Способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
203837 ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Сома Ссввтскик Социалистическил РеспубликКомитет по делам иаобрвтвиий и открытий при Совете Министров СССРАвторы изобретения Р, И. Татарская, А. А, Баев, Т. Н, Пахомова, В. М, Кочкина,В. Ж. Цыренов, В. Д, Аксельрод и А. И. Кореняко Институт молекулярной биологии АН СССРЗаявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОНУКЛЕОТИДОВ ИЗ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТЙзвестен способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот путем ферментативного гидролиза последних, проводимого обычно различными ферментами, например фосфодиэстеразой змеиного яда, и выделения полученных мононуклеотидов одним из известных способов, например хроматографией на ионообменных колонках.Для удешевления и упрощения процесса получения мононуклеотидов (фосфодиэстераза змеиного яда - дорогостоящий фермент) предложено ферментативпый гидролиз проводить с помощью фосфодиэстераз, выделяемых ак. тиномицетами в культуральную жидкость в хо. де ферментации,Способ заключается в следующем.На нуклеиновую кислоту, например рибонуклеиновую, действуют культуральной жидкостью актиномицетов фосфодиэстеразных штаммов, которую вносят либо непосредственно после выращивания, либо после некоторой обработки, В результате этого полинуклеотиды переходят в соответствующие мононуклеотиды, которые далее отделяют обычными способами, например хроматографией, на колонке.Количество побочных продуктов не нуклеотидной природы, получающихся на этом невелико.П р и м е р, Культуральную жидкость Ас 11 погпусез типа сое 11 со 1 ог штамм5, содержащую экзонуклеазу типа фосфодиэстеразы змеиного яда, т. е. фермент, дающий при гидролизе нуклеиновых кислот 5-мононуклеотиды, берут от зрелой (например девяти-десятидневной) культуры. 5 Кидкость освобождают от 5 мицелия, например, с помощью сепаратора иподкисляют соляной кислотой до рН около 3.После выдерживания на холоду при таком рН ь течение трех суток отстой сливают, декантацпей, а осадок, содержащий активный фер мент, растворяют в небольшом количестве воды при перемешивании и подщелачивании до рН около 9. К раствору добавляют хлористый магний до конечной концентрации 0,001 М и рпбонуклеиновую кислоту в виде аммониевой 15 или натриевой соли. После часовой инкубациипри 37 С и перемешивании реакция раствора доводится до нейтральной, и раствор для инактивацпп всех ферментов прогревают 10 - 15 мпн прп 60 - 70 С, Затем 5-мононуклеотиды 20 выделяют на понообменнпках типа дауэкс пли дауэксв ацетатной форме в растянутом градиенте уксусной кислоты (0,0 - 3 М). На колонке не задерживаются побочные продукты реакции - нуклеотиды и основания. Суммар.25 ное количество таких побочных продуктов со.ставляло в разных опытах от 6 до 10%.Остальной материал выходит при элюции в градиенте СН;СООН в виде нескольких пиков, каждый из которых соответствует опреде ленному 5-мононуклеотиду.203837 Предмет изобретения Составитель М. И, Андреева Редактор В. ф. Смирягина Техред 3. Н. Тараненко Корректор Р. И. КрючковаЗаказ 3221/4 Тираж 480 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква Ж-З 5, Раушская наб., д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 Способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот путем ферментативного гидролиза последних и выделения полученных мононуклеотидов одним из известных способов,например хроматографией на ионообменных колонках, отличающийся тем, что, с целью упрощения и удешевления процесса, ферментативный гидролиз проводят с помощью фосфо диэстераз, выделяемых актиномицетами вкультуральную жидкость в ходе ферментации.
СмотретьЗаявка
1102993
Р. И. ТатарскаА. А. Баев, Т. Н. Пахомова В. М. Кочкина, В. Ж. Цыренов, В. Д. Аксельрод, А. И. Корен, Институт молекул рной биологии СССР
МПК / Метки
МПК: C12P 19/32
Метки: кислот, мононуклеотидов, нуклеиновых
Опубликовано: 01.01.1967
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-203837-sposob-polucheniya-mononukleotidov-iz-nukleinovykh-kislot.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот</a>
Предыдущий патент: Устройство для обучения ходьбе
Следующий патент: Способ выведения фагоустойчивых мутантов актиномицетов
Случайный патент: Способ сжигания высококалорийного топлива в мартеновских печах