Способ получения гуанозина-с14

189865 Союз Советских Социалистических РеспубликЗависимое от авт. свидетельстваЗаявлено 26 Л.1966 ( 1051465/23-4)с присоединением заявкиГ 1 риоритетОпубликовано 16.Х 11.1966 Бюллетень1 1;л, 12 р, 7/10 МПК С 070УД К 547.877.7.07 Комитет оо делам каооретеиий и открытийЗаявитель Государственный ордена Трудового Красного Знамени институт прикладной химииСПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГУАНОЗИНА-С 14 Известно получение гуанозина последовательной обработкой 2,6-диаминопурина уксусным ангидридом при кипячении, спиртовым раствором хлористой ртути, раствором галогенозы в ксилоле при кипячении, аммиаком, уксусной кислотой, нитратом натрия и метанольным раствором метилата натрия.С целью расширения сырьевой базы и упрощения технологического процесса, предложено в качестве производного пурина применять гуанин-Ст 4. Способ состоит в том, что гуанин-Ст 4 кипятят с уксусным ангидридом, обрабатывают спиртовым раствором хлористой ртути, раствором галогенозы в ксилоле при кипячении и метанольным раствором метилата натрия.П р и м е р, Смесь измельченного до пудры гуанина-Сто (3,1 г с удельной активностью 0,92 лкюри/г, общая активность 2,8 лтк) и свежеперегнанного уксусного ангидрида (17 лтл) кипятят с обратным холодильником 4 час на металлической бане (сплав Вуда), нагретой до 145 - 150 С. Охлажденную до комнатной температуры суспензию фильтруют, осадок ацетилгуанина-Ст 4 промывают эфиром (200 лтл). Получают 4,2 г неочищенного продукта.Для очистки смесь ацетилгуанина-Ст 4 (л.2 г), воды (630 лтл) и угля БАУ (0,420 г) кипятят в течение 15 мин, горячий раствор фильтруют и оставляют на ночь в холодильнике, Кристаллы отделяют фильтрованием, промывают спиртом (5 ттл), затем эфиром (15 лтл) и высушивают при 35 - 40 С до постоянного веса. Вес продукта 1,69 г (43% от теоретического количества, в расчете на гуапин-Сто). Удельная активность 0,65 лк/г,Из маточных растворов выделяют дополнительно 0,675 г ацетилгуанина-Ст 4 с удельной активностью 0,65 лтк/г. Таким образом выход 10 продукта возрастает до 60% .Ацетилгуапин-Стф (2,02 г с удельной активностью 0,65 лткюри/г, общяя активность 1,31 лткюри) растворяют в 50%-ном водном этаполе (300 лтл) при кипячении смеси с обратным холодильником. В кипящую смесь вносят водный растворщелочи (0,42 г МаОН в 10 лтл воды) и сразу добавляют спиртовый раствор сулемы (2,84 г НдС 1 е в 10 лл абсолютного спирта).Навески щелочи и сулемы смывают водой испиртом, соответственно (по 5 - 10 лтл). Полученную смесь кипятят 5 - б,ттин, оставляют в бане со льдом на 2 час, затем осадок ртутной соли отделяют фильтрованием и промывают спиртом (25 лл) и эфиром (25 лтл), Соль, высушенная при 35 - 40 С, весит 4,33 г. Выход 96,5 % от теоретического количества в расчете па ацетилгуанин-Стт, Содержание азота в со ли 16,1%.3Вычислено для СтН,ОЮ, НдС 1.М 16 35 о/,Ртутную соль (2,92 г), предварительно измельченную до пудры, смешивают со свежеперегнанным ксилолом (100 лл) и подвергают азеотропной сушке, отбирая 40 лгл ксилола,К кипящей суспензии в течение 10 лия приливают раствор галогенозы (3,12 г) в ксилоле (20 мл). Капельную воронку промывают ксилолом (48 мл), который присоединяют к реакционной массе. В процессе загрузки раствора галогенозы азеотропную сушку смеси продолжают, отбирая еще 44 лл ксилола, Смесь кипятят с обратным холодильником без доступа влаги при энергичном перемешивании на бане со сплщюм Вуда (150 - 160 С) в течение 1,5 час; Затем рефкионную смесь охлаждают на бане со лдом; добавляют к раствору петролейного эфира (350 лл, фракция 70 - 100 С) и оставляют на ночь. Продукт конденсации отделяют фильтрованием, промывают петролейным эфиром (30 лл) и высушивают при 35 - 40 С. Вес кристаллов 4;69 г. Выход неочищенного продукта практически количественный,Для очистки продукт конденсации (4,69 г) экстрагируют хлороформом (200 мл) при нагревании до 50 С. Экстракт фильтруют, прозрачный раствор упаривают в вакууме, на водяной бане при 35 - 40 С досуха. Вес остатка 3,17 г (74% ат теоретического количества, в расчете на ртутную соль).Продукт конденсации (3 г) растворяют в абсолютном метаноле (100 мл). К однородному прозрачному раствору приливают метанольный раствор метилата натрия (1,15 г Ма в 75 мл абсолютного метилового спирта). 189865 Смесь нагревают па водяной бане (80 - 85 С) без доступа влаги в течение 1 час, За.тем баню убирают, к смеси приливают 175 мл горячей воды и продолжают. кипятить на закрытой плитке 45 мин, Горячий раствор фильтруют, прозрачный фильтрат нейтрализуют ледяной уксусной кислотой до рН 6 - 7.В нейтральном рабочем растворе определяют гуанозин. Содержание гуанозина-С 14 (по 10 анализу) колеблется от 280 до 580 мг. Выходсоставляет 10 - 27% от теоретического количества, в расчете на ртутную соль.Высокоактивный продукт выделяют без носителя путем кристаллизации и перекристал лизации из воды, Остаток активного продуктавыделяют на носителях (3 раза).Общий радиохимический выход гуанозина 8-С 14 равен химическому и составляет 10 - 27%, в расчете на ртутную соль, Продукт хро матографически однороден. Радиохимическаячистота гуанозина-С 14 )98 /о.Значение коэффициента молярной экстинкции при Л , равно 254 - 257 ммк, в растворе 0,1 н. НС 1; е = 11 5. 10 з - 12 5. 10 з25Пр едм ет изобретенияСпособ получения гуанозина-С 14 путем последовательной обработки производного пури на уксусным ангидридом при кипячении, спиртовым раствором хлористой ртути, раствором галогенозы в ксилоле при кипячении и метанольным раствором метилата натрия, отличающийся тем, что, с целью расширения сырь евой базы и упрощения технологического процесса, в качестве производного пурина применяют гуанин-С 14.Составч 1 ель Н. Филиппова Редактор Л. Г. Герасимова Техред Т, П. Курилко Корректоры; С. М. Белугина и С. Н. Соколова Заказ 4202/12 Тираж 535 Подписное ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР Москва, Центр, пр. Серова, д, 4 Типография, пр. Сапунова, 2