Способ стабилизации донорской крови

СОЮЗ .СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИ 170834 РЕСПУБЛИК 35/14, 6 01 И 33748 5 А ЗОБ ЛЪСТВУ ОПИСАНИ ТЕНИ МУ СВ К АВТ/14 ститут ги- эаболеваГ.И.Мам-. рЬуахз Ьу , - Сапсег ДОНОРдицине, ка етения яв ГОСУДАРСТВЕН% И КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР.(56) Оазтраг Н. Метазтазз рграсеет аддгедабоп пЫЫогСапрадЬ, й 4. 1980, р,321-331(57) Изобретение относится к мсается гематологии. Целью изоб Изобретение относится к медицине, ка-, . сается гематологии.Цель изобретения - снижение активации тромбоцитов и лейкоцитов в цитратной донорской крови.Способ осуществляют следующим образом.В свежей цитратной крови в стерильных условиях подсчитывают исходное количество тромбоцитов и гранулоцитов с помощью счетной камеры Горяева и определяют содержание фибронектина турбидиметрическим или другимиметодами.Затем кровь пропускают через колонку с силикагель-желатином, уравновешенным физиологическим раствором; на 1 объем сорбента 5 объемов крови. Первые. неокрашенные кровью порции; вытекающие из коляется снижение активации тромбоцитов и лейкоцитов, Для этого определяют концентрацию фибронектина и функциональную активность тромбоцитов и гранулоцитов в цитратной крови, затем пропускают ее через сорбент силикагель-желатин, который избирательно связывает фибронектин, и повторно определяют концентрацию фибронектина и Функциональную активность тромбоцитов и гранулоцитов в прошедшей через сорбент крови, Функциональная активность тромбоцитов, прошедших через сорбент, снижается при этом в 3 раза по сравнению с исходными, а гранулоцитов - в 15 раэ. 1 табл. лонки, отбрасывают. После того, как верх- С) няя поверхность крови сравняется с верх-0 р ней поверхностью сорбента, в колонку подают стерильный. физиологический рас- р твор в количестве, достаточном для вытеснения крови из колонки, В прошедшей через колонку крови снова определяют количество фибронектина, тромбоцитов и гранулоцитов. Образцы такой крови, а прошедшей через колонку с силикагель-желатином, теряют около 70 биологически активного фибронектина. Полного удаления фибронектина из донорской крови не происходит в силу того, что всегда присутствующие предактивированные тромбоциты и гранулоциты адгезируются на сорбенте и подвергаются разрушению, а образующиеся комплексы Фибронектина с ДНК, гепаран1708347 Кол-во получе- нного Уровень актива. Уровегть активации тромбоц- ции транулоци.тов Концентрацияфибрбнектина,мт/ Количество ис- следуеКонцентрация гранулоцитов Концентрация тромбоцитов фибронв, мт После ПослеДо ко. он- ленкиДо коПослеколонДо колонки и о йкрови,После колонки До колонки После колонки До колонки зв 4,1 4.О 1,3 1/ли 1 О,Ь 1.б овал% то 2 Я 10 /л 3,4 1 Ов/л.3,1 Ювй 3 О Юй 281 О"А 3 33 1 ОвУ 3 Е гО гл 41 1 ОвГл 39 1 О /л го гб Составитель Н,МарковаТехред М;Моргентал Корректор Н,Ревская Редакто Т.Лазаренко Заказ 378 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород,.ул.Гагарина, 101 сульфатом и другими компонентами клеток не удерживаются сорбентом.Для определения функциональной активности тромбоцитов и гранулоцитов из крови до и после фильтрации через колонку с силикагель-желатином их выделяют центрифугированием в градиенте плотности фиколла. Функциональную активность тромбоцитов оценивают общепринятым методом измерения агрегации по светопропусканию после добавления АДФ или арахидоновой кислоты. Уровень активации гранулоцитов определяют по люминол-за висимой хемилюминесцвнции в ответ на действие зимозана, Тромбоциты, прошедшие через силикагель-желатин, имеют снижение активации в 3 раза по сравнению с исходными, а гранулоциты - в 15 раз,Результаты исследования представлены в таблицеЦельную цитратную кооовь с концентрацией тромбоцитов 40 10 /л, гранулоцитов 3,2 109/л: и фибронектина 360 мг/л в обът еме 15 мл наносят на колонку размером 1,2 х 9,0 см, содержащую 3 мл силикагель-желатина. После смешивания крови с сорбентом подают стерильный физиологический раствор и вытесняют оставшуюся в нем часть крови, В прошедшей через колонку крови (объем 25 мл) концентрация тромбоцитов была 29 109/л, гранулоцитов 1,5 х 4х 10 /л, фибронектина 70 мг/; Уровень акти 9вации тромбоцитов крови, прошедшей через силикагель-желатин, составил 40 поотношению к 100 исходной крови, Уро 5 вень активации гранулоцитов после колонки 7 фЯ, до - 100,Элюцию фибронектина с колонки осуществляют 0,05 М цитратным буфером, рН5,5 при 37 оС,Концентрация фибронектина10 в крови до фильтрации через силикагель-желатин составляет 360 мг/л, после фильтрации - 70 мг/л. Количество фибронектина,снятого с сорбента, составляет 4 мг, что со- .ответствует 74 по отношению к содержа 15 нию его в исходной порции крови.Предлагаемый способ позволяет снизить спонтанную активацию тромбоцитов игранулоцитов в стабилизированной цитратной донорской крови путем избирательного20 удаления фибронектина из нее, что можетбыть использовано при переливании крови,экстракорпоральном кровообращении и гемаферезе,Формула изобретения25 Способ стабилизации донорской кровипутем ее заготовки на цитратных гемоконсервантах, отличающийся тем,что,сцелью снижения активации тромбоцитов игранулоцитов, ее дополнительно фильтруют30 через сорбент желатин-силикагель при соотношении сорбент:кровь 1:5.