Способ получения l-глутаминовой и l-пирролидонкарбоновой аминокислот

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 257370 Союз Советских Социалистических РеспубликАТЕНТУ Зависимый от патента 2 д, 6/О Заявлено 13 ЛЧ.1963 (Лв 831030/2Приоритет МПК С 07УДК 663.668:394(088.8) Комитет по делам зобретений и открытий при Совете Министров СССРубликовано 11.Х 1.1969 летеньата опубликования описания 14.1 Ч.1 Авторыизобретен Иностранцада, Ацусии Тэцудзи Н норИ, КаВасаки ." й%ЛЦ,- ;,", а, Кадз рао Огам иро иси ая Иностранная фирма ова Хакко Коге Кабусиаявител Кайс ОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Е-ГЛУТАМИНОВОЙ И -ПИРРОЛИДО КАРБОНОВОЙ АМИНОКИСЛОТ2 ния 1,-глутаминовой ания продуцента ее жидкой углеводнореде с добавлением Известен способ получе кислоты путем культивиро М 1 сгососсцз д 1 Шатп 1 спз на минеральной питательной биотина. в воднойава, %: Прим е О питательноосахармала щегофосфат 5 ение начинается следующего сос жидкость крахове редуцирую)лмонпянпя р. Брожсреде енная и(на осн сахара моноа 1 днам мо т калия аммони магчпя марган железа 0,0 0,1 0,1 0,3 0,2 0,05 0,00 0,00 ульф Предлагаемый способ дает возможность увеличить выход и концентрацию Ь-глутаминовой кислоты. Для этого в процессе выращивания продуцента в питательную среду добавляют антибактериальный агент, замедляющий рост продуцента, например хлористую ртуть, фенилацетатную ртуть, пенициллин.Сущность способа состоит в следующем.Продуцент 1.-глутаминовой и Е-пирролидонкарбоновой аминокислот культивируют на жидкой углеводно-минеральной питательной среде с добавлением биотина в количестве, большем оптимального, и антибактериальных реагентов, замедляющих рост продуцента, например хлористой ртути, фенилацетатной ртути, пенициллина, Реагенты, замедляющие рост, должны способствовать повышению активности сверхоптимального количества бпотина; контролировать ненужный рост мицеллы и образование побочных продуктов, вызванных биотином, так, чтобы поддержать метаболическое течение преимущественно в направлении накопления 1.-глутаминовой кислоты. Вместо непосредственно Ы-биотина могут быть использованы любые вещества, проявляющие микробиологическую активность, присущую д-биотину, например, гомологи биотина, такие, как Е-дестиобиотин и д, 1.-биотиновый тионил, 5 диаминопеларгопическая кислота и ей подобные. И-Биотин или его гомологи вводят в количестве от 10 - до 1 лтг/л в зависимости от условий брожения, а диаминопеларгоническу.ю кислоту - в количестве от одного до несколь ких сот миллиграммов на 1 л. -Биотин и емуподобные вещества добавляют в питательную среду в период от 2 до 24 час после начала брожения, сразу пли по частям. Реагенты, замедляющие рост продуцента, добавляют в пи тательную среду в количестве от 10 т до0,5 лг/лл. Культивирование проводят при аэрации среды, рН 6 - 9 и температуре 33 С,257370 Таблица 1 Группы цикловброжения Пен ициллин Х 10 мг/л Осахаренная жидкость, % Биотин 10 - 3 мг/л ААА10 А А10 10 10 10 10 0 0 10 50 150 Предмет изобретения Таблица 2Результаты анализа через 48 час после начала брожения 1-глутаминовая кислота, мг/мл Е-глутаминовая кислота1,0 6,0) 50,7 54,0) Составитель В, Дунь дактор Э. Н. Шибаева Корректор В ЦНИИПИ аказ 696 ираж 4 одписн Типография, пр, Сапуно мочевина 0,5 биотин, мг/л 10 и вода, мл до 30002,25 л этой водной питательной среды наливают в пятилитровый бродильный чан. Среду регулируют на рН 7,0, затравляют и культивируют обычным способом при следующих условиях брожения: скорость аэрации 3000 мл/мин; скорость перемешивания 500 об/лшн; температура брожения 33 С; рН 6 - 9.Эти условия соблюдаются во всех следующих циклах брожения.Для затравки используют культуру М 1 сгососсцз д 1 ц 1 аппсцз АТСС 13031. После тото как начинается брожение, в питательную среду вводят следующие дополнительные вещества, изменяющиеся в зависимости от группы циклов брожения на 1, 3, 5, 7, 9 и 11 час брожения соответственно, Для контрольного брожения используют 3000 мл среды, содержащей только 13% осахаренной жидкости на основе редуцирующего сахара. Дополнительные компоненты в соответствующих количествах и результаты анализа У,-глутаминовой кислоты приведены в табл, 1 и 2.Из табл. 2 видно, что лучший результат по. лучен для группы циклов: А-З, Аи А, которые протекали при более высоком содержании биотина. Более того, эффект усилился после дооавления биотина через 3 или 5 час, что подтвердило выше предложенную теорию; микроорганизмы должны расти при условии субоптимального количества биотина, благоприятного для образования ферментной систе мы и вводимого при синтезе С-глутаминовойкислоты. 20 Способ получения Ь-глутаминовой и Е-пирролидонкарбоновой аминокислот путем культивирования их продуцента М 1 сгососсцз д 1 ц 1 ап 11 сцз на питательной среде, содержащей источник углевода, в присутствии необходимых 25 для роста минеральных солей и стимуляторароста, например биотина, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода и концентрации 1.-глутаминовой кислоты, в процессе выращивания продуцента в питательную среду до бавляют антибактериальный реагент, замедляющий рост продуцента, например хлористую ртуть, фенилацетатную ртуть, пенициллин.