Способ разделения мононуклеарных фагоцитов на субпопуляции

Номер патента: 1179223

Авторы: Земсков, Макаренко, Пантин, Родионов

ZIP архив

Текст

(51)4 С 01 И 33 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИ ОБРЕТЕНИ ЕТЕЛЬСТВУ(21 (22 (46 (72 38 54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОНО.УКЛЕЛРНЫХ ФЛГОЦИТОВ НА СУБПОПУЛЯПИСАНИЕ АВТОРСМОМУ СВ(56) Сец 1 аг 1 пппопо)оиру. ч.1978, р. 94-104. ЦИИ путем фракционирования исходной суспензии клеток, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа, клетки последовательно инкубируют в градиенте температуры 4-37 С на полистироловых чапоках, предварительно обработанных 0,257.-ной фетальной телячьей сывороткой, и субпоиуляции мононуклеарных фагоцитов получают в виде монослоя.Заказ 56 бб/45 Тираж 897 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Филиал ППП "Патент", гУжгород, ул. Проектная, 4 1Изобретение относится к иммугсологии и цитологии,Цель изобретения - упрощение способа.П р и м е р. Разделение резидентных перитонеальных макрофагов.Получают суспензию клеток перитонеального эксудата.от 30-35 интактных мышей самцов линии Г,СЙАхСС 57 В) весов 20-25 г, На культуральных чашках из полистирола,предварительно пбкрытых 0,253-нойфетальной телячьей сывороткой (ФТС),производят адгеэию полученных клеток в культуральной среде 199 с0,253-ной ФТС и 20 мМ ИЕРЕ-буферапри рН б,9 прн температуре 4 оС в течени 1 ч. Затем неприлипшие клетки переносят на другие чашки дляоадгеэии при 1 О С в течение 1 ч. Далее суспензию клеток, неприлипших0при 10 С, переносят на новые чашки,и проводят адгезию при 28 С 1 ч.1На последнем этапе неприлипшие прио о28 С клетки инкубируют при 37 С 1 ч,добавляя в среду ФТС до 103 конечной концентрации. Все полученные в1 виде монослоев субпопуляции тщательно отмывают для удаления лимфоцитов,Для определения активности ферментов клетки лизируют дистиллированной 5 водой путем трехкратной процедурызамораживания-оттаивания. Для каждойиэ субпопуляций перитонеальных макрофагов определяют следующие показатели: число клеток, активность лак 0 татдегидрогеназы, одного из ключевыхферментов гликолиза, активность цитохромоксидазы, ключевого ферментаокислительного фосфорилирования,активность оргинаэы, ключевого фер мента цикла мочевины и одного из основных ферментов катаболиэма аминокислот, а также уровень Гс рецепторов, являющихся ключевыми структурами для осуществления макрофагами фа гоцитарного процесса, медиированиянеспецифических и специфических иммунологических реакций.Каждая иэ полученных субпопуляций перитонеальных макрофагов харак" 25 теризуется своими отличительнымисвойствами, различия между субпопуляциями носят достоверный характер,

Смотреть

Заявка

3622962, 14.07.1983

РОДИОНОВ СЕРГЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ, ПАНТИН ВЛАДИМИР ИГОРЕВИЧ, МАКАРЕНКО ИРИНА ГРИГОРЬЕВНА, ЗЕМСКОВ ВЛАДИМИР МИХАЙЛОВИЧ

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: мононуклеарных, разделения, субпопуляции, фагоцитов

Опубликовано: 15.09.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1179223-sposob-razdeleniya-mononuklearnykh-fagocitov-na-subpopulyacii.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ разделения мононуклеарных фагоцитов на субпопуляции</a>

Похожие патенты