Ионушене
Способ определения протеолитической активности ферментного препарата
Номер патента: 1027141
Опубликовано: 07.07.1983
Авторы: Денис, Ионушене, Карпавичюс, Степонавичюс
МПК: G01N 33/48
Метки: активности, препарата, протеолитической, ферментного
...точность определения протеолитической активности.Для проведения определения протеолитической активности исследуемый раствор фермента инкубируют с субстратом. В инкубационную смесь добавляют буфер рН=9,3, раствор 2,4,б-тринитробензолсульфокислоты, термостатируют при ЗОф С в течение 30 мин, добавляют формалин до кон-, центрации Формальдегида 0,3-0,6 М, взбалтывают и спектрофотометрируют при 420 нм.Способ проверяют на следующих ферментных препаратах: щелочночной протеазе из Вас.зцЬ 1181 з, химотрипсине, протосубтилине ГЗх.П р и м е р 1. Определение активности нейтральной протеазы в протосубтилине ГЗх.В универсальном буфере рН=7,2 готовят 0,75-ный раствор белкового субстрата, Концентрация ферментного препарата в универсальном буфере...
Способ определения протеолитической активности ферментов
Номер патента: 918305
Опубликовано: 07.04.1982
Авторы: Галаев, Денис, Ионушене, Савицкене, Степонавичюс, Швядас
МПК: C12Q 1/38
Метки: активности, протеолитической, ферментов
...при 30 СФ 5 мин. В одну пробирку приливают 1 мл 1 и фермениного раствора, а в другую - 1 мп инактивированного кипячением фермениного растворао. (контроль) и инкубируют при 30 С 10 мин"после чего выдерживаРют обе пробирки в кипящей водяной бане ии Д мин. В пробирки приливают по 10 мл о-фталевого реагента, взбалтывают и видерживают при 30 С 15 минпосле чего определяют оптическую плотность раствора на спекирофотометре при 340 нм гф против контрольной пробы (с инакиивированным ферментом).Нротеопитическую активность в ед,/г вычисляют по формуле:гзПД= ,.й 10 000, где Й - оптическая плотность раствора;12 - разведение ферь 3 ениного раствоРа в ходе сйределении; . ЭйГЗ - глициновый эквивалент, определенный по калибровочной кривой...