении от 3:1 до 1:1 по весу, Общий засев инокулянта составляет 4 об.0 от объема суспенэии.Смесь микроорганизмов культивируютглубинным способом 12 ч при рН 6-7, температуре 40-42 С, аэрации 0,2-0,4 м 3/ч, затем рН снижают до 4,5 - 5,5 и культивируют смесь еще 12. ч, Суспензию плазмолизируют 1 ч при 30 С, сушат при 50 С, В полученном 5 10 15 20 25 продукте содержание белка составляет 20- 27%Недостатком указанного способа является невысокий выход продукта (лишь 2 30 исходного количества соломы перерабатывается в корм микроорганизмами) при довольно высоком (4%) суммарном количестве инакулята гриба и дрожжей, вносимого в среду. 35Целью изобретения является увеличение выхода продукта с единицы рабочего объема при глубинной ферментации гриба и дрожжей, повышение в продукте содержания белка и уменьшение жидкостных пото ков.Поставленная цель достигается тем, что измельченную солому смешивают с водой в соотношении от(1:33) до (1:40), т.е. вносят в среду соответственно 3 и 2,5 соломы. За тем пропаривают смесь в течение 0.5 ч при 100 С вносят соли; 0,8 г/л аммония азотно- кислого, 0,8 г/л натрия азотнокислого, 1 г/л калия фосфорно-кислого однозамещенного, 0,05 кукурузного экстракта. После этого 50 вносят мнокулят мицелиального термотолерантного гриба Азрег 911 цз тцв 19 асцз ВКМГД в количестве от 1 да 1,4 мас. . Инокулят гриба предварительно подвергают подсушиванию на сусло-агэре при 35- 55 42 С в течение 10-14 сут.Культивирование целлюлоэолитического гриба на смеси соломы, воды, минеральных солей ведется глубинным способом 12 ч при 40-42 С, рН 6-7, ээрации воздухом 1,5-1,8 л/л . мин при перемешивании 400 об/мин, Затем в зону ферментации вносили инокулят дрожжей вколичестве от 0,7 до 1 мас. Я, (общее количество вносимых инокулятов микроорганизмов к рабочему объему не превышало 2мас,и соотношение гриба и дрожжей колеблется от(1:1) до(2:1) и вели выращйвэниесмеси микроорганизмов еще 12 ч при 37 Си рН 5,5, Затем смесь плазмолизовали: 1 чпри 30 С и высушивали при 50 С. Содержание белка в кормовом продукте составило30-320 РСВ при содержании готового продукта в среде от 24,5 до 26,7 г/ АСВ. Способпозволил снизить количество используемыхинокулятов микроорганизмов вдвое посравнению с прототипом, сократить в 1,5раза количество используемой воды, увеличить содержание белка в кормовом продукте до 32 (в прототипе 27),Пример 1.Измельченную солому смешивали с водой в соотношении 1:40 (2,5% к объему среды). Смесь пропаривали 0,5 ч при 100 С,вносили 0,8 г/л аммония эзотнокислого,0,8 г/ натрия азотнокислого, 1,0 г/л калияфосфорно-кислого однозамещенного,0,050 кукурузного экстракта, Затем в смесьвносили инокулят мицелиального термотолерантного гриба Азрег 91 цв 1 цв 1 дасцзВ КМ-РД (1по массе), предварительно подвергнутый на сусло-агэре частичномуобезвоживанию (подсушиванию) при 350 С втечение 14 сут.Глубинное культивирование гриба ведут 12 ч при рН 6, температура 40 С, аэрации 1,8 л/л.мин, перемешивании 400об/мин. Затем в зону ферментации вносилиинокулят дрожжей Сапб 1 ба вэввоза ЦППМЦ1 мас. , 0,5 г/л аммония сернокислого и продолжали выращивание смесимикроорганизмов еще 12 ч при рН 5,5 и37 С. Суспензию плазмолизовали 1 ч при90 С и высушивали при 50 С. Общее количество вносимых в среду инокулятов микроорганизмов 2.Содержание белка (сырого протеина) вготовом продукте составило 32, при выходе готового продукта от сырья 88 и содержании его в 1 л рабочего объема приферментации 22 г АСВ.Пример 2.Способ выращивания осуществляли такжекак в примере 1, но при соотношениисоломы и воды 1:33 (3 к рабочему объему),а инокулят гриба на сусло-агаре подвергалиобезвоживанию (просушиванию) при 40 С втечение 12 сут, затем смыв грибницы с суслоагаре, вносили в зону ферментации в количестве 1,4 мэс добавляли инокулят1797624 Формула изобретения Способ получения белкового корма, включающий совместное глубинное культивирование гриба и штамма дрожжей Сапбба тамаза ВКПМ+194 на питательной среде, содержащей измельченную солому, воду, кукурузный экстракт, источники азота, фосфора, калия, натрия, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличения выхода продукта с единицы рабочего объема, повышения в продукте содержания белСоставитель М,АфанасьеваРедактор Т.Куркова Техред М.Моргентал Корректор Е.Папп Заказ 665 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 45 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 дрожжей в количестве 0,6 мас., 0,5 г/л аммония сернокислого и ассоциацию микроорганизмов выращивали еще 12 ч, Затем суспенэию плазмолиэовали и высушивали как в примере 1. В полученном продукте содержится 30 белка (сырого протеина), При этом выход готового продукта от сырья (соломы) составил 89, а содержание продукта в 1 л среды 26,7 г АСВ.П ример 3.Способ выращивания осуществляли так же, как и в примере 1, но солому смешивали с водой в соотношении 1:36 (2,7; к рабочему объему), а инокулят гриба на сусло-агаре подвергали обезвоживанию (подсушиванию) при 42 С в течение 10 сут, Затем смыв грибницы с сусло-агара вносили в питательную среду с соломой в количестве 1,4 мас культивировали 12 ч, после чего добавляли инокулят дрожжей в количестве 0,6 мас, о и смесь микроорганизмов выращивали еще 12 ч. Суспенэию плазмолиэовали 1 ч при90 С, высушивали при 50 С, Был полученпродукт с содержанием белка (сырого протеина) 31 оь при выходе готового продукта от5. сырья 91 и содержании продукта в 1 лрабочего объема при ферментации 34,5 гАСВ.Контроль к прототипу,В способе, осуществляемом по прототи 10 пу, содержание белка (сырого протеина) вкормовом продукте составляет 20 - 270 привыходе готового продукта 85 от сырья (соломы) и содержании продукта в 1 л рабочегообъема среды при ферментации 17 г АСВ,15 Применение предлагаемого способаполучения белкового продукта обеспечивает увеличение содержания белка (сырогопротеина) до 327 ь, что в 10 раз больше, чемв соломе (3,5) и на 5;6 больше, чем в про 20 тотипе(27%). ка и уменьшения жидкостных потоков, используют питательную среду, содержащую измельченную солому, смешанную с водой в соотношении от 1:33 до 1:40 для совместного культивирования используют гриб Азрегцйцз Ьадаыз штамм ВКМ-РД, при этом инокулят гриба и дрожжей берут для засева в соотношении от 1:1 до 2:1 (в мас, о), а инокулят гриба перед внесением в зону ферментации подвергают 10 - 14 суточному подсушиванию при температуре 35- 42 С.