Способ очистки 4ъ-эпидоксорубицина

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИК АЗ 1440350 бд) 4 С 07 Н 15/2 ОПИСАНК ПАТЕНТУ ОБРЕТЕНИЯ ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(71) фармиталия Карло Эрба С.п.А. (1 Т)(72) Эрнесто Оппичи, Карло Варесиои Онорино Джиакома Роза (1 Т)( зобретение касается производныхидов, в частности 4 -эпидоксона, используемого в медицинеимии. Процесс ведут из сырогодоксорубицина, 0,37.-ный водный раствор которого обрабатывают муравьинокислым натрием до рН 4,8 и адсорбируют на колонке 400 мл со смолой Амберлит УКС, затем промываютводой и элюируют смесью СНОН-НО-НС 1(39, 11 об.Х) при объемном соотношении99:5:0,015 с доведением рН у выделенного элюта (с НСООЯа) до 4,8. Реадсорбцию ведут на колонке 250 мл сосмолой карбоксиметилцеллюлоэы, промывают смесью СНЕОН-НО-НС 1 (объемное соотношение 90:10:0,05) с последующим концентрированием элюата ввакууме и осаждением целевого продукта с помощью ацетона. Получают продукт с выходом до 55,3 Х, содержаниемпримесей ЗХ и титром 91,2 Ж, что свидетельствует о высокой чистоте целевого 4 -эпидоксорубицина.2Получают 6,9 г 4 -эпидоксорубицина с титром 91,2 . и содержанием примесей З . Выход составляет 55,3 ,1440350 формула изобретения Составитель И,федосееваТехред И,Дидык Корректор Э,ЛончаковаВ. Редактор С.Патрушева Заказ 6092/58 Тираж 348ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж,Раушская наб д, 4/5 Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул, Проектная, 4 Изобретение относится к способу очистки антрациклиновых гликозидова именно 4 -эпидоксорубицина, селективной адсорбцией на смолах.Цель изобретения - улучшение способа очистки, которое дает возможность получить чистый целевой продукт.П р и м е р. Очистка 4 -эпидоксорубицина.15,0 г сырого 4 -эпидоксорубицина, имеющего титр 75,9% и 15 . примесей, растворяют в 4000 мл воды.Раствор, рй которого доводят до 5 4,8 с помощью добавления формиата натрия,адсорбируют на 400 мЛ смолы лмберлит 1 РС 724 в колонке диаметром 2,5 см, при скорости потока 1600 мл/ч.Колонку промывают 800 мл воды и 20 затем элюируют смесью метанола 95, воды 5 и концентрированной соляной кислоты 0,015, 6=1,20. Отбирают 4000 мл средней фракции элюата с 4 -эпидоксорубицином,содержащего еше 25 10% примесей, а также 1500 мл конечной фракции элюата с превалйрующим содержанием примесей.Среднюю фракцию элюата койцентри- руют до 1500 мл, доводят до рН 4,8 30 добавлением формиата натрия и адсорбируют на 250 мл смолы Карбоксиметилцеллюлоза (К) ЧаЬшап, в колонке диаметром 2,5 см, при скорости потока 500 мл/ч.35После завершения адсорбции продукт промывают смесью этанола 99,3, воды О, 7 и концентрированной соляной кислоты 0,015 и затем элюируют смесью этанола 90, воды 10 и концентрированной соляной кислоты 0,05, отбирая 3200 мл средней фракции элюата.Элюат концентрируют в вакууме до 60 мл и затем продукт осаждают добав" лением 300 мл ацетона. 45 1 В хроматографическом способе очистки применяются адсорбирующие смолы полимерного и ионнообменного типа или карбоксиметил целлюлозного типа; точный выбор, подходящая последовательность в использовании различных типов смол в соответствии с очищаемым сырьевым продуктом, слегка кислые условия в течении адсорбции позволяют получить высокую степень чистоты целевого продукта, устраняет использование хлорированных органических растворителей и дает высокие выходы продукта во время очистки. Способ очистки 4 "эпидоксорубицина, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, О,ЗХ-ный водный раствор сырого 4 -эпидоксорубицина доводят с помощью муравьинокислого натрия до рН 4,8 и адсорбируют на колонке 400 мл со смолой Амберлит 1 КС 724, затем промывают водой и элюируют смесью метанол-вода-хлористоводородная кислота 39,11 об.при соотношеннии 95;5;0,015 об/об, собранный элюат доводят до рН 4,8 добавлением муравьинокислого натрия, реадсорбируют на колонке 250 мл со смолой карбоксиметилцеллюлозы (К), промывают смесью этанол-вода-хлористоводородная кислота при соотношении 99, 3:О, 7;0,015 об. /об, с последующим элюированием смесью зтанол-вода-хлористоводородная кислота при соотношении 90:10;О, 05 об/об, концентрирование элюата в вакууме и осаждают целевой 4 -эпидоксорубицнн,