Питательная среда для выявления р детерминанты вирулентности

ОПИСАНИЕ щИЗОБРЕТЕНИЯ Сеез Севетсииз Социалистичеиих Республик(51)М. Кл. С 12 К 1)06 ГосударственнмЯ номнтет СССР но делам нзобретеннЯ н открмтнЯ(5 4 ) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫЯ ВЛЕНИЯ Р+ ДЕТЕРМИНАНТЫ ВИРУЛЕНТНОСТИ 0,4-0,7 1,8-2,5 0,05-0,30 0,0001-0,0005)0,5-2,00,01-0,10 4,0-4,2 Изобретение относится к области медицины, а именно микробиологии.Известна питательная среда для выявления рф детерминанты вирулентности, содержащая агар, калий фосфорнокислый однозамещенный, хлористый аммоний, сернокислый аммоний, галактозу, В-фенил-алании, метионин, цистеин, валин, изолейцин, глицин, сернокислый магний, сернокислый цинк, сернокиюый марганец, 4-раствор молочной кислоты, аргинин, краситель, ростовой фактор и воду 11. Однако известная среда является сложной и дорогостоящей.Целью изобретения является упрощение среды с сохранением ее ростовых свойств.Эта цель достигается тем, что среда содержит в качестве ростового фактора сериокислое закисное железо, в качестве красителя - Эванс голубой при следующем количественном соотношении компонентов (г/л воды):Агар 18,О-гО,ОКалий Фосфорнокислый однозамещенный30 Хлористый аммэний 0,4-0,7СернокислыйаммонийГалактозаВ-Фенил-д алании 0,1 О,18Метионин 0,05-0,10Цистеин 0,04-0,08Валин О, 04-0,08Изолейцин 0,05-0.,10Глицин 0,04-0, 10СернокислыймагнийСер ноки слыйцинк 0,0001-0,0005СернокислыймарганецМолочнаякислотаЭванс голубойСернокислоезакисное железо 0,3-1,0Аргинин 0,1-0,2.Способ иллюстрируется следующим примером.П р и м е р. Для приготовления 1 л дифференциальной среды с звано,10 ЦНИИПИ Заказ 2777/24 Тираж 522 Подписное Филиал ППП Патент г. ужгород, Ул. Проектная, 4 гоЛубым 20 г агар-агара эамачиваютв дистиллированной воде, Набухшийагар-агар промывают, меняя воду втечение 2-3 суток не менее 8-10 раэ,Отмытый агар расплавляют нагреваниемв 500 мл воды, устанавливают РН 1 Краствором КаОН до 7,0. Продолжая нагревание, добавляют 4,12 г КНРО,растворенного в 300 мл воды приоН 8,0 (добавляя 1 И БаОН), 0,53 гЯНСР,растворенного в 100 мл водыи 0,53 г (ЯН 4) БОч, растворенноготакже в 100 мл воды. Агар перемешивают, доводят до кипения, устанавливают РН до 7,4-7,5 и автоклавируютпри 120 ф 20 минут. После автоклавирования агар фильтруют и стерильнона 1 литр агара при температуре55 ф 5 добавляют следующие компоненты среды:2 г галактозы (10,0 мл 20 раствора)120 мг -феннл-аланнна (30 мл0,4 раствора)60 мг метионина (5 мл 1,2 раствора)48 мг цистеина (5 мл 0,96 раствора)48 мг валина (5 мл 0,96 раствора)55 мг иэолейцина (15 мл 0,363раст вора)50 мг глицина (5 мл 1 РаствоРа)100 мг МдБОФ (2,5 мл 4 раствора)0,1 мг 2 пБОц (1 мл 0,01 раствора)0,1 мг МпБО (1 мл 0,01 раствоРа)40 мг молочной кислоты (1 мл 4раствора)104 мг аргинина (10 мл 1,04 раот вора)30 мг Эванса голубого (5 мл 1раствора)800 мг ГеБО (16 мл 5 раствора)Готовув среду разливают в чашкиПетри, которые на сутки пом щают в термостат прн 37 для проверки на стерильность. На чашки высевают по 200-500 м.к. изучаемого штамма чум-х ного микроба и выращивают при 28 в течение 4-6 суток, Р колонии-темФно синие, Р- - светлые.Данная среда может быть модифицирована путем использования в качестве стимулятора роста сульфита натрия в конечной концентрации 0,1 либо соли Мора в конечной концентрации 50-80 мг , а в качестве красителя - трипанового синего, конго красного или амидочерного в конечно 4концентрации 3-5 мг . использование изобретения поэволитвыявить Р детерминанту внрулентностну чумного микроба с использованиемболее доступной и дешевой среды. Питательная среда для выявления-фенил-алании, метнонин, цистеин,валин, изолейцин, глицин, сернокислый магний, сернокислый цинк, сернокислый марганец, 4 раствор молоч(5 ной кислоты, аргииин, краситель,ростовой фактор и воду, о т л ич а ю щ а я с я тем, что, с цельюупрощения среды с сохранением ееростовых свойств, она содержит в20 качестве ростового фактора сернокислое эакисное железо, в качествекрасителя - Эванс голубой при следующем количественном соотношениикомпонентов (г/л воды):75 Агар 18,0-20,0Калий фосфор"но ки слый 4,0-4,2однозамещенныйХлори алый ам -монийСернокислыйаммоний О, 4-0Галактоза 1, 8-235У-фенил-Х-алании 0,10-0Метионин 0,05-0Цистеин 0,04-0Валин 0,04-0Иэ оле йци н О, 05-040 Глицин 0,04-0Сернокислыймагний 0,05 - 0Сернокислыйцинк 0,0001-0Сернокислыймарганец 0,000 1 вМолочная кислота 0,5-2Эванс голу 00,0) - 0Сернокнслоезакисное железо О, 3 в ),0Аргинин О,) - 0,2 .Источники информации,принятые во внимание при э кспертиэе1. Т. Ехрег, РаЬо 0, (Вг 11,) 1956,ХХХЧ 11, 6, 570-576,