Штамм вируса лихорадки долины сырдарьи для приготовления диагностических препаратов

(5)5 С 12 й 7 ЕТЕНИЯ Цельгеннойдиагностторной дидарьи у лПри4909 кммента сжидкосте ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Гайдамович С,Я., Львова А.ИОбухова В.Р. и др. Антитела к арбовирусам в асците иммунизированных мышей. - Вопросы вирусологии, 1969, М 6, с. 676 - 683.Львов Д.К Каримов С.К., Кирющенко Т.В. и др. Выделение вируса лихорадки долины Сырдарьи. - Вопросы вирусологии, 1984, М 5, с. 553 - 558.(54) ШТАММ ВИРУСА ЛИХОРАДКИ ДОЛИНЫ СЫРДАРЬИ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ (57) Изобретение относится к вирусологии. Целью изобретения является повышение оптической и иммуногенной активности диагностических препаратов дря лабораторной диагностики лихорадки долины Сырдарьи у людей. Оригинальный штамм Изобретение относится к вирусологии.Штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи М Казкм хранится в лаборатории тра нсмиссивных вирусных инфекций НИИ эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Минздрава Казахской ССР и в государственной коллекции вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР под номером 810..,Ж 1634712 А 1 вируса лихорадки долины Сырдарьи М Каз-, 4909 км (ГКВ М 810) изолирован от комаров Апарнеев гпасиИреппв. Штамм прошел 6 пассажей, инкубационный период составляет 3 - 4 дня на новорожденных белых мышах. Инфекционный титр достигает 8,1 19 10 иу 0,02 мл. Взаимодействие штамма с культурами клеток СПЭВ, ВНК, Чего цитопатологического действия не вызывает, но титр вируса в культуральной жидкости достигает 4,0-5,0 19 1 05 о/0,02 мл, Штамм не обладает гемагглютинирующей способностью. Штамм не чувствителен к дезоксихолату натрия и хлороформу. Штамм М Каз - 4909 км показал антигенное родство с вирусом лихорадки долины Сырдарьи Я штаммомЕИ - КазБол, но отличается высокой антигенной и иммуногенной активностью, Штамм используется для приготовления специфических препаратов (антигена, иммунной асцитной жидкости), которые употребляются при идентификации вновь выявленных штаммов вируса лихорадки долины Сырдарьи, повышения диагностической эффективности лабораторных исследований больных лихорадкой долины Сырдарьи и изучения иммунологической Ь структуры населения, домашних и диких жи вотных, 3 табл,ааь изобретения - повышение анти- и иммуногенной активности для ических препаратов для лабораагностики лихорадки долины Сырюдей.идентификации штамма М Каз по реакции связывания компленабором иммунных асцитных й к вирусам, относящимся к раз 163471210 15 20 25 30 35 40 45 50 55 личным группам, установлена его антигенная связь со штаммом вируса лихорадки долины СырдарьиЕЧ - КазБол (табл. 1),ПрЕдлагаемый штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи М Казкм имеет следующую морфологическую и физиологическую характеристику.Морфологические признаки. При фильтрации вируссодержащей суспенэии через миллипоровые фильтры размером 100 и 500 нм снижения инфекционного титра не наблюдается, Обработка вируссодержащей мозговой суспензии дезоксихолалатом натрия и хлороформом не приводит к снижению титра вируса.На основании морфологических, морфогенетических и антигенных признаков изолированный штамм вируса относят к семейству Рсогпачгбае, антигенной группе знцефаломиокардита, штамму вируса лихорадки долины Сырдарьи.Культуральные свойства. При заражении перевиваемых культур клеток Чего, СПЭВ, ВНКштаммов В Казкм цитопатологического действия не наступает, но титр вируса в культуральной жидкости достигает 4,0 - 5,0 д05 о/0,02 мл.Адаптационные свойства, Исходный штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи ч. Каз - 4909 км выделен от комаров Апарнееэ васореппэ, адаптирован к организму 1 - 2-дневных белых мышей, прошел 6 пассажей, Инкубационный период составляет 8 дн при первичном заражении и сокращается до 3-4 дн в последующих пассажах. Инфекционный титр составляет 8,51 дО/0,02 мл. При заражении взрослых мышей в мозг гибель животных наступает на 4 - 5 день, а под кожу на 6 - 7 день с титром 7,5 д .О/0,03 мл,Антигенные свойства, Штамм не обладает гемагглютинирующей способностью. Сахароацетоновый антиген штамма не вызывает агглютинацию эритроцитов гуся, барана, морских свинок и бельх мышей, При серологической идентификации в РСК штамм М Каз - 4909 км показывает антигенное родство со штаммом вируса лихорадки долины Сырдарьи, но отличается более высокой антигенной и иммуногенной активностью.При иммунизации лабораторных животных штамм М Каз - 4909 км вызывает образование комплементсвяэывающих и вирусонейтралиэующих антител.У больных людей с остролихорадочными заболеваниями в, сыворотках крови также выявляет комнлементсвязывающие, преципитирующие и вируснейтрэлизующие антитела к штамму М Казкм. Патогенные свойства штамма для животных, Вызывает смертельную инфекцию у новорожденных и взрослых белых мышей при заражении в мозг и под кожу, с инфекционным титром 8,5 дО/0,02 мл и 7,51 д О/0,03 мл соответственно,Патогенные свойства штамма вируса лихорадки долины Сырдарьи,Штамм является патогенным и для человека, При обследовании остролихорадочных больных роль его в инфекционной патологии установлена в 5 случаях. Данные подтве ждены лабораторными исследованиями с применением диэгностикумов, приготовленных из этого штамма.Как показывают результаты в РСК и РДПА с антигеном штамма ч. Казкм специфические антитела в сыворотках крови людей выявляются в 2 и 2,5 раза соответственно чаще по сравнению с антигеном из штамма вируса лихорадки долины СырдарьиЕЧ - КазБол и в более высоких титрах.Диагностический препарат антиген из штамма ч. Каэ - 4909 км получают путем внутримозгового заражения новорожденных белых мышей, Из мозга животных, взятых на высоте клинических проявлений заболеваний, готовят антиген путем сахарозо-ацетоновой экстракции.Диагностическую иммунную асцитную жидкость готовят по известному методу.Изобретение иллюстрируется следующим примером. П р и м е р 1, Лабораторная диагностика заболеваний человека, вызванных вирусом лихорадки долины Сырдарьи, с использованием диагностикумов, приготовленных из штамма вируса М Казкм,Материал для исследования - сыворотки крови от больных людей с подозрением на арбовирусные инфекции, взятые в начальном периоде заболевания и реконвалесценции. Проводят постановку серологических реакций - РСК, РДПА с использованием сахарозо-ацетонового анти- гена, приготовленного из штамма вируса лихорадки долины Сырдарьи М Каз - 4909 км, Реакцию ставят по общепринятому способу - микрометодом на аппарате Такачи,Результаты исследования сыворотки крови больного приведены в табл. 2. Таким образом, использование предлагаемого штамма для приготовления диэгностикума способствует повышению диагностической эффективности лабораторных исследований больных лихорадкой долины Сырдарьи.1634712 Таблица 1 П р им е ч а н и е, Числитель - обратная величина титра антител, знаменатель - обратная величина титра антигена,Таблица 2 Таблица Составитель И,Тареева,Недолуженко Техред М,Моргентал Корректор О,Кравцова Тираж 366 Подписноеарственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 аказ 733 ВНИИПИ изводственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгоро агарина, 1 П р и м е р 2, Идентификация вируса лихорадки долины Сырдарьи в биологических объектах,Материал для исследования - 106-ная суспензия из клещей и комаров, собранных в природных очагах арбовирусных инфекций, Проводят постановку РНГА с эритроцитарными диагностикумами, приготовленными на основе иммунной асцитной жидкости иэ предлагаемого штамма вируса ЛДСД 1 Ф Казкм и известного штаммаЕИ-КазБол. РНГА ставится по известной методике (табл. 3). Как показывают результаты исследования, препараты, приготовленные из првдлагаемого штамма М Каз - 4909 км, позволяет в короткий срок и с максимальной достовер ностью провести идентификацию вируса лихорадки долины Сырдарьи в биологических объектах. Формула изобретения 10Штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи ГКВ Я 870 для приготовления диагностических препаратов.