Способ определения активности пероксидазы

Номер патента: 1167502

Авторы: Аширов, Савченко, Смотров, Шанявский

ZIP архив

Текст

СООЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК 801167502 4(51 6 01 К 33 54 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТИЙОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Таджикский государственный университет им. В.И.Ленина(56)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗЫ путем добавления кпробам, содержацим пероксидазу, перекиси водорода и 5-аминосалициловойкислоты, инкубации реакционной смеСии спектро 4 отометрирования, о т л и -ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышения точности определения, после инкубации в реакционную смесь добавляют этанол или ацетон в количестве 32-48 об,Ж,116 502 Оптическая плотность окрашенного раствора при. 460 нм Концентрация без остановки реакции (известныйспособ) использованием останавливающего реагецта пероксиэтилового спирта ацетона дазы, цг/мл т- у Е.И ОММ+ ш О, 03+0, 01 0,05+0,01 0,09+0,01 О, 17+0,02 0,23+0,03 0,31+0, 01 О, 35+0, 02 0,08+0,05 62,50 33,33 20,00 11, 11 11, 76 13,04 О, 4+О, 01 0,5 25,00 6,66 О, 10+0,04 40,00 0,06+0,01 1,0 2,0 22, 22 О, 15+0,06 40,00 0,22+0,08 36,36 0,31+0,09 29,03 4,0 12,50 6,0 9,09 0,38+0, 11 28,95 3,23 6,66 8,0 0,43+0,1 24,44 26,56 22,09 10;00 8,33 0,57+0,03 0,64+0,17 5,26 5,17 16,0 20,0 4,05 5,54 О, 74+0, 03 0,86+0, 19 Изобретение относится к биохимии,в частности к способу определенияактивности пероксидазы, и может бытьиспользовано для решения различныхзадач, возникающих при иммунологических исследованиях, например дляколичественного определения антигена или антител в пробе биологическойжидкости,Целью изобретения является повы Ошение точности определения,П р и м е р 1, К девяти стандартным пробам пероксидазы, растворенным в 0,5 мл 0,01 М фосфатцого буфера рН 6,0, добавляют по 2 мл субстратной смеси, содержащей 11 нМ хромогена 5-амицосалициловой кислоты и6 цМ перекиси водорода в фосфатцомбуфере рН 6,0. Каждую реакционнуюсмесь ицкубируют в течение 5 миц 20при 20" С, а затем останавливают реакцию путем добавления в реакционнуюсмесь 1 мл ацетона. Оптическую плотность окрашенных растворов измеряютна спектрофатометре СФв видимой 15О, 09+0, 02 0,16+0,02 0,22+0,02 0,30+0,02 0,36+0,03 0,58+0,03 0,72+0,04. области спектра при длине волны 460 цм.П р и м е р 2. К девяти стандартным пробам пероксидазы, растворенным в 0,5 мл 0,01 И фосфатного буфера рН 6,0, добавляют по 2 мл субстратной смеси, содержащей 11 нМ хромогена 5-аминосалициловой кислоты и б цМ перекиси водорода в фосфатцом буфере рН 6,0. Каждую реакционную смесь ицкубируют в течение 5 мин при 20 С, а затем останавливают реакцию путем добавления в реакционную смесь 1 мл этилового спирта, Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют на спектрофотометре СФв видимой области спектра при длине волны 460 нм. 11 рцмеры иллюстрируются таблицей, в которой представлены сравнительные данные по измерению оптической плотности при определении активности пероксидазы предлагаемым и известным способами.1167502 Составитель Н.ГуляеваРедактор И.Рыбченко Техред О.Неце Корректор М.Розман Тираж 897 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Иосква, Ж, Раушская наб., д. 45Заказ 4427/42 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Из таблицы видно, что коэффициент вариаций измерений оптической плотности во всем интервале концентраций пероксидазы, полученных известным способом, выше коэффициентов вариаций измерений, полученных предлагаемым способом. Это говориттом, что предлагаемый способ обладает повышенной точностью и достоверностью определения по сравнению с известным.Применейие предлагаемого способа определения активности пероксидаэы при построении калибровочной кривой позволит повысить точность иммуноферментного анализа в 2,5 раза.

Смотреть

Заявка

3601049, 06.06.1983

ТАДЖИКСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. В. И. ЛЕНИНА

СМОТРОВ СЕРГЕЙ ПЕТРОВИЧ, САВЧЕНКО НЕЛЛА АНАТОЛЬЕВНА, ШАНЯВСКИЙ ИОСИФ ГЕРГАРДОВИЧ, АШИРОВ ПИНХАС МОИСЕЕВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/53

Метки: активности, пероксидазы

Опубликовано: 15.07.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/3-1167502-sposob-opredeleniya-aktivnosti-peroksidazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности пероксидазы</a>

Похожие патенты