Способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот

ZIP архив

Текст

203837 ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Сома Ссввтскик Социалистическил РеспубликКомитет по делам иаобрвтвиий и открытий при Совете Министров СССРАвторы изобретения Р, И. Татарская, А. А, Баев, Т. Н, Пахомова, В. М, Кочкина,В. Ж. Цыренов, В. Д, Аксельрод и А. И. Кореняко Институт молекулярной биологии АН СССРЗаявитель СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОНУКЛЕОТИДОВ ИЗ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТЙзвестен способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот путем ферментативного гидролиза последних, проводимого обычно различными ферментами, например фосфодиэстеразой змеиного яда, и выделения полученных мононуклеотидов одним из известных способов, например хроматографией на ионообменных колонках.Для удешевления и упрощения процесса получения мононуклеотидов (фосфодиэстераза змеиного яда - дорогостоящий фермент) предложено ферментативпый гидролиз проводить с помощью фосфодиэстераз, выделяемых ак. тиномицетами в культуральную жидкость в хо. де ферментации,Способ заключается в следующем.На нуклеиновую кислоту, например рибонуклеиновую, действуют культуральной жидкостью актиномицетов фосфодиэстеразных штаммов, которую вносят либо непосредственно после выращивания, либо после некоторой обработки, В результате этого полинуклеотиды переходят в соответствующие мононуклеотиды, которые далее отделяют обычными способами, например хроматографией, на колонке.Количество побочных продуктов не нуклеотидной природы, получающихся на этом невелико.П р и м е р, Культуральную жидкость Ас 11 погпусез типа сое 11 со 1 ог штамм5, содержащую экзонуклеазу типа фосфодиэстеразы змеиного яда, т. е. фермент, дающий при гидролизе нуклеиновых кислот 5-мононуклеотиды, берут от зрелой (например девяти-десятидневной) культуры. 5 Кидкость освобождают от 5 мицелия, например, с помощью сепаратора иподкисляют соляной кислотой до рН около 3.После выдерживания на холоду при таком рН ь течение трех суток отстой сливают, декантацпей, а осадок, содержащий активный фер мент, растворяют в небольшом количестве воды при перемешивании и подщелачивании до рН около 9. К раствору добавляют хлористый магний до конечной концентрации 0,001 М и рпбонуклеиновую кислоту в виде аммониевой 15 или натриевой соли. После часовой инкубациипри 37 С и перемешивании реакция раствора доводится до нейтральной, и раствор для инактивацпп всех ферментов прогревают 10 - 15 мпн прп 60 - 70 С, Затем 5-мононуклеотиды 20 выделяют на понообменнпках типа дауэкс пли дауэксв ацетатной форме в растянутом градиенте уксусной кислоты (0,0 - 3 М). На колонке не задерживаются побочные продукты реакции - нуклеотиды и основания. Суммар.25 ное количество таких побочных продуктов со.ставляло в разных опытах от 6 до 10%.Остальной материал выходит при элюции в градиенте СН;СООН в виде нескольких пиков, каждый из которых соответствует опреде ленному 5-мононуклеотиду.203837 Предмет изобретения Составитель М. И, Андреева Редактор В. ф. Смирягина Техред 3. Н. Тараненко Корректор Р. И. КрючковаЗаказ 3221/4 Тираж 480 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква Ж-З 5, Раушская наб., д, 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 Способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот путем ферментативного гидролиза последних и выделения полученных мононуклеотидов одним из известных способов,например хроматографией на ионообменных колонках, отличающийся тем, что, с целью упрощения и удешевления процесса, ферментативный гидролиз проводят с помощью фосфо диэстераз, выделяемых актиномицетами вкультуральную жидкость в ходе ферментации.

Смотреть

Заявка

1102993

Р. И. ТатарскаА. А. Баев, Т. Н. Пахомова В. М. Кочкина, В. Ж. Цыренов, В. Д. Аксельрод, А. И. Корен, Институт молекул рной биологии СССР

МПК / Метки

МПК: C12P 19/32

Метки: кислот, мононуклеотидов, нуклеиновых

Опубликовано: 01.01.1967

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-203837-sposob-polucheniya-mononukleotidov-iz-nukleinovykh-kislot.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения мононуклеотидов из нуклеиновых кислот</a>

Похожие патенты