Способ определения аскорбиновой кислоты в лейкоцитах

Номер патента: 1282371

Авторы: Карлсон, Райпулис, Скардс, Цауне

ZIP архив

Текст

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН 1282371 А 4 С 01 Н 33/48 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ 3ФУ КОМУ СОИ ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АСКОРБИНОВОИ КИСЛОТЫ В ЛЕИКОЦИТАХ(57) Изобретение относится к медицине, а именно к аналитической биохимии. Цель изобретения - упрощение способа путем исключения дополнительной очистки метанольного экстракта хроматографическим способом. Для этого исследуемую пробу обрабатывают 603-ным раствором метанола, добавляют этилендиаминтетрацетат в концентрации 0,15-0,40 мг/мл и разделяют метанольный экстракт на две пробы, одну из которых доводят до рН 3,2-3,3, а другую - до рН 7,8- 8,0. Затем спектрофотометрируют одну по отношению к другой при длинах волн 240 и 270 нм соответственно и по разнице оптических плотностей определяют концентрацию аскорбиновой кислоты.Заказ 7291/60 Тираж 776 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раущская наб., д.4/5Производственно-полиграФическое предприятие, г.ужгород, ул. Проектная,4 Изобретение относится к медицине, а именно к аналитической биохимии.Цель изобретения - упрощение способа за счет устранения дополнительной очистки метанольного экстракта.Способ осуществляют следующим образом.Пробу обрабатывают 607-ным раствором метанола, добавляют этилендиаминтетраацетат (ЭДТА ) в концентрации 0,15-0,40 мг на мг лейкоцитов и разделяют метанольный экстракт на две пробы, одну иэ которых доводят до рН 3,2-3,3, а другую - до рН 7,8- 8,0, затем спектроФотометрируют одну по отношению к другой при длинах волн 240 и 270 нм соответственно и по разнице оптических плотностей определяют концентрацию аскорбиновой кислоты.П р и м е р К 5 мг выделенных сырых лейкоцитов добавляют 4 мл 602-ного метанола, содержащего 0,01 мл 1 Е-ной соляной кислоты и 0,15-0,40 мг на мг лейкоцитов ЭДТА, взбалтывают и центрифугируют. Определяют верхний жидкий прозрачный 1слой и разделяют на две пробы, К одной пробе добавляют 0,02 мл У.-ного раствора соляной кислоты до рН 3,2, а к другой добавляют 0,02 мл 17-ный раствор едкого натра для доведения до рН = 7,8. Образцы помещают в кюветы толщиной 1 см и спектрофотометрируют одну к другой . в диапазоне 220-290 нм. Потом измеряют оптическую плотность при длинах волн 240 и 270 нм, определяют их 2371 2разницу, которая составляет 0,0243.Стандартный раствор аскорбиновой кислоты 0,01 мг/мл при рН 3,2-3,3 и7,8-8,0 и длинах волн 240 и 270 нмдает разницу оптической плотности0,97. Содержание аскорбиновой кисло.ты в данном образце 20,04 мг/100 глейкоцитов. О Использование предлагаемого способа определения аскорбиновой кислоты в лейкоцитах йо сравнению с известным упрощает определение, так какисключается очистка экстракта хрома тограФическим способом. Время анализа 30 мин (по известному 90 мин) . Ф о р м у л а изобретения 20 . Способ определения аскорбиновойкислоты в лейкоцитах, путем экстрагирования метанолом с последующимФотометрированием, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа эа счет устранения дополнительной очистки метанольногоэкстракта; в метанол добавляют этилендиаминтетраацетат в концентрации0,15-0,40 мг на мг лейкоцитов мета нольный экстракт разделяют на двепробы, рН одной пробы доводятдо 3,2-3,3, рН другой пробы - до7,8-8,0 и проводят спектрофотометрирование одной пробы против другой 35 при 240 и 270 нм и по разнице оптических плотностей при 240 и 270 нмопределяют концентрацию аскорбиновойкислоты.

Смотреть

Заявка

3859397, 29.11.1984

ЛАТВИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. П. СТУЧКИ

КАРЛСОН ИЛГА МАРТЫНОВНА, СКАРДС ИЛМАРС ВИЛЬЕВИЧ, РАЙПУЛИС ЕКАБ ПАУЛЕВИЧ, ЦАУНЕ ПЕТЕРИС СТАНИСЛАВОВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: аскорбиновой, кислоты, лейкоцитах

Опубликовано: 07.01.1987

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1282371-sposob-opredeleniya-askorbinovojj-kisloty-v-lejjkocitakh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения аскорбиновой кислоты в лейкоцитах</a>

Похожие патенты