Способ определения гетерогенности гемоглобина

(1) С 01 И 3 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОЧМРЫТПРИ ГННТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ 2еза. Цель изобретения - усособа. Цель достигается аносят пробу крови на аценку, которую предварительно т в течение 8-10 мин в расттного буфера с добавлением она Б в конечной концент-1,9 Е, затем - 1-1,5 мин цитратного буФера с добавона Б в конечной концентра- ,11., а электройорез проворяжении электрического 50 В в течение 8-12 мин. Исе оба в 7 раз ускоряет к ореза гемоглобина,электроЬоркорение сптем, что нтатную плевыдерживаюворе ацетак нему трилрации 0,06в растворелением трилции Ор 04-0дят, при наптока 300-3пользованипроцесс эле4 табл. венныйРов 977 ьРТВРОГРННОСобласти ескрйисследоет одом спос тр од етение относится к обла ии, биохимии и химическ а именно к области иссл терогенности белков, в могло бина, мет одом эл ек стиой меедоПзобрвол о ого натрия,1 л воды, 2,13. г лимоннокис на 1 л воды,.из двух раство вят смесь из расчета 50 мл 750 мл второго). Далее пле шивают Фильтровальной бумаг полированным стеклом образе бина и помещают в электрофо .камеру с буФерным растворо лимонной кислоты на 1 л во лимоннокислого натрия на сливают в пропорции: 50 мл и 50 мл второго) и пропус рический ток напряжением 3 через электроды камеры. Чер 12 мин пленку вынимают, под и окрашивают. ов готоервого и дицпны, вания г ности г роореза поЦе изобретения - ускорен чик обо имира поВ т бл. 2 представлены данные поракций гемоглобина человека припленок в буферных растворахряжении электрического тока и даосн 1 СВИйиВСТВ(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГТи ГЕИОГЛОБИНА(57) Изобретение относитсяФизиологии, биохимии и клинмедицины, а именно к областвания гетерогенности белков Способ осуцествляется следую разом.Ацетатцеллюлозные пленки Влад ского или Казанского производств мещают .на 8-10 мин в ацетатный буфер (136,09 г ацетата натрия и 1,4 г трилона Б на 1 л дистиллированной воды, 57 мл ледяной уксусной кислоты на .1 л воды, из двух растворов готовят смесь из расчета 910 мл первого и 90 мл вто рого. Затем пленку помещают на 1-.1,5 мин в цитратный буфер (10,5 г лимонной кислоты и 1,4 г трилопа Б на ку подсуой, наносят ц гемоглоретическую м (10,5 г ды и 2,13 г л воды первого кают элект-350 В ез 8- сушиваютЧисло Фракций, время электройореза, мин При- меры Г58 . 12 15 3-4 3-4 4-5 3-4 4-5 3-4 4-5 3-4 3-4 4-5 4-5 4-5 2-3,3-43-43-4 200 300 350 400 6 7 8 П р и м е ч а н и е. Пленки заряжали в ацетатномбункере 10 мин, в цитратном1 мин. Т,а бл и ц а 2 Пример Число йракций при времени заряда, минГ Буферный раствор и время заряда пленки, мин0,5 1 Ацетатный боер, 11111 3-44-54 3 3-44-5 4-5 4-5 4 3"4 4 1 2 3 4 32-32-33-4 222,2 5 8 10 15Пленка в цитратном буЬере не заряжалась. 300-350 В и времени электроЛореза 812 мин.В табл. 1 представленные данные почислу фракций гемоглобина при электро порезе в условиях разного напряженияэлектрического тока.В табп. 3 представлено количествофракций гемоглобина в зависимости от.количества трилона Б и времени электрэЬореза, напряжение 350 В,В табл. 4 представлено количествоФракций гемоглобина в зависимости отколичества трилона Б и напряженияэлектрического тока, время электроАореза 10 мин.Положительный эЬйект заключаетсяв том, что электроАоретическое разделение гемоглобина с помошью предложенного способа можно провести в 7 раз 20быстрее по сравнению с прототипом,Способ определения гетерогенностигемоглобина, включащций нанесение про/бы крови на ацетатцеллюлозную пленкупредварительно обработанную буфернымраствором, подсушенную бильтровальнойбумагой с последуюцим электройорезоми определением числа фракций, о тл и ч а ю ц и й с я тем, что с целью ускорения способа, пленку выдерживают 8-10 мин в растворе ацетатногобункера с добавлением к нему трилонаБ в конечной концентрации 0,064-1,9 Е,затем - 1-1,5 мин в растворе цитратного буФера с добавлением трилона Б вконечной концентрации 0,04-0,11", аэлектроЬорез проводят при напряжении300-350 В в течение 8-12 мин,1716450 Та блица 3 Количество Фракций .при содержании трилона Б, г Времязарядапленки,мин 0 3 0 7 1 4 2 1 28 3-4 2-34-5 35 2-34 3 Таблица 4 Количество Фракций при содержании трилона Б, г Напряжение, В 0,3,0,7 1,4 2,1 2 8 1-2 2-3 2-3 2 4 5 2 4-5 4-5 2-3 4-5 4-5 Составитель.Т,МалютинаРедактор О,Спесивых ехред А,Кравчук Корректор А.Обручар Заказ 610 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета поизобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 5 8 10 15