Ингибитор вируса лихорадки ласса и вируса пичинде

(5)5 А 61 К 31/505 ГОСУДАРСТВЕЮЮЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬС(54) ИНГИБИТОР ВИРУСА ЛИХОРАДКИЛАССА И ВИРУСА ПИЧИНДЕ(57) Изобретение относится к вирусологии,Целью изобретения является поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношении аренавирусов Ласса и Пичинде, Цельдостигается использованием 5-фторурациИзобретение относится к вирусологии иможет быть использовано как эффективноесредство в отношении аренавирусов в химиотерапии.Цель изобретения - поиск лекарственных препаратов, эффективных в отношенииаренавирусов Ласса и Пичинде,Цель достигается применением 5-фторурацила (2,4-Диоксо-фторпиримидина),добавленного в поддерживающую росткультур клеток среду, для подавления размножения вируса лихорадки Ласса, вирусаПичинде (модель, взятая первично для установления противовирусного действия препарата в отношении аренавирусов) вкультуре клеток Чего.Предложенный препарат 5-фторурацил(2,4-Диоксо-фторпиримидин) по фармако.,Й 2 1822779 А 1 4-Диоксо-фторпиримидинг), добавго в поддерживающую рост культур к среду, для подавления размножения а лихорадки Ласса, вируса Пичинде ль, взятая первично для установления вовирусного действия препарата в отнии аренавирусов) в культуре клеток в концентрациях 400, 200, 100, 50 л на 72 ч, Инкубация проводилась при ратуре 37 С. В отобранных пробах рной жидкости определяли инфекциактивность исследуемого вируса мередукции бляшек под агароеыМ тием. 5-фторурацил обладает выраым противоареноеирусным дейстеиХимиотерапевтический индекс рата равен 8. 1 табл. ла (2, ленно клето вирус (моде проти ноше Чего мкг/м темпе культу онную тодом покры женн ем, препа логической значимости относится к антиметаболитам, в медицинской практике используется для лечения некоторых злокачественных опухолей. 5-фторурацил мало растворим в воде, слабо - в спирте. Водный раствор бесцветен и прозрачен, в клинической практике используется в виде 5-ного раствора натриевой соли.П р и м е р 1. Использовали двух- и трехсуточную культуру клеток Чего, в качестве модели для исследований взяты арена- вирусы Ласса и Пичинде (штамм Сьерра-Леоне и А)чсоответственно), полученные из музея вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР.8 качестве среды поддержки использовали 2,5 гемогидролизат (производство БелНИИЭМ) с добавлением 27.-ной эмбрио1822779 Характеристика противовирусного действия 5-фторурацила нальной сыворотки телят, 100 ед/мл гентэмицина, 7,5 раствор йаНСоз для доведения рН среды 7,2.Токсическое действие препарата изучали при гитровэнии его на культуре клеток Чего, Соединение брали в разведениях 800, 400, 200, 100, 50, 25 мкг/мл и вносили во флаконы, объемом 10 мл с культурой клеток. На каждое разведение использовали по 4 флакона. После 96 ч инкубации в термостате при 37 С учитывали максимально переносимую дозу соединения. Цитодеструктивные изменения культур клеток фиксировали по 4-крестовой системе. Максимально переносимой концентрацией считали 1/2 толерантной переносимой дозы, при которой отсутствовал цитотоксический эффект.При изучении ингибирующего действия препарата последний вносили в заданной концентрации в культуральную среду после 1,5-часовой адсорбции вируса, Контрольные и опытные культуры инкубировэли при 37 С в течение 72 ч, в отобранных пробах определяли инфекционную активность методом редукции бляшек под агаровым покрытием.Об антивирусной активности 5-фторурацилина судили по снижению инфекционного татра вируса в культурах, обработанных препаратом, в сравнении с контрольной культурой, где 5-фторурацил отсутствовал, Максимально переносимую концентрацию(МПК) препарата определяли в диапазоне 400 млг/мл, свидетельствует о 5 10 15 20 25 30 35 невысокой токсичности препарата в культуре клеток Чего, Максимально активной концентрацией (МАК) считали такую, при которой снижение инфекционного титра вируса было 1,5-1,7 19 БОЕ/мл, Мак равна 50 мкг/мл,В таблице представлены результаты излучения ингибирующего действия препарата в отношении эренавирусов Ласса и Пичинде, ХТИ при обеих инфекциях равен 8.П р и м е р 2. Двухсуточную монослойную культуру клеток Чего заражали вирусом Ласса, Множественность инфекции составляла 0,1-0,01 БОЕ/кл. После адсорбции вируса (1,5 ч) вносили поддерживающую рост культур клеток среду, в состав которой добавляли 5-фторурацил в концентрации 400, 200, 100, 50 мкг/мл. пробы инкубировэли 72 с при 37 С, затем отбирали и определяли инфекционную активность вируса методом редукции бляшек. В качестве контролей использовали зараженные культуры клеток и инкубированные без 5-фторурацила, ХТИ препарата при данной инфекции равен 8.Таким образом было установлено, что 5-фторурацил обладает выраженным противовирусным действием в отношении патогенного вируса ласса и Пичинде, химиотерапевтический индекс которого равен 8.формула изобретения Применение 5-фторурэцила в качестве ингибитора вируса лихорадки Ласса и вируса Пичинде.