Способ выделения ферментных препаратов
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 543670
Авторы: Арье, Брод, Дытнерский, Ермолаев, Ирген, Карклиньш, Ниедра, Станкевич, Стенгревиц, Шнитко, Яворковская
Текст
543670 10 20 30 ф-2 ", тттт ЦНИИПИ Заказ б 125/53 Тираж 5 7 пиен илиал ППП Патент ". г. Ужгород, ул. Проектная Стабилизация фермента в концентрируемом растворе при введении полиэлектролита типа ионита происходит в результате полного вхаимодействия противоположно заряженных молекул фермента и вводимого полиэлектролита, Указанное взаимодей. ствие предотвращает денатурацию фермента при ультрафильтрации у поверхности мембраны, исключая 30%-ные потери активности фермента, что обеспечивает последующее выделение ферментного пре. парата с выходом до 95%.Предлагаемый способ получения ферментных препаратов заключается в том, что к культуральному раствору фермента после удаления микробной биомассы добавляют стабилизирующий агент-водорастворимьй полиэлектролит класса ионитов - и затем проводят процесс ультрафильтрации с использованием сепарирующей мембраны, концентрируя ферментньй раствор с одновременным удалением низкомолекулярных примесей. При степени концентрирования почти в 40 раз активность стабилизированного ферментного раствора возрастает также в 40 раз, Последующее извлечение ферментного препарата вакуумной сушкой из концентрата обеспечивает выход готового продукта до 95%.П р и м е р 1, Культуральньй раствор каталазы объемом 38 л с начальной активностью 800 ед/мл центрифугируют и фильтруют для отделения био. массы, К фугату добавляют 80 мл 5%-ного водораст. воримого полиэлектролита формулы где В, - радикал стирола.11 осле этого фугат концентрируют ультрафильтрацией до 1 л, Сконцентрированный раствор про- З 5 мывают 5 л дистиллированной воды. Активность концентрата 32 ед/мл раствора, т.е. выход по активности в концентрате 107%.Концентрат упаривают в вакууме при 30 С досуха. Выход сухого препарата каталазы 14 г,удельная 40 активность 3000 ед/мг белка или активность 2000 ед/мг препарата, т.е. выход готового продукта составляет 94%,П р и м е р 2. Культуральный раствор каталазы объемом 20 л с начальной активностью 2100 ед/мл 45 центрифугируют для отделения биомассы, а затем к фугату добавляют 40 мг 10%-ного раствора водо- растворимого полиэлектролита формулы где В, - радикал изопропилметакрилата. Помутневший фугат перемешивают,. отделяютнебольшой осадок декантацией и фильтрацией, К прозрачному раствору фермента добавляют еще 20 мл 10%-ного раствора того же полиэлектролита. Раствор фермента с добавкой стабилизатора концентрируют до 0,7 л, а затем концентрат диафильтрацией промывают сначала 2 л 0,1 м фосфатного буфера, имеющего рН 8,0, а затем 3 л дистиллированной воды. Активность концентрата 60000 ед/млвыход по активности в концентрате 99%.Концентрат упаривают досуха в вакууме при 30 С, Выход сухого препарата каталазы 10 г, удель. ная активность 5100 ел/мг белка или активность 4000 ед/мг препарата, т.е. выход готового продукта 95%.Таким образом, предлагаемьй способ обеспечивает высокий выход (до 95%) готового фермент- ного препарата и стабилизацию фермента, позволяющую в свою очередь, предотвратить 30%-ные потери активности. Формула изобретения 1. Способ выделения ферментных препаратов,например каталазы, из культуральной жидкости,предусматривающий концентрирование последнейультрафильтрацией и последующее извлечение фермента из концентрированной культуральной жидко сти, о тли чающий с я тем, что,сцельюувеличения выхода готового продукта и стабилизации фермента, к культуральной жидкости перед ультрафильтрацией добавляют водо растворимый полиэлектро.лит класса ионитов,2. Способно п, 1, отличающий с ятем, чтов качестве водорастворимого электролита используют вещество формулы где В, - радикал стирола.3, Способ по п. 1 о т л и ч а ю щ и й с ятем, что вкачестве водорастворимого полиэлектролита используют вещество формулыД ИС 5 л, УВгде Вз - радикал изопропилметакрилата,4, Способ по пп,1, 2, 3, отличающийсятем, что водорастворимый полиэлектролит добавляют в количестве 0,1 - 0,15 мг на 1000 ед, активностифермента.Источники информации, принятые во вниманиепри экспертизе:1, "Вотесйпооду апд Воеп 9 пеегпц", 1971,т. 13,стр. 185,2, "Сйепзка апд Ргосеяа Епцпеег по", 1970, т. 51,Х 12, стр. 49 - 51, (прототип),
СмотретьЗаявка
2040849, 03.07.1974
ОЛАЙНСКИЙ ЗАВОД ХИМИЧЕСКИХ РЕАКТИВОВ, ЛАТВИЙСКИЙ ФИЛИАЛ ВСЕСОЮЗНОГО ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОГО ИНСТИТУТА ХИМИЧЕСКИХ РЕАКТИВОВ И ОСОБО ЧИСТЫХ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ "ИРЕА"
ИРГЕН АРИЯ МАРТЫНОВНА, ЕРМОЛАЕВ ЕВГЕНИЙ ДМИТРИЕВИЧ, ЯВОРКОВСКАЯ ЛЮБОВЬ ЛАЗАРЕВНА, БРОД ИВАР ИСАКОВИЧ, СТЕНГРЕВИЦ ОЛАФ АНДРЕЕВИЧ, СТАНКЕВИЧ ПАУЛ-РАЙМОНД АЛЕКСАНДРОВИЧ, НИЕДРА ИНГМАР ЮЛЬЕВИЧ, ШНИТКО ИГОРЬ КОНСТАНТИНОВИЧ, ДЫТНЕРСКИЙ ЮРИЙ ИОСИФОВИЧ, АРЕ РУТА ЮРЬЕВНА, КАРКЛИНЬШ РОМАН ЯНОВИЧ
МПК / Метки
МПК: C12D 13/10
Метки: выделения, препаратов, ферментных
Опубликовано: 25.01.1977
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-543670-sposob-vydeleniya-fermentnykh-preparatov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ выделения ферментных препаратов</a>
R (+)-n-пропаргил-1-аминоиндан и его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли и фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей b-форму фермента моноаминооксидазы активностью
Номер патента: 2001614
Опубликовано: 30.10.1993
Авторы: Джеффри, Джон, Дэвид, Мойша, Рут, Тиртсох, Хайли
МПК: A61K 31/135, C07C 211/42
Метки: +)-n-пропаргил-1-аминоиндан, b-форму, активностью, ингибирующей, кислотно-аддитивные, композиция, моноаминооксидазы, обладающая, пригодные, соли, фармацевтическая, фармацевтически, фермента
...к МАО-В, чем к А. В этомслучае обнаружено лишь небольшое различие относительных активностей двух разделяемых энантиомеров, что еще болееподчеркивает замечательный эффект для35 случая й (+)-РА (см,табл.1 А).Соединение В (+)РА, отвечающее данному изобретению. обладает способностьювосстанавливать память, благодаря чемуоно может использоваться для лечения за 40 болеваний, связанных с потерей памяти,слабоумием и особенно полезны для лечения болезни Алцгеймера, для лечения депрессии и гиперактивного синдрома удетей.45 Изобретение охватывает новое соединение Я (+)-энантиомер ч-и ропаргил-аминоиндэна В (+)РА формулы50 ф й-СН -С=СН Н2 Н и его кислотно аддитивные соли, пригодные для фармацевтического использования.55 Изобретение...
Способ выделения ацетилхолинэстеразы
Номер патента: 721450
Опубликовано: 15.03.1980
МПК: C07G 7/02
Метки: ацетилхолинэстеразы, выделения
...10% глицерина, проводят линейным градиентом, образованным смешением уравновешивающего буфера с 0,5 М ЦаСЯ в том же буфере, Последний атап .очистж состоит в хроматографии АХЭ на колонке с гранулированным гидроксиапатитом, уравновешенным 0,01 М йо -фосфатным буфером рН 7,6, содержащим 10% глицерина. Элюцию фермента проводят 0,5 МИаСК в том же буфере. Этот этап вьшеления позволяет в еще большой степени очистить и сконцентрировать целевой продукт. Замена на этом этапе трис-НС 8 буфера на фосфатный облегчает определение концентрации белка методом Лоури. Полученный препарат АХЭ, как следует из результатов электрофоретического анализа, гомогенен. Молекулярный вес фермента 110000 т, 10000, Фермент гидролпзует ацетилхолин АТХ (К;1,3 х х 10 М),...
Способ определения протеолитической активности ферментного препарата
Номер патента: 1027141
Опубликовано: 07.07.1983
Авторы: Денис, Ионушене, Карпавичюс, Степонавичюс
МПК: G01N 33/48
Метки: активности, препарата, протеолитической, ферментного
...точность определения протеолитической активности.Для проведения определения протеолитической активности исследуемый раствор фермента инкубируют с субстратом. В инкубационную смесь добавляют буфер рН=9,3, раствор 2,4,б-тринитробензолсульфокислоты, термостатируют при ЗОф С в течение 30 мин, добавляют формалин до кон-, центрации Формальдегида 0,3-0,6 М, взбалтывают и спектрофотометрируют при 420 нм.Способ проверяют на следующих ферментных препаратах: щелочночной протеазе из Вас.зцЬ 1181 з, химотрипсине, протосубтилине ГЗх.П р и м е р 1. Определение активности нейтральной протеазы в протосубтилине ГЗх.В универсальном буфере рН=7,2 готовят 0,75-ный раствор белкового субстрата, Концентрация ферментного препарата в универсальном буфере...
Способ определения биологической активности химических препаратов
Номер патента: 368308
Опубликовано: 01.01.1973
Авторы: Высоцка, Гамбург, Ошарова
МПК: C12Q 1/02
Метки: активности, биологической, препаратов, химических
...не превышает 0,2 - 0,5 лгг. Средняя квадратпчная ошибка одного определения из пяти повторностей не превышает 5%,Для осуществления предлагаемого способа в пробирки размером 16;х,150 лтлт вносят по 0,5,цл водных растворов испытуемых препаратов в нескольких концентрациях и по 3,5 лгл суспензии клеток табака или сои, разбавлен. ной свежей средой Мурашпгеи Скуга в 10 раз Пробирки закрывают ватными пробками и помещают в наклонный вращающийся со скоростью 60 об/,вин барабан и затем культивируют 5 - 7 дней при 26 в темноте. По окончании срока культивации содержимое каждой пробирки переносят на стеклянный фильтр, среду отсасывают, а ткань взвешивают. При использовании ткани табака помимо определения веса необходим подсчет количества клеток,...
Способ определения меланоцитстимулирующей активности гормональных препаратов
Номер патента: 953567
Опубликовано: 23.08.1982
Авторы: Бурлакова, Голиченков, Калистратова, Попов, Соколова
МПК: G01N 33/48
Метки: активности, гормональных, меланоцитстимулирующей, препаратов
...и снова помешают в темноту, Через 30 мин после начала опыта гоповастиков просматривают, Потемнение пичинок происходит только в группе, погру женной в раствор, где активность кортикотропина составпяет 2 Ед./мп. Отсюда делают вывод, что порог активности, вы-, эываюший потемнение гоповастиков, 1,82,0 Ед/мп.озволяе Составитель С, МалютинаТехред М,Э;йвес Корректор И Муск дактор А. Коз Заказ 6269/7 87 Подписное ственного комитетабретений и открытийЖ, Раушская наб,аж 8 судаиз НИИПИ по делам 35, Мос 4 Филиал ППП "Патент", г, Ужгород, уп, Проектная,3 9535Б р и м е р 2, При определении мепаноцитстимулирующей активности субпимированного сырья (цельные свиные гипофизы) приготавливают экстракты сублимированного сырья разной концентрации. 5,Вля...
Предыдущий патент: Способ очистки хлебопекарных дрожжей
Следующий патент: Способ выделения -аспарагиназы
Случайный патент: Устройство для сортировки горной массы