Способ получения азотсодержащих веществ из микроорганизмов

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕНТУ Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимый от патентаЗаявлено 15.17,1967 ( 1149950/28-13)Приоритет 15.1 У.1966 (16536/66), АнглияОпубликовано 11,Х 1.1969. Бюллетень3Дата опубликования описания 13.17.190 ба,М 12 Комитет по делам изобретений и открыти при Совете Министров СССРДК 663.11:577.156.1 (088.8) Авторизобретения Иностранец Филипп Корти(Франция) Иностранная фи етролеум Комп3 аявител итиш СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ВЕЩЕС ИЗ МИКРООРГАНИЗМОВИзвестны способы получения азотссдержащих веществ, например протеинсодержащих, из микроорганизмов путем разрушения стенок клеток микроорганизмов.Предложенный способ позволяет более полно извлекать весь комплекс азотсодержащих веществ из микроорганизмов (дрожжи, плесень, бактерии), выращенных на углеводородных фракциях нефти путем разрушения клеточных стенок микроорганизмов,Для этого разрушение клеток ведут в две стадии:на первой воздействием на клетки протеолитическим ферментом, например пепсином, 15 трипсином, обладающим активностью к расщеплению связей между аминокислотами с последующим удалением или дезактивацией фермента промывкой водой, а на второй ферментом, например липазой, расщепляю щим углеводный комплекс клетки, например целлюлозу, маннан,После проведения каждой стадии обработанную биомассу (клетки микроорганизмов) разделяют, например, центрифугурованием на 25 две фракции: фракцию, содержащую микроорганизмы, и водную фракцию выделенных азотсодержащих веществ. Затем обе водные фракции азотсодержащих веществ объединяют и высушивают, например, на распылительной сушилке,П р и м е р 1. 25 кг водных дрожжей, содержащих 15 вес. % дрожжей вида СапдЫа 1 гортса 1 тз, выращенные на газойле, промывают неионогенным поверхностно-активным веществом, доводят до значения водородного показателя рН ,б путем добавления 2 н. раствора соды; добавляют 2 О г двунатрийфосфата (КаНРО 12 НвО) и 5,34 г лимонной кислоты (лимонная кислота 10 Н О), после чего доводят темперагуру реакционной смеси до 70 С. Затем добавляют 15 г папаина и 15 г цистеина в виде солянокислой соли, выдерживая при этой температуре 1 чпс, Материал центрифугируют, получают остаток и жидкий продукт; остаток промывают 8 л дистиллипованной воды и повторно центрифугируют. Полученный остаток переносят в 15 л дистиллированной воды, доводят рН до 5 путем добавления 2 и. раствора хлористоводородной кислоты; добавляют 130 г двунатрийфосфата (тчавНРО, 12 НвО) и 38,1 г (лпмонная кислота 10 Н,О); эту смесь нагревают до 40 С и выдерживают в течение 2 час в присутствии 25 г целлюлозы и 25 г липазы.Продукт центрифугируют и добавляют к жидкому продукту, полученному ранее центрифугированием, жидкую смесь вьтсчшивают257369 Предмет изобретения Составитель В, Дунье Текред Л. В, Куклина Корректор С. М, Сигал Редактор Э. Н, Шибаева Заказ 697/12 Тираж 480 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва Ж-З 5, Раушская наб., д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 в распылительной сушке. Получают 2,25 кг сухого продукта, содержащего 11 вес. /о азота.Пример 2. 10 кг водной суспензии хлебопекарных дрожжей, содержащих 15 вес. о/е сухого материала (Бассйаготпусез сегеу 1 з 1 а 1) доводят рН до 7,6 путем добавления 2 н. раствора соды; добавляют 3 л буферного раствора при значении рН 7,6 (390 мл 0,2 н, раствора мононатрийфосфата и 2610 мл 0,2 н. раствора двунатрийфосфата) и доводят температуру суспензии до 70 С. При достижении этой температуры добавляют 6 г фицина Шварца и 3 г хлористоводородного цистеина, Полученную смесь оставляют настаиваться один час,и после центрифугирования получают жидкий продукт и остаток. Зтот остаток промывают 3 л дистиллированной воды и повторно центрифугируют. Остаток переносят в 3,3 л воды и доводят смесь до заданного значения рН среды путем добавления 2 н, раствора хлористоводородной кислоты, полученную суспензию смешивают с 3,3 л буферного раствора, содержащего фосфат и лимонную кислоту, с таким расчетом, чтобы получить значение рН 5,0.Температуру доводят до 40 С, добавляют 15 г целлюлазы и 15 г липазы и выдержива. ют реакционную смесь в течение 2 час, Продукт центрифугируют, Жидкость добавляюг к жидкому продукту, полученному ранее центрифугированием. Смесь жидких продуктов высушивают в распылительной сушилке.Получают около 700 г сухого продукта, содержащего 10 вес. 7 о азота.5 Способ получения азотсодержащих веществиз микроорганизмов путем разрушения кле точных стенок микроорганизмов с помощьюпротеолитических ферментов и ферментов, разрушающих углеводные комплексы, отличающийся тем, что, с целью более полного извлечения азотсодержащих веществ, находя щихся в клетке, разрушение ведут в две стадии; на первой - путем воздействия на клетку протеолитическими ферментами, например пепсином, трипсином, папаином, обладающими активностью к расщеплению связей между 20 аминокислотами, с последующим удалениемили дезактивацией этих ферментов, например промыванием водой, а на второй - ферментом, например целлолозой расщепляющим углеводные комплексы клетки, например 25 комплексы, содержащие целлюлозу, маннан,при этом после второй стадии обработанный материал разделяют одним из известных способов, например, центрифугированием на две фракции: фракцию, содержащую микрооргаЗ 0 низмы, и фракцию выделенных азотсодержащих веществ.