Способ выделения эндонуклеазы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 537512
Авторы: Полидорова, Салганик, Сенженко, Старостина
Текст
(19) (11) а) С 12 Н 9/10 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Я алгааростинаско- чески ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ"технологическое бюро биолоактивных веществ(54) (57) СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ из культуральной жидкостиЯеггай 1 а вагсеясепя путем осаждения сульфатом аммония с последующей хроматографической очисткой,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения выхода целевогопродукта и его степени чистоты,хроматографию осуществляют на полистирольной анионообменной смоле типа АВ 17.Ф537512 Редактор 3. Бородкина Техред А.Бабинец Корректор А. Зимокосово Тираж 522 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Заказ 1065/3 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,4 Изобретение относится к биологии,а именно к способам получения ферментных препаратов.Известен способ получения эндонуклеазы, заключающийся в том, чтоцелевой продукт высаливают иэ культуральной жидкости Яеггай 1 а щагсезсепз с помощью сульфата аммонияс последующими хроматографией раствора на смоле Амберлит РЯС=50,обессоливанием на биогеле Р, хро Оматографией на смоле Сефадекс А и концентрированием раствора фермента.С целью повышения выхода целевого продукта и его степени чистотыхроматографию осуществляют на полистирольной анионообменной смолетипа АВ 17.Способ выделения и очистки эндонуклеазы из культуральной жидкостиЯегга 11 а вагсезсепз штамма В 10 М 1и 10 осуществляют следующим образом.Выращивание проводят по известной методике, Для этого 2 лкультуральной жидкости, содержащей300 ед, акт./мл эндонуклеазы (заединицу активности эндонуклеазыпринимают прирост оптической плотности в кислоторастворимой фракциица 1 единицу оптической плотности,измеренной при 260 нм, за 20 мин 30при 37 С), 0,1-0,2 от активностиэндонуклеазы ФМЭ и 1-2. от активности эндонуклеазы ФДЭ, центрифугируют, к супернатанту добавляют(Ю) ЯО до 40 насыщения и смесь 35 снова центрифугируют. Осадок отбрасывают, к супернатанту добавляютРНц) ЯОсдо 80 насыщения и смесьцентрифугируют, Осадок собирают ирастворяют его в 30 мл 0,05 Мтрис-НСй, рН 8,2, 0,005 М МдС 1 .Затем раствор фермента центрифугируют, нерастворимый осадок отбрасывают, Выход эндонуклеаэы по активности составляет 80-90. Супернатант, содержащий около 3 г белка, 5000000 ед.акт, эндонуклеазы, 0,1 ФМЭ и 0,2-0;5 ФДЭ, наносят на колонку с анионообменной смолой АВ 17 х 2 в фосфатной форме, уравновешенную 0,01 М Иа-фосфатным буфером, рН 7,5. Фермент не сорбируется на смоле и элюируется 0,01 М Иа-фосфатным буфером, рН 7,5, в объеме 500 мл. Пигменты, балластные белки, а также фосфатаза и фосфодиэстераза задерживаются на анионообменнике. Выход фермента по активности составляет 80-90.Раствор фермента концентрируют при упаривании на ротационном испарителе при 30 С до объема 100 мл.В результате очистки получают раствор фермента, содержащий около 100 мг белка, 4000000 ед.акт, эндонуклеаэы, около 0,01 ФДЭ и не более 0,001 ФМЭ. Общий выход фермента по активности составляет 60-70. В ходе очистки активность фосфатазы и фосфодиэстеразы уменьшается в 100 раз.
СмотретьЗаявка
1780634, 03.05.1972
СПЕЦИАЛЬНОЕ КОНСТРУКТОРСКО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЕ БЮРО БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
ПОЛИДОРОВА О. И, САЛГАНИК Р. И, СЕНЖЕНКО Л. П, СТАРОСТИНА В. К
МПК / Метки
МПК: C12N 9/10
Метки: выделения, эндонуклеазы
Опубликовано: 30.01.1984
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-537512-sposob-vydeleniya-ehndonukleazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения эндонуклеазы</a>
Способ определения ферментов, обладающих амидазной активностью
Номер патента: 1353809
Опубликовано: 23.11.1987
Авторы: Большакова, Кузнецов, Недоспасов, Незавибатько, Смоляницкий, Яхимович
МПК: C12Q 1/00
Метки: активностью, амидазной, обладающих, ферментов
...содержащему компоненты, необходимые для нормального функционирования фермента(например, соли, поддерживающие оптимальное значение рН), добавляют известное количество препарата,фесмента, Полученный раствор инкубируютпри постоянной температуре в течениефиксированного интервала времени,после чего добавляют раствор проявителя, содержащий диазоль, напримерборфторид нитрофенилдиазония, и кислоту, останавливающую действие фермента. Полученный раствор красителяпомещают в кювету спектрофотометраи определяют оптическую плотность,предпочтительно, в максимуме поглощения красителя, используя в качествераствора сравнения аналогичный посоставу раствор, в который ферментбыл добавлен лишь после добавленияпроявителя. По величине...
Способ получения ферментного препарата -галактозидазы
Номер патента: 891776
Опубликовано: 23.12.1981
Авторы: Бабенко, Васильева, Духович, Кондратьева, Михайлова, Момот, Парр, Рабинович, Селезнева, Столыпин, Терешин
МПК: A61K 38/46, C12N 9/38
Метки: галактозидазы, препарата, ферментного
...(-20) С на 15 ч, оттаивают при комнатной температуре, фильтруют с наполнителем на рамном Фильтр-прессе. Выход на стадии Фильтрации 80%. Натинный раствор с активностью2,7 ед/мл в количестве 20 л концентрируют в 10 раз по объему на ультраФильтрационной установке фирмы "И 1111 ро ге" на мембРане типа РТНК 00005. Получают 2 л раствора с активностью 26 ед/мл, выход на стадии 96,3 Е, Полученный раствор поцкисляют 3 н. НС 1 при перемешиваняи до рН 3,5 инактивации не наблюдается. -Галактозидазу из раствора сорбируют высокодисперсной формой смолы КМТ (ТУ-09-10-456-75) (40-60 мкм в количестве 100 г) па послойной ионообменной колонне, где смола (по 10 г) расположена 1 см - слоем на 10-и последовательно соединенныхкольцах.Смолу готовят путем...
Способ получения ферментного препарата гигролитина
Номер патента: 663715
Опубликовано: 25.05.1979
Авторы: Васильева, Кашкин, Кондратьева, Малков, Момот, Москвичев, Нынь, Полатовская, Прокопович, Столыпин
МПК: C12D 9/14
Метки: гигролитина, препарата, ферментного
...ЦНИИПЙ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Рвушская наб. д, 4/5Филивл ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 иительным введением хлористого кальцияв количестве 0;5-1% от его объема, после чего осуществляют удаление примесейэквимлентным количеством целдюлозы иалюмовммонийных квасцов при рН 4,85,0, при атом гигромицин удаляют непосредственно перед сушкой препарата,Способ осуществляют следующим образом, 1 ОПроцесс ферментвции Лс 0 пощусей ИуР 6 сорсм проводят в аппврвтах емкостью 2000 л нв среде известного составапри температуре 31-33 С, аэрации0,4 об/об среды в 1 мин в течение 96 ч, 5Протеолитическвч вктивнооть культурвльной жидкости достигает 35 ПЕ/мл, содержание гигромицина Б 70...
Способ получения поверхностно-активного вещества для обработки твердой фазы буровых растворов на углеводородной основе
Номер патента: 1361138
Опубликовано: 23.12.1987
Авторы: Ефимов, Золина, Мильчакова, Мухин, Огнева, Травникова
МПК: C07C 143/34, C11D 3/34
Метки: буровых, вещества, основе, поверхностно-активного, растворов, твердой, углеводородной, фазы
...15П р и м е р 1. Получение-.ПАВРГПТФ.3 мл 0,1 М РеС 1, сливают с 7 мл0,1 М раствором сульфонола НП. Осадок промывают водой и высушивают до 20постоянной массы в термошкафу. Массаосадка 0,231 г. Полученный при этомпродукт представляет собой пастообразную массу коричневого цвета, содержащую в своем составе различные 25соединения железа. Продукт хорошорастворим в бензоле, хлороформе,спирте, ксилоле, немного хуже растворим в декане, нерастворим в воде.Мол.м. 687. 30Элементный состав, 7.: Н 8,5; С53,7; Ре, 6,53; Б 8,34.Продукт растворяют в углеводородеили спирте и вводят в буровой раствор в количестве 1 г на 1500-1700 гтвердой фазы барита), Максимальнаярастворимость продукта при 20 С составляет, мас. : в о-ксилоле 12,5;в н-декане 5; в...
Способ разделения рацемической смеси (его варианты) и способ отделения хирального продукта от ахирального предшественника
Номер патента: 1825378
Опубликовано: 30.06.1993
Автор: Стефен
МПК: C12P 13/06, C12P 17/12, C12P 41/00
Метки: ахирального, варианты, его, отделения, предшественника, продукта, разделения, рацемической, смеси, хирального
...10,8 мл препарата эстеразы свиной печени (мол, м. 150000, 11 мг/мл, Сигма Кемикал Ко, Кат Ь Е 3128) в 300 мл 0,2 М фосфатного буфера, рН 8. Этот фермент, попадающий в категорию зстераз, гидролиэует этилбутират растворенный в воде, т. в. реакция является гомогенной и не требует наличия границы раздела органика/вода.Фермент загружают в тот же самый мембранный модуль, что описан в примере 6, рециркули руя раствор фермента со стороны оболочки в сторону отверстия и обратно в резервуар для раствора в режиме ультра- фильтрации.Во время процесса загрузки разность давлений между отделениями оболочки и отверстия поддерживают 9,5 пси, устэнав. ливая скорость ультрафильтрации (обычно между 200 и 20 мл/мин). Процедура завершается эа 1 ч, Исходная и...
Предыдущий патент: Патронный фильтр
Следующий патент: Состав для антикоррозионного покрытия
Случайный патент: Колено трубопровода