Способ получения сорбента

св оюатентнс ; .к;,нчвскайбвбли.,тт;ка МЬОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 11479782 Союз Советских Социалистических Республик(23) Приоритет -Опубликовано 05,08,75. Бюллетень29Дата опубликования описания 15.01,76 08 Ь 15/О 51) М Государственный комитет авета Министров СССпо делам изобретений и открытий 53) УДК 661.728) Авторы изобретен В. П. Демушкин и М, А. Ива ститут химии природных соединений им, М. М, Шемякина 71) Заявитель) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕН Изобретение относится к способу получения сорбентов на основе простых эфиров целлюлозы, содержащих изотиоцианатные группы, которые можно использовать для получения водонерастворимых ферментов.Водонерастворимые ферменты широко используются в пищевой, химической, микробиологической промышленности, а также в лабораторных исследованиях,Для получения сорбентов на основе простых эфиров целлюлозы используют азидный метод, диазотирование и ряд реакций по гидроксильной группе целлюлозы. Недостатком этих методов является то, что при связывании многих ферментов активность полученных водонерастворимых ферментов значительно уменьшается по сравнению с активностью исходных ферментов, что связано, повидимому, с малой избирательностью реак - получение сорбентов го материала, содержаю группу, пригодного зывания с ферментами ное произ еляют це ют водой, шивают в о данным э содержитс упп одное аминоэтилтрифугированием.тиловым спиртомакууме над Р 20; лементарного ана 0,24 мэкв/г изосорбента н озы состои ллюлозы о емпературе ом при 35 -основе пров том, что абатывают 5 - 80 С и 0 С. изотиоциа карбок атного проиметилцеллю вод озь Цель изобретенияна основе целлюлознощего изотиоцианатнудля ковалентного свяв мягких условиях.Способ получениястых эфиров целлюламинопроизводные цесероуглеродом при тизобутилхлорформиат Пример,1. Получение изотиоцианата аминоэтилцеллюлозы (АЭ-целлюлозы),200 мг АЭ-целлюлозы (0,25 мэкв/г) суспен 5 дируют в 1,85 мл 0,3 М водного раствораИаОН в круглодонной колбе с обратным холодильником, перемешивая на магнитной мешалке. К суспензии прибавляют 0,3 мл(3,7 моль) сероуглерода и перемешивают10 30 мин при комнатной температуре, после чего смесь медленно нагревают до 80 С и перемешивают при этой температуре 1,5 час,При этом происходит окрашивание смолы врозовый цвет.15 Реакционную смесь охлаждают до 35 -40 С, вносят 0,44 мл (3,7 иоль) изобутилхлорформиата и перемешивают 30 мин, Черезнвкоторое врвмя после внесения изобутилхлорформиата окраска исчезает. Изотиоцианат целлюлозы отд Смолу промыва и эфиром, высу 25 Выход 190 мг.,П лиза в образце тиоцианатных гр 11. Получение ного на основ зО (КМ-целлюлозы)479782 Составитель И. Павленко Техред 3. Тараненко Редактор Л. Ушакова Корректор В. Гутман Заказ 1092/1845 Изд.913 Тираж 496 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушсхая наб д. 4/5Тип. Харьк, фил, пред, Патент 500 мг КМ-целлюлозы (Н+ - форма, 1 мэкв/г) суспендируют в 5 мл воды и при перемешивании приливают растворы 86 мг 1,8-диаминооктана (0,59 моль) в 4 мл воды и 250 мг (0,6 моль) а-толуолсульфоната циклогексил-р- И- (И-метилморфолиний)-этилкар бодиимида в 4 мл воды. Суспензию перемешивают 16 час при комнатной температуре, Осадок смолы отделяют центрифугированием, промывают водой, этиловым спиртом, эфиром и высушивают в вакууме над Р 20 з. Выход 490 мг. Содержание азота,0,535 мэкв/г.Изотиоцианатное производное 8-аминооктиламида карбоксиметилцеллюлозы синтезируют аналогично п, 1. Содержание серы 0,115 мэкв/г. 111. Синтез изотиоцианата а-аминобензилцеллюлозы проводят аналогично п. 1.1 Ч. Ковалентное связывание пиримидилрибонуклеазы с полученными сорбентами.50 мг изотиоцианата аминоэтилцеллюлозы суспендируют в 1 мл 0,1 М боратного буфера (рН 8,7) и приливают 1 мл раствора пиримидилрибонуклеазы (13,4 ое/мл, 280 нм). Смесь перемешивают 6 час при комнатной темпера туре. Осадок смолы промывают 2 раза по 1 мл 0,3 М раствором КаС 1, водой до отсутствия С 1 - (по качественной реакции с АдКО,).5 Супернатанты объединяют и определяют оптическое поглощение при 280 нм. Количество белка, связанного сорбентом, вычисляют по разности оптических поглощений, оно составляет 102 мг/г сорбента.1 О Анализ ферментативной активности показал, что активность водонерастворимого фермента составляет 95 в 10 от исходной активности,15 Предмет изобретения Способ получения сорбента обработкойцеллюлозного материала модифицирующими агентами, отличающийся тем, что, с целью по 2 о лучения сорбента с высокой ферментативнойактивностью, в качестве целлюлозного материала используют аминопроизводные простых эфиров целлюлозы и последовательно проводят обработку сероуглеродом при 25 - 80 С 25 и изобутилхлорформиатом при 35 - 40 С.