Способ определения скорости разложения целлюлозы

(51) 4 0 01 И 23/00 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯИ АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) Институт биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР(56) Сорокин Ю.И. Определение продуктивности фотосинтеза йитопланктона в водной толще с помощью С , Физиология растений, 1959, т, 6, вып.1,118-125.7.МагСЫ еС а 1, Ъесощроя 1.Соп апй МяСгхЪыС 1 оп оГ геяЫиа. асС- ч.Су о 1 зобеС-ппсгоЪа 1 ро 1 уяассЬагИея сеИя, р 1 исояе, се 11 иояе апй теаС яСгач дп яо 1.". Во 1 Мо 1 оуВосЪешяСгу, 1974, 6, р. 221- 230. ЯО 1205667 А(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СКОРОСТИРАЗЛОЖЕНИЯ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ, включающий отбор пробы ила, почвы или воды, внесение в пробу целлюлозы, равномерно меченой углеродом 14, инкубированиепробы, измерение активности продуктов и определение по ней скоростиразложения целлюлозы, о т л и ч аю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности, инкубирование ведутв условиях, соответствующих естественным, а измерение активности проводят в неразложившейся целлюлозе,для чего отделяют целлюлозу от газообразных, летучих и водорастворимыхпродуктов разложения.Изобретение относится к областямбиогеохимии, почвоведения, деревообрабатывающей и целлюлозно-бумажной:промьппленности и может бьть использо-.вано при определении скорости разложения целлюлозы в природе, агроценозахпри очистке промьппленных сточных води в научно-исследовательской практике.Целью изобретения является ловышение точности определения скоростиразложения целлюлозы.Способ осуществляется следующимобразом.Измерение скорости разложения целлюлозы в иле водоема.Ил в количестве приблизительно10 г, взятый с различных горизонтов,помещают в стеклянные трубки и закрывают пробкой с одной стороны трубки вплотную к илу, с другой сторонывплотную к илу резиновым поршнем ичерез промежуток, заполненный полевым. раствором, - пробкой.Шприцем с длинной иглой черезприлегающую к илу пробку вводят радиоактивную метку(02 мл)С-целлюлозы, суспендированную в дистиллированной воде, с удельной вктивностью 0,6 Кц/мл, Для более. равномер 30ного распределения метки ил размешивают иглой внутри трубки, не открывая пробки. Внесение дополнительногообъема в ил компенсируют сдвигом3 гпоршня: одновременно с внесением 33радиоизотопа в ил 0,2 мл солевогораствора выдавливалось через воткнутую в противоположную пробку щприцовую иглу,Пробы, взятые с горизонта Ссм,Ос радиоактивной меткой инкубируют втечение 20 сут в иле пруда при естес.твенной температуре и освещеннссти.Параллельную пробу, взятую с горизон,4 гта 4-8 см, инкубируют в лабораторныхусловиях при температуре ила (около10 С) в темноте,Пробы Фиксируют введением в илчерез пробку 2 мл 1 н.раствора ИаОН,при этом проба подщелачивается до рН11-12 и деятельность микроорганизмов прекращается, Ил перемещивагвтдля лучшей Фиксации пробы, а внесение дополнительного объема жидкостикомпенсируют сдвигом поршня и выдавливанием солевого раствора. Для герметичного переноса пробы в перегонную колбу стеклянную трубку с пробой устанавливают в резиновую пробку колбы. Затем пробу с помощью порцгня выталкивают в перегонную колбу, В начале отгонки проводят подкисление пробы добавлением 2 мл концент-. рированного раствора НРО до рН 1-2 и кипячение пробы в течение 15 мин для полного удаления газов из пробы. Отгонку ведут в течение 3 ч, продувая воздухом, освобожденным от СО со скоростью 50 мл/мин.Из пробы предварительно удаляют меченые продукты разложения меченой целлюлозы: меченую углекислоту поглощают 1 Н КОН, меченые углеводороды также отгоняют из пробы, сжигаютг 1до СО и улавливают щелочью. Летучие органические вещества при отгонке улавливают в водяном холодильнике, затем перегоняю с паром в щелочь, Водорастворимые органические вещества экстрагируют кипящей водой из пробы и отделяют от осадка центриугированием при 8000 об/мин в течение 1 ч.Осадок высушивают досуха и выделяют целлюлозу из пробы, Выделенную целлюлозу растворяют в 723 НГО и али-. квоту отбирают в сцинтилляционныйраствор,Определяют активность проб на сцинтилляционном счетчике с учетом фона.Скорость разложения целлюлозы рассчитывают по Формуле где А - масса целлюлозы, разложившейся в 1 г ила в сутки, мг;Р - активность введенной меченойцеллюлозы;в - активность остаточной целлюлозы 1С - концентрация целлюлозы в иле,мг/г;время инкубации пробы, сут.Результаты измерений приведеныв таблице.,В таблице обозначены:в иле водоема: 1 и 2 - пробы, инкубированные в естественных условияхв иле; 3 - проба, инкубированная влабораторных условиях,1205667 Активность, имп/мин Глубина Горизонт, см Концентравзятияпробы,м Пробы остаточнойцеллюлозы введенной целлюлозы 3 0,6 Составитель А.Вихров Техред М.Ходанич Корректор Т. Колб Редактор С, Рекова Заказ 2688/3 Тираж 776ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 1 0,6 2 0,6 ция целлюлозы, мг/гсырогоила 0-4 1,3588 260000 181220 4-8 1,3588 260000 183794 4-8 1,3588 260000 179709 Скорость разложения целлюлозы, мг/гила в сут 0,019300,01800,0176