Способ получения трипептидамидов

ОЙ ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК ПАТЕНТУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик(33) ВНРо 3009.82. Бюллетеньования описания 30.09.82 03/5297/02 0 6 Государ по дел твенный комитетСССРам изобретенийоткрытий 53) УДК 547.964.Опубл икова Дата опуб Иностранцы Лайош Кишфалуди, Тамаш Сиртеш, Лайош Б Ева Палоши, Ласло Шкворни и Адам Шаркадиредприятие есети Дьяр анное он Ве (ВНР 1) Заявитель 154) СП ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПЕПТИДАМИДО А т вопеколил ащивают мида ами 0 где т и А имеют указанные значения, с аминокислотами, их производными или соответствующим дипептидом методом пентафторфениловых эфиров или азидным методом и, в случае использования глутаминовой кислоты, циклизации последней в пироглутамин с последующим снятием защитных групп.В приведенных примерах использованы следующие сокращения:Айа - Ь-.аминодекановая кита;АЬц - Ь-аминомасляная кислота;СЬа - Ь-циклогексил-алании;Пора - диоксифенилаланин;Р 1 р - Ь-пипеколиновая кислота;го - Ь-гомопролин; 15 20 слооНР Изобретение относится к способ олучения трипептидамидов - новых иологически активных соединений, оторые могут найти применение в медицине.В пептидной химии широко используют ступенчатый способ получения пептидов путем нараживания цепи с ,С-конца исходной аминокислоты с применением активированных производных 1 аминокислот, например, пентафторфениловых эфиров 11.Использование известных методов позволяет получить новые соединения, обладающие интересными фармакологическими свойствами.Цель изобретения - получение новых трипептидамидов, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.Поставленная цель достигается способом получения трипептидамидов общей Формулы 1С 1 р-Х-У-ИН-А 11) где Х - 1.еН, 1) - 1.еы, п 1 ец,уа 1,пуа 1, ТЬг, Рго,Ьаминбутирил, Ь-а-аминодеканоич, 1,-циклогексилаланил,1.-Н-трет-бутилсерил: т - Рго;А - водород, А 1 Х (С -)3)2, (С Ъ) фпри условии, если Х - Ьец, тимеет значение, отличающеесядорода,или Х - Н 1 з, У - НРго,1) - пзаключающийся в том, что нарпептидную цепь, начиная с анокислоты общей формулы )1У - ЯН - А,ло растворяют н 50 мп воды, рН значение раствора устананливают 10 путем добавления тнердого карбоната натрия, защищенный дипептид экстрагируют из водной Фазы этилацетатом, Этилацетатную фазу отделяют, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло в течение часа обрабатывают 5 н. раствором со-" ляной кислоты в этилацетате, реакционную смесь упаривают и остаток рас тирают с эфиром. После отфильтровынания аморфный, сильно гигроскопичный продукт сушат в вакууме над безводным едким натром. Получают 4,5 г Н-Ьец-Рто-ИН-СН СН-Х(СН)2 НС 1, 15 й =У3-я .стадия: Ь-пироглутамил, - -лейцил-Ь-пролин-(2-диметиламиноэтил)-амид. Раствор 2,6 г (7 ммоль) Н-Ьец-Рго-ИН-СН СН -И(СН) .2 НС 1 растворяют в 30 мл диметилформамида, смешивают с 1,86 мл (14 ммоль) триэтиламина. Выпавший в осадок продукт от фильтровывают и маточник по каплям ;прибавляют при перемешинании к охлаждаемому льдом раствору 3,29 г ,(7,7 ммоль) 2-С 1 р-ОРГР в 10 мл диметилформамида, По окончании добавле- З 0 ния реакционную смесь оставляют на 4 ч и затем упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют в 50 мл воды, раствор с помощью концентрированной соляной кислоты подкисз 5 ляют до рН = 3 и трижды промывают в делительной воронке 20 мл этилацетата. Затем значение рН водного раствора путем добавления твердого карбоната натрия устанавливают на 10 и щелочной раствор экстрагируют этилацетатом (530 мл). Органические фазы объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученный маслообраэный защищенный дипептид (3,05 г, 5,6 ммоль) растворяют в 45 60 мп воды, раствор смешивают с 5,6 мл 1 н. раствора соляной кислоты и 0,6 г 10-ного катализатора палладий/активированный уголь и через смесь в течение 30 мин пропускают 50 газообразный водород. После отфильтровынания катализатора Фильтрат упаривают,полученное в остатке масло растворяют в смеси иэ 50 мл хлоро,форма и 20 мл 1 н. раствора бикарбо ната натрия. Фазы разделяют, хлороФорменный слой сушат над безводным сульфатом натрия и фильтруют. Полученный аморфный сырой продукт (2,0 г) растворяют в воде, раствор обрабатывают активированным углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют. Получают ,72 г Г 1 р-Ьец-Рго-ИНСН СНЧ(СН(60 от теоретического), К = 0,06, 5 Я,"=-71,70 (с=.1, и уксусной кислоте),Ами иоки слотный анали з: 61 ц 1, 0 2(1,0),П р и м е р 15. Амид 1,-пироглутамил-Ь-гистидил-П-пипеколиноной кислоты,1-я стадия: амид бензилоксикарбонил-В-пипеколиновой кислоты,Раствор 13,15 г (50 ммоль) 2-Р-Р 1 р-ОН в 100 мл этилацетата смешивают с 7,0 мл (50 ммоль) триэтиламина. Смесь охлаждают до -20 С и приэтой температуре при перемешивании кней по каплям добавляют 6,5 мл(50 ммоль) иэобутилрвого эфира хлоругольной кислоты. После 15 мин перемешинания при -10 С в смесь в течениеполутора часов пропускают газообразный аммиак. Осадок отфильтровывают,маточник промывают в делительной воронке 1 н. растнором соляной кислоты, затем 1 н. раствором бикарбоната натрия и, наконец, водой, сушатнад безводным сульфатом натрия иупаривают. Остаток кристаллиэуютиз смеси этилацетата и эфира, по-,лучают 11,5 г 2-1)-Р 1 р-Я 1 (88 оттеоретического), т,пл.114-115 С,К= 0,50 Я 3 =+32,0 (с=1, в уксусной кислоте).Вычислено,:И 10,68.ка 11 чО, аНайдено,:, И 10,63Мол. вес 262,30,2-я стадия: 11-пипеколиновой кислоты амид,Раствор 3,93 г (15 ммоль) 2-Р 1 р-%1 в 75 мл метанола смешивают с0,5 г 10-ного катализатора палладий/активированный уголь и черезсмесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают. Маточник упаривают иостаток растирают с эфиром. Получают1,70 г Н-Р 1 р-ИН (90 от теоретического), т.пл.161-163 С ,В =0,10,ГЮ 7 +31,0 (с=1, в метаноле) .3-я стадия: бензилоксикарбонил-Ь-глутаминил.-гистидин-гидразид.71,0 г (0,165 моль) 2-Г 1 П-Н 1 з -ОМерастворяют н 700 мл диметилформамидаи раствор смешивают с 33,6 мл(0,495 моль) гидразингидрата, Реакционную. смесь оставляют на 3 дня,затем разбавляют 600 мл этилацетатаи ночь выдерживают в холодильнике.На следующий день осадок отфильтровывают. Полученный. сырой продукт65 Мол. вес 431.,40.4-я стадия: амид бензилоксикарбонил-Ь-глу тами нил-Ь-гистидил-Ь-пипеколиновой кислоты.Счспензию 5; 39 г (12,5 ммоль) 2-61 п-Н 1 з-ЫН в 100 мл диметил) .Формамида смешивают с 4,6 мл (37,5 ммоль) 8,1 н, раствора соляной кислоты в диоксане. Полученный раствор охлаждают до -20 фС, температуру поднимают до -15 С, при перемешива- О нии по каплям добавляют к нему 1,63 мл (13,7 ммоль) трет-бутилнитрила. Реакционную смесь перемешивают при -10 С в течение 20 мин, затем по каплям к смеси добавляют 3,5 мл 15 (25 ммоль) три=тиламина, раствор 1,57 г (12,5 ммоль) Н-П-Р 1 р-ИН и, наконец, еще 1,75 мл (12,5 ммоль) триэтиламина. Затем реакционнуюО смесь перемешивают при -10 С в течение часа и оставляют на ночь в холодильнике при 2 С, На следующий день осадок отфильтровывают, маточник упаривают в вакууме. Аморфный остаток растирают с этилацетатом Полученный сырой продукт вносят на колонку с силикагелем и продукт элюируют сме,сьюю растворителейй (2). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяют и упаривают, остаток растирают с эфиром и отфильтровывают. Получают 2,.76 г аморфного 2-61 п-Н 1 з-Р-Р 1 р-МН, (42 от теоретического).,В.)= 0,10:5-я стадия: амид Ь-пироглутамил- - Ь-гистидил-.пипеколиновой кислоты.Раствор 2,63 г (5 ммоль) 2-61 п -Н 1 з-Р 1 р-МН в 50 мл уксусной кислоты, смешивают с 0,5 г 10-ного катализатора палладий/активированный уголь и через раствор в течение часа пропускают газообразный водород. 40 Каталйзатор отфильтровывают, маточник нагревают до 60-70 С, смесь выдерживают 30 мин при этой температуре и затем упаривают в вакууме. Остаток растворяют в воде, раствор абрабатывают смолой 0 охехв ОН-форме и упаривают. Полученный сырой продукт вводят в колонку с силикагелем и элюируют смесью растворителей (1). Фракции, содержащие чистый продукт, 0 объединяют и упаривают, остаток растворяют в воде, раствор осветляют активированным углем и прозрачный вод-. ный раствор упаривают. Аморфный остаок сушат в вакууме над Фосфорнымгидридом. Получают 704 мг С 1 р-Н 1 з-П-Р 1 р-МНр (51 от теоретического), 24) = 0,1 ОДД=+16,0 о(с=1, в воде) .Аминокислотный анализ:61 и 1,03(1,0), Н 1 з 1,00 (1,0), Рз.р 096 1,0) . П р и Й е р 16.1,-Пироглутамил-Ь-гистидил-Ь-гомопроли намид.1-я стадия: трет-бутилоксикарбонил-Ь-гомопроливамид. 2,29 г (10 ммоль) ЫоС-Нрго растворяют в 30 мл этилацетата, растворсмешивают с 1,4 мл (10 ммоль) триэтиламина и охлаждают до -10"С. Поддерживая температуру реакционной смеси -10 С, по каплям добавляют 1,3 мл(10 ммоль) взобутилового эфира хлоругольной кислоты. После 15 мин перемешивания при -10 С в реакционнуюсмесь в течение получаса пропускаютгазообразный аммиак, после чего смесьоставляют на 2 ч при температуре от0 до 5 С. Затем отфильтровывают осадок, фильтрат упаривают и полученноев остатке масло растворяют в 30 млхлороформа. Раствор промывают в лелительной воронке дважды 10 мл 1 н.раствора соляной кислоты, затем дважды 10 мл 1 н. раствора бикарбонатанатрия и, наконец, один раз 10 млводы, сушат над безводным сульфатомнатрия и упаривают. Полученное в остатке масло кристаллизуют из н-гексана. Полученный сырой продукт(1,96 г) перекристаллизовывают изсмеси этилацетата эфира. Получают1,78 г Вос-НРго-ИН (78 от теоретического), т.лл. 138-140" С; Ф)- 0,43,(1"=-24,85 (с=1, в уксуснойкислоте) .Вычислено,: С 57,87, Н,8,83;И 12,27Смн 2,0 И,Найдено,: С 57,60; Н 8,89,И 12,11.Мол.вес 228,29.2-я стадия: гидрохлорид Ь-гомопролинамид,1,6 г (7 ммоль) Вос-НРго-ИН2растворяют в 10 мл этилацетата принагревании . Раствор охлаждают докомнатной температуры и смешиваютс 10 мл б н. раствора соляной кислоты в этилацетате. Реакционную смесьоставляют на час, затем разбавляютэфиром, полученный осадок растираюти фильтруют, Получают 1,05 г Н-НРго-ИН НС 1 .(91 от теоретического),т.пл, 178-1800 С, К = 0 32 Го(3=+26,2 (с=1, в метаноле).3-я стадия: бензилоксикарбонил-Ь-глутаминил-Ь-гистидил-Ь-гомопролинамид. Суспензию 5,39 г (12,5 ммоль) 2-61 п-.Н 1 з-М Н 3 (см.пример 15, 3-я стадия) в 100 мл диметилформамида смешивают с 4,6 мл (37,5 ммоль) 8,1 н. раствора соляной кислоты в диоксане, Полученный раствор охлаждают до -20 С, затем температуруоподнимают до -15 С и при перемешивании к реакционной смеси по каплям добавляют 1,63 мл (13,7 ммоль) трет-бутилнитрила. Реакционную смесь перемешивают 20 мин при -10 С, затем смешивают с 3,5 мл (25 ммоль) триэтиламина.Раствор 2,07 г (12,5 ммолы-1 Рго - Я С 1 в 10 мл диметилформамида смешивают с 1,75 мл (12,5 ммоль)триэтиламина. Осадок отфильтровывают. Полученный раствор охлаждают доо-10 С и по каплям добавляют к азидному раствору и, наконец, к смеси до 5бавляют 1,75 мл (12,5 ммоль) триэтиламина. Реакционную массу в течениечаса перемешивают при -10 С и послеэтого оставляют на ночь при 2 С. Наследующий день осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме иаморфный остаток растирают с этилацетатом. Полученный сырой продукт вводят в колонку с силикагелем и элюируют смесью растворителей (2). Фракции, содержащие чистый продукт, обаединяют и упаривают, а остаток растирают с эфиром. Получают 2,35 г -61 п-Н 1 з-Нрго-ХН (36 от теоретического),р С 4)Е204-я стадия: 1.-пироглутамил-Е-гистидил-Е -гомопроли намид,Раствор 2,1 г (4 ммоль) 2-С 1 п-Н 1 з-Нрго-ИН в 40 мл уксусной кислотысмешивают с 0,4 г 10-ного катализатора палладий/акти ви ров анный угольи через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализаторотфильтровывают маточник нагреваютдо температуры от 60 до 70 С и при ., 30этой температуре выдерживают 30 мини затем упаривают в вакууме. Полученный в остатке сырой продукт обрабатывают ионообменной смолой, как описано в примере 15, 5-я стадия, и чистят на колонне с силикагелем. Получают 618 мг С 1 р-Н 1 з-НРго-ИН (56 оттеоретического), К= 0,08,(гЦ 2=-24,0(1,0), Н 1 з 1,00(1,0), Нрго 0,91 (1,0).Полученные согласно изобретениютрипептиды с помощью описанных нижебиологических методов были проверенына их фармакологические действия.451. Подавление галоперидол-каталепсии у крыс,Животным подкожно вводят 40 мг/кг галоперидола-(р-хлорфенил)-1- в .1 3-(р-фторбензоил)-пропил-пиперидин-ола и через 120 мин контролируют наступление каталепсии, затем крыс разделяют на группы по 10 животных в каждой и внутривенно вводят дозами ТЕН и соответствующие трипептиды. Животных контрольной группы обрабатывают физиологическим раствором поваренной соли. Через 15,30,90 и 120 мин после обработки проверяют устраняющее каталепсию действие от дельных соединений. Каталептическими считают тех животных, которые, если передними лапами установить на колонну высотой 7 см, не меняют своего положения в течение 30 с. Опыты про-, 65 водят с И 1 згаг-крысами, самцами весом от 160 до 180 г,2. Потенцирование локомоторнойактивности у мышей.Животным, внутрибрюшинно вводяткаждой вначале 40 мг/кг И-метил-И-пропаргил-бензиламина, затем 20 мг/кгТК соответственно равные дозы исследуемых новых трипептидов и, наконец, 100 мг/кг Е-Пора, Через 30,60и 90 мин после обработки измеряютлокомоторную активность животных,определенные значения указаны в таблице в процентах (сравнивают со значениями, полученными на животных,обработанных ТКИ). Для опытов используют по 15 мышей самцов весом от 18 до22 г.3. Резерпин-гипотермия-обращающеедействие у мышей.Мышей-самцов весом от 18 до 22 гделят на группы по 10 штук в каждой,внутрибрюшинно вводят 5 мг/кг резерпина, через 16 ч животных обрабатывают дозами по 20 мг/кг ТЙН и соответствующего трипептида. Ректальную температуру животных измеряют перед обработкой их резерпином. В таблице приведены средние значения ректальныхтемператур, измеренных у каждых 10мышей,4, Влияние на продолжительностьсна, вызванного с помощью гексобарбитала.Мыкай-самцам, разделенным на группы по 10 штук в каждой, внутривенновводят по 60 мг/кг гексабарбитал-йа,затем через 10 мин внутрибрюшинновводят ТкН соответствующие изучаемымтрипептидам в дозе по 20 мг/кг. Втаблице указано время сна в процентах по отношению к значениям, измеренным у животных контрольной группы (средние значения из 10 животных) .5. Этанольный наркоз.Мышам смешанного пола весом от18 до 22 г, разделенным на группы по20 животных в каждой, внутрибрюшинновводят по 4,5 г этанола, через10 мин животным внутрибрюшинно вводят изучаемые трипептиды дозами по20 мг/кг. В таблице приводятся периоды сна в процентах по отношению кзначениям, измеренным у животных контрольной группы (средние значения из20 животных).6. Гормональная активность (ТКНдействие) у крыс.,И 1 згаг-крысы-самцы весом около200 г делят на группы по 7-8 животных в каждой и внутривенно вводятдозами по 20 мг/кг ТКН и соответствующих изучаемых трипептидов. ТРНреакцию .животных измеряют через15 мин после обработки с ТЙН и соответствующими изучаемыми соединени 2796346328ями из плазмг животных с помощью радиоиммунного исследованияОтносительный уровень действия вычисляют по четырехточечному методу с помощью ТОА 101 Соарц 1 ег, причем уровень действия ТКН рассматривают как 100, 5Данные биологических действий некоторых соединений общей формулы 1, определенные по вышеописанным фармакологическим методам, сведены в таблице. 30Из данных таблицы видно, что путем замены Н 1 з на алифатическую аминокислоту с прямолинейной или разветвленной углеродной цепью в ТКН-молекуле вызывается прекращение или зна чительное снижение выделения ТЗН, причем, например, подавление вызванной галоперидолом каталепсии становится сильнее в 2-7 раз. Некоторые новые ТКН-аналоги обнаруживают такжесущественное потенцирование локомоторной активности соответствующее понижение периода сна, вызванногогексобарбиталом или этанолом. Получаемые согласно изобретению новые трипептиды, а также их фармацевтически применяемые соли или комплексы могут быть применены в форме обычных лекарственных препаратов в терапии. Эти лекарственные препараты содержат активные .вещества в сопровождении пригодных для кишечного или парентерального введения неорганических или органических носителей. Лекарственные препараты могут быть изготовлены, например, в форме твердых лиофилизатов, в которые добавляют не вступающие во взаимодействие с пептидами соединения в качестве носителей, например, углеводы, также они могут быть изготовлены в виде концентрированных или разбавленных суспензий или эмульсий или таблеток или препаратов для инъекций,31 963463 32 Формула изобретения Составитель О.ГалкинРедактор П,Макаревич Техред Т.Маточка Корректор Г.Огар Заказ 7546/79 Тираж 445 Подписное ВНИИПИ ГосУДарственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5Филиал ППП "Патент", г.ужгороД, ул.Проектная,4 Способ получения трипептидамидовобщей формулы 1,Ыр-Х-т-ИН-А (Т) 5где Х - Ьец, Э-Ьец, М 1 ец, 11 ец, Ча 1,Юа 1, ТЬг, Рго, Ьаминобутерил,Ь-ц-аминодеканоил,Ьциклогексилаланил ЬтретР10(СН ) 11 А 1 К(С-С ) .при условии, если Х - Ьец, то А имеет значение, отличающееся от водорода или Х - Н 1 з, У - НРго, Р-пипеколил,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,наращивают пептидную цепь, начиная с амида аминокислоты общей формулы 11 У - МН - А (й) где У и А имеют укаэанные значения, с аминокислотами, их производными или соответствующим дипептидом методом пентафторфениловых эфиров или азидным методом и, в случае использования глутаминовой кислоты, циклизации последней в пироглутамин с последующим снятием защитных групп. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Боданский М., Клауэнер Я.С.Активированные эфиры и стратегияпептидного синтеза. - Химия полипептидов. Под ред. П.Катосояниса.М., "Мир",.1977, с.30-51.БАЕ - 2-диметилами ноэтил;ВСС - дициклогексил-карбодиимид;РГРО - пентафторфенол;ОСЬ - дициклогексил-мочевина;ПМГА - диметилформамид.Величины оптического вращения измеряют с помощью поляриметра Перкин-Эльмер 141. При тонкослойныххроматографических исследованиях применяют силикагельные пластины(Е,Мегс 1). При хроматографии исполь- Озуют следующие смеси растворителей:(4) этилацетат :(пиридин:уксуснаякислота:вода 20 б:11) 3:2Для обнаружения используют растворнингидрина. Пластины после опрыскивания сушат н течение около 5 мин .при 105 С. Затем хроматограммы обрабатывают газообразным хлором, обдувают воздухом и обрызгивают раствором о-толидин-калийиодида.Для хроматографической очисткина колонне применяют силикагель"Силикагель" (Е.Мегер) с величинойчастиц 0,062-0,2 мм.П р и м е р 1. Ь-Пироглутамил-Ь-норлейцил-Ь-пролинамид.301-я стадия.Раствор 2,28 г. (20 ммоль)НРгоИН и 3,95 г (10 ммоль) ВосИ 1 ецОРРР растворяют в 40 мл диметилформамида, после 5 мин стояния упаринаютв вакууме. Полученное в остатке маслорастворяют и 50 мл хлороформа, раствор трижды промывают в делительнойворонке 10 мл 1 н. раствора солянойкислоты, затем трижды 10 мл 1 н. рас твора бикарбоната натрия и, наконец,один раз 10 мп воды сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают,Остаток растворяют в 5 мл этилацетатаи раствор смешивают с 10 мл 5 н. рас твора соляной кислоты в этилацетате. Через 30 мин реакционную смесьразбавляют эфиром, выпавший в осадокпродукт отфильтронывают и сушат ввакууме над безводной гидроокисьюнатрия. Получают 2,48 г НИ 1 ец-Рго-ИН НС 1 (94 от теоретического выхода, рассчитанного на ВОС-И 1 ец-пироглутамил-Ь-норлейцил-Ь-пролинамид.Раствор 1,05 г (4 ммоль) НИ 1 ец-Рго-ЫН НС 1 в 10 мл диметилформамида охлаждают льдом и не снимая охлаж дения при перемейивании смешивают с 0,56 мл (4 ммоль) триэтиламина и 1,89 г (4,4 ммоль) Е-С 1 р-ОРРР. Через 5 мин,не прекращая перемешинание, добавляют к смеси 0,56 мл (4 ммоль) триэтиламина, перемешиванИе продо -жают еще 20 мин, затем упаривают ввакууме досуха, Остаток растворяют в40 мл хлороформа, раствор дваждывстряхивают в делительной воронке с10 мл 1 н, соляной кислоты,. триждыс 10 мл 1 н. раствора бикарбонатанатрия и, наконец, с 10 мл воды, затем сушат над безводным сульфатомнатрия и упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло кристаллизуютиз эфира, полученный сырой продукт(1,52 г) перекристаллизовывают из8 мл этилацетата. Получают 1,36 г2-С 1 р-И 1 ец-Рго-% (723 от теоретического; т.пл.146-148 С); Ко, (Ы0,32 р.= -79,8 (с=1, в уксуснойкислоте).Вычислено,В: С 61,00 Н 6,83И 11,86С 24 НО И 4Найдено,% : С 60,90; Н 7,04;И 11,87,Мол.вес.472,55,3-я стадия: Ь-пироглутамил-Ь-норлейцил-Ь-пролинамид.Раствор 1,16 г (2,46 ммоль) Ер-И 1 ец-Рго-ХН в 25 мл метаноласмешивают с 0,2 г 10-ного катализатора палладий/актинированный уголь ичерез раствор в течение 30 мин пропускают газообразный водород. Затемкатализатор отфильтровывают, фильтратупариваютТвердый аморфный остатокрастирают с эфиром, фильтруют, Полученный сырой продукт (0,.72 г) растворяют в воде, раствор осветляют активиронанным углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют. Получают0,66 г С 1 р-И 1 ец-Рг-ИН (79,5 оттеоретического); К = 0,43,Д(=(1,0) .П р и м е р 2, Ь-Пироглутамил-Ь- -норвалил-Ь-пролинамид.1-я стадия: гидрохлорид Ь-норвалил-Ь-пролинамид.Раствор 2,2 г (20 ммоль) НРго-ИН и 3,83 г (10 ммоль) ВОС-Иуа 1-ОРРР н 40 мл диметилформамида, оставляют на 5 мин, затем упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют в 50 мл хлороформа, раствор трижды встряхивают в делительной воронке с 10 мл 1 н, соляной кислоты, трижды с 10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз с 10 мл ноды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток растворяют в 5 мл этилацетата и раствор смешивают с 10 мл 5 н. раствора соляной кислоты в этилацетате. Через. 30 мин реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают и сушат в вакууме надбезводной гидроокисью натрия. Получают 1, 83 г Н-Чча 1-Рго-ИН. НС 1 (73от,теоретического выхода, рассчитанного на Восча 1-ОРГР); 11(4 = 0,10.2-я стадия: бензилоксикарбонил. --пироглутамил-Ь-норвалил.-пролинамид.Взвесь 1,25 г (5 ммоль) Н-Ича 1-Рго-ИН.НС 1 в 15 мл диметилформамида приохлаждении льдом и непрерывном перемешивании смешивают с 0,7 мл (5 ммоль 10триэтиламина и 2,15 г (5 ммоль) 2-С 1 р-ОРГР. Через 5 мин добавляют 0,7 мп(5 ммоль) триэтиламина, смесь перемешивают еще 20 мин и затем упаривают.в вакууме Остаток растворяют в 50 мл 15хлороформа, раствор трижды встряхивают в делительной воронке с 10 мл1 н. соляной кислоты, трижды - с10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, с 10 мл воды, сушат 20над безводным сульфатом натрия.иупаривают. Получающееся в остаткемасло обрабатывают эфиром, выпавший восадок продукт 1,8 г отфильтровываюти перекристаллизовывают из смесиэтанола и эфира. Получают 1,66 г2-С 1 р-Хча 1-Рго-Я 1 (72 от теоретического), т.пл.166-167 С,К = 0,29,Я -87,5 (с=1, в уксусной кислоте).Вычислено,Ъ: С 60,25) Н 6,5930И 12,22.СН 06 Х 4Найдено, Ъ: С 60,08; Н 6,70;И 12,15.Мол,вес.458,52. 353-я стадия: Ь-пироглутамил-Ь-норвалил-Ь-пролинамид.Раствор 1,42 г (3,1 ммоль) 2-С 1 р-Мча 1-Рго-ИН в 30 мл метанола смешивают с 0,2 г 10-ного катализатора 40палладий/активированный уголь и черезраствор в течение 30 мин пропускают.газообразный водород. Катализаторотфильтровывают, фильтрат упаривают.Твердый аморфный остаток растираютс эфиром и отфильтровывают. Полученный продукт растворяют в воде, раствор обесцвечивают, обрабатывая активированным углем, и прозрачныйводный раствор лиофилизуют. Получают0.,95 г 61 р-Ича 1-Рго-ИН (94 от теоретического), НГ= 0,36,Ц -87,0(1,О) .П р и м е р 3. Ь-Пироглутамил-Ь-пролил-Ь-пролинамид,1-я стадия: гидрохлорид Ь-пролил - Ь-пролинамид.2,28 г (20 ммоль) Н-Рго-МН 2 и 403,81 г (10 ммоль) ВОС-Рго- ЬРЕР растворяют в 40 мл диметилформамида,раствор трижды встряхивают в делительной воронке с 10 ил 1 н. соляной кислоты, трины с 10 мл 1 н. , 65 раствора бикарбоната натрия и один (раз с 10 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток растворяют в 5 мл этилацетата и смешивают с 10 мл 5 н. раствора соляной кислоты. Через 30 мин реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают и сушат в вакууме над безводной гидроокисью натрия . Получают 2,06 г Н-Рго-Рго-ИНд НС 1 (83 от теоретического выхода, считая на Вос-Рго-ОРГР); В 4 = 0,05.2-.я стадия: взвесь бензилокси(карбонил-Ь-пироглутамил-Ь-пролил- -Ь-пролинамид.0,75 г (3 ммоль) Н-Рго-Рго-ИН НС 1 в 10 мл диметилформамида при охлаждении льдом и постоянном перемешивании смешивают с.0,42 мл (3 ммоль) триэтиламина и 1,35 (3,15 ммоль) 2- -С(1 р-ОРГР.Через 5 мин добавляют 0,42 мл (3 ммоль) триэтиламина и после 10 мин перемешивания образовавшуюся густую суспензию упаривают в вакууме. Кристаллический остаток растирают с 8 мл этанола и оставляют в холодильнике на 3 ч. Полученный осадок отфильтровывают и сушат. Получают 1,0 г 2-61 р-Рго-Рго-Я (73 от теоретического), т.пл, 247-248" (с разложением), Р =0,19; Я ) = -82,8 ф (с=1, в уксусной кислоте) .Вычислено,Ъ: С 60,52 Н 6,18, И 12,27.1 14Найдено, Ъ : С 60,03 Н 6,30, Х" 12,20.Мол.вес 456,50.3-я стадия: Ь-пироглутамил-Ь-пролил-Ь-пролинамид.К раствору 1,0 г (2,2 ммоль) 2-01 р-Рго-Рго-ИЙ в 50 мл уксусной кислоты добавляют 0,2 г 10-ный катализатор палладий/активированный уголь и через смесь пропускают газообразный водород в течение часа. Катализатор отфильтровывают, Фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром. Полученный аморфный сырой продукт (0,60 г) растворяют в воде, обесцвечивают активированныы углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют. Получают 0,50 г 61 р-Рго-Рго-ИН (70 от теоретического); й 4 = 0,10;Ц 3 = = -223,1 (с=1, в уксусной кислоте).П р и м е р 4. Ь-Пироглутамил. - -валил-Ь-пролинамид,1-я стадия: гидрохлорид Ь-валил- -1,-пролинамид.Раствор 0,49 г (4,2 ммоль) Н-Рго-ИН и 0,82 г (2,14 ммоль) Вос-Ча 1- -ОРРР в 10 мл диметилформамида после 30 мин сгояния упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют в 10 мл хлороформа, раствор дважныпромывают в делительнои воронке 3 мл1 н, соляной кислоты, трижды - 3 мл 11 н. раствора бикарбоната натрия и,наконец, с 3 мп воды, сушат над безводным сульфатоМ натрия и упаривают.Остаток растворяют в 3 мл этилацетата и смешивают с 3 мл 5 н. растворасоляной кислоты в этилацетате. После 1 ч стояния реакционную смесь разбавляют эфиром, осадок отфильтровывают и сушат в вакууме над безводным едким натром. Получают 0,51 гН-Ча 1-Рго-ИН (95 от теоретического выхода, считая на Вос-Ча 1-ОРДЕР);Р 472-я стадия: бензилоксикарбонил -1,-пироглутамил-Ь-валил-Ь-пролинамид.Взвесь 0,38 г (1,52 ммоль)Н-Ча 1- -Рго-ИН 10 мп диметилформамида при охлаждении льдом и перемешивании 20смешивают с 0,22 мл (1,52 ммоль)триэтиламина и 0,69 г (1,6 ммоль)2-С 1 р-ОРГР. Через 10 мин к смеси добавляют 0,22 мл (1,52 ммоль) триэтиламина и после дополнительного 30 мин перемешивания реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 15 мл хлороформа, раствор дважды промывают в делительной воронке 5 мл 1 н, соляной кислоты, трижды 5 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, 5 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают ввакууме. Масляный остаток кристаллизуют, из эфира получают 0,54 г 2-С 1 р-Ча 1-Рго-ХН З 5 (77 от теоретического), т,пл.116- 118 С, Все 0 30 с 3= -100 5(с=1, в уксусной кислоте) .3-я стадия: Ь-пироглутамил-Ь-валил-Ь-пролинамид. 40Через раствор 9,65 г (21,2 ммоль) 2-С 1 р-Ча 1-Рго-ИН в 300 мл ВОДА после добавления 2 г 10-ного катализатора палладий/активированный уголь в течение 5 ч пропускают газообразный 45 . водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают. ПОлученное востатке масло растворяют в этаноле. Раствор упаривают. Эту операцию повторяют дважды. Полученный аморфныйтвердый остаток растирают с эфиром, получают 4,47 г С 1 р-Ча 1-Рго-ХНд(65 от теоретического), Р= 0,34, ,фв = -104,9 (с=1, в уксусной киф 1 оте) .Аминокислотный анализ.: С 1 ц 1,03 (1,01); Ча 1 1,00 (1,0); Рго 0,94 (1,О).П р и м е р 5, 1.-Пироглутамил- -1.-изолейцил,-пролинамид. 601-я стадия:бензилоксикарбонил- -Ь-изолейцил-Ь-пролинамид.51,4 г (0,1 моль) 2-11 е-ОРДЕР и 12,5 г (0,11 моль) Н-Рго-ИН растворяют в 250 мл диметилформамида и 65 раствор смешивают с 14,0 мл 0,1 моль)триэтиламина. Реакционную смесь оставляют на ночь при комнатной температуре, затем упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло.растворяют в 500 мл хлороформа, растворпоследовательно промывают в делительной воронке дважды 100 мл 1 н,соляной кислоты, дважды 100 мл 1 н.раствора бикарбоната натрия и одинраз 100 мл воды, сушат над безводнымсульфатом натрия и упаривают. Масляный остаток кристаллизуют из смеси100 мл эфира и 100 мл н-гексана. Сырой продукт (31,7 г) перекристаллизовывают из смеси 60 мл этилацетатаи 60 мл н-гексана. Получают 30,32 г2-11 ец-Рго-ИН (84 от теоретического), т.пл.127-128 С, М= 0,54.2-я стадия: гидрохлорид Ь-изолейцил-Ь-пролинамид.К раствору 24,0 г (66,5 ммоль)2-11 ец-РгоЦ в 470 мл метанола добавляют. 30 мл 2,4 н. метанольногораствора соляной кислоты и 4 г10-ного катализатора палладий/активированный уголь и через смесьв течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упарнвают, Остатокрастирают с эфиром, сырой продукт(20 г) перекристаллизовывают из смеси метанола и эфира. Получают 16,05 г,Нец-Рго-Я 1 НС 1 (81 от теоретического), т.пл. 135-140 С, В = О, 15.3-я стадия: бензилоксикарбонил,-пироглутамил-Ь-изолейцил-Ь-пролинамид.Взвесь 0,90 г (3,5 ммоль) Нец-Рго-ИН НС 1 в 20 мл диметилформамида при охлаждении льдом и перемешивании смешивают с 0,49 мл (3,5 ммоль)тризтиламина и 1,57 г (3,7 ммоль)2-С 1 р-ОРРР. Спустя 5 мин добавляют0,49 мл (3,5 ммоль) триэтиламина,смесь перемешивают еше 20 мин и упаривают в вакууме. Остаток растворяютв 30 мл хлороформа, раствор последовательно промывают в делительной воронке трижды 7 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 7 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец,.один раз7 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученноев остатке масло несколько раз обрабатывают эфиром,эфир декантируют,закристаллизовавшийся продукт отфильтровывают, растворяют в этилацетате и вновь осаждают добавлением,эфира. Получают 1,18 г 2-С 1 рец-Рго.-МН(71,5 от теоретического),т.пл. 87-89 С, Ф = О, 36,К.= -91,4-1 рец-Рго-Я 1 в 100 мл метанола добавляют 1 г 10-ного катали 5затора палладий/активированный уголь,через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром.Полученный сырой продукт (3,22 г)растворяют в воде и раствор осветляют активированным углем. Прозрачный водный раствор лиофилизуют, получают 3,3 г 61 рец-Рго-М 1 (98 5от теоретического), В 4= 0,45 (;3 =-ОН ОСНЛ в 60 мл эфира смешивают с20 мл 2 н. серной кислоты и встряхивают до растворения суспендированного вещества. Эфирную фазу отделяют,промывают в делительной воронке 20 лрт 302 н. серной кислоты и затем 20 млводы, сушат над безводным сульфатом.натрия и упаривают, Полученное востатке масло (4,14 г) и 3,7 г(20 ммоль) пентафторфенола растворяют в 25 мл этилацетата, раствор ох-.лаждают ниже 5 С и при перемешиваниисмешивают с 3,92 г (19 ммоль) ди -циклогексилкарбодиимида. Реакционнуюсмесь перемешивают в течение часа,охлаждая на ледяной бане, отфильтро Овывают выпавшую в осадок дициклогексилмочевину, фильтрат упарйвают. Полученное в остатке. масло растворяютв н-гексане и раствор оставляют начас в холодильнике, Выпавшую в осадок 45дициклогексилмочевину отфильтровывают и фильтрат концентрируют дообъема 20 мл, с началом кристаллизации суспензию оставляют в холодильнике на ночь, затем кристаллы от Офильтровывают. Получают 5,57 г Вос-ЛЬц-ОРГР (76 от теоретического),т,гтл. 83-84 С, 1(= 0,86,(оЦ= -32,8(с=1, в этилацетате),Вычислено,: С 48,79 Н 4,37;55М 3,79; Г 25,7.С 16 О 4 ГНайдено, : С 48,55, Н 4,28;й 3,70;1 25,44.Мол.вес 369,29.2-я стадия: гидрохлорид-сь-аминобутирил-,-пролинамид.Раствор 3,2 г (28 ммоль) Н-Рго-ИНи 5,16 г (14 ммоль) Вос-ЛЬц-ОРЕР в60 мл диметилформамида выдерживают 65 мин и затем упаривают в вакууме.Полученное в остатке масло растворяют в 100 мл хлороформа, растворпромывают в делительной воронке дважды 20 мл 1 н. раствора бикарбонатанатрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученноев остатке масло растворяют в 20 мпэтилацетата и смешивают,с 20 мпб и. раствора соляной кислоты в этилацетате. Через час реакционную смесьразбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают, сушат ввакууме над безводным едким натром.Полученный сырой продукт (3,86 г)растирают с 20 мл холодного (диметилформамида). Получают 2,40 г Н-АЬц-Рго-Я 1 (73 от теоретического выхода,считая на Вос-ЛЬц-ОРГР), К = 0,10.3-я стадия: бензилоксикарбонил.-пироглутамил-,аминобутирил-.-пролинамид,2,13 г (9 ммоль) Н-ЛЬц-Рго-Я(взмучивают в 30 мл диметилформаиидаи при охлаждении льдом и перемешивании смешивают с 1,26 мп (9 ммоль)триэтиламина и 3,95 г (9,2 имоль)2-1 р-ОРЕР. Через 5 мин к смеси добавляют еще 1,26 мл (9 ммоль) триэтиламина и после 20 мин перемешивания реакционную смес упариваютв вакууме. Кристаллический осадокрастирают с 20 мл этанола, оставляютв холодильнике на ночь и фильтруют.Получают 3,30 г -С 1 р-ЛЬц-Рго-ХН-аминобутирил,-пролинамид.Раствор 2,67 г (б ммоль) 2-С 1 р-ЛЬц-.Рго-М в 100 мл уксуснол кислоты смешивают с 0,5 г 10-ног. катализатора палладий/активированныйуголь, через смесь в течение часапропускают газообразный водор:д. Катализатор отфильтровьают, фильтратупаривают и остаток растирают с эфиром.Полученный продукт (1,82 г) растворяют в воде, раствор обесцвечивают активированным углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют.Получают 1,70 г 61 р-ЛЬц-Рго-ХН (91 оттеоретического),йф = 0,24,)Я=-. - аминодеканоил.-проли намид.1-я стадия: гидрохлорйд 1,-с-аминодеканоил-Ь-пролинамид.Раствор 137 г (12 ммоль) Н-Гго-ХН и 2,72 г (б ммоль) Вос-Ада-ОРГРв 20 мл диметилформамида выдерживают5 мин,затем упаривают в вакууме.Полученное в остатке масло растворяютв 50 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке трижды10 мл 1 н. соляной кислоты, трижды20;л 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, дважды 10 мп воды,сушат нд безводным сульфатом натрияи упаривают, Полученное в остаткемасло растворяют в 3 мл этилацетата и раствор смешивают с 5 мп б н,раствора соляной кислоты в этилацетате. После 1 ч стояния. реакционнуюсмесь разбавляют эфиром, выпавшийв осадок продукт отфильтровывают и 1 Осушат в вакууме над безводной гидроокисью натрия, Получают 1, 75 г Н-Айа"Рго-ИН - НС 1 (91 от теоретическоговыхода, считая на Вос-Ада-ОРДЕР).2-я стадия: бензилоксикарбонил-Ь-пироглутамил-Ь-с-аминодеканоил-Ь-пролинамид,Раствор 1,75 г (5,5 ммоль) Н-Ас 1 аРго-ИН и 2,58 г (б ммоль) 2-61 р-ОРЕР в 30 мп диметилформамида смешивают с 0,77 мл (5,5 ммоль) триэтиламина, Спустя 5 мин к смеси добавляютеще 0,77 мл (5,5 ммоль) тризтиламинаи после 20 мин перемешивания реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 50 мл хлороформа,раствор промывают в делительной воронке трижды 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 20 мп 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец,дважды 20 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.Полученное в остатке вспененноемасло растирают с эфиром, образовавшуюся при этом желатинового типасуспензию оставляют стоять в течение 352 ч в холодильнике, затем осадок отфильтровывают и сушат. Сырой продукт(2,61 г) перекристаллизовывают из20 мл этилацетата. Получают 2,45 г2-61 р-Ада-Рго-МН (84 от теоретичес-щкого т.пл. 103 105 ОС Н( 0 19Ы = -63,7 (с=1, в уксусной кислоте,Вычислено,Ъ: С 63,62; Н 7,63,Ы 10,60, 4С,О, 4Найдено, Ъ: С 63,24, Н 7,81;И 19,47,Мол.вес 528,65,3-я стадия: Ь-пироглутамил-Ь-с-аминодеканоил-Ь-пролинамид.Раствор 1,9 г (3,6 ммоль) 2-С 1 р-Айа-Рго-ИНв 40 мп уксусной кислотысмешивают с 0,2 г 10-ного катализатора палладий/активированный уголь ичерез смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Затем катализатор отфильтровывают, Фильтратупаривают и остаток растворяют вводе. Водный раствор обесцвечивают60активированным углем и упаривают. Полученное в остатке масло растворяютв 30 мл хлороформа, раствор сушатнад безводным сульфатом натрия и упаривают. Вспененный, аморфный, твердый остаток растирают с эфиром, отфильтровывают и сушат. Получают 1,20 г61 р-Ада-Рго-%1 (82 от теоретического),К = 0,55,Г)= -66,2 (с=1,в уксусной кислоте),П р и м е р 8. Ь-Пироглутамил-Ь --циклогексилала нил-Ь-пролинамид.1-я стадия: пентафторфениловыйэфир трет-бутилоксикарбонил-Ь-циклогексилаланин,Суспензию 9,04 г (20 ммоль) Вос-Спа-ОН РСНА в 80 мл эфира смешивают с 20 мп 2 н. серной кислоты.Смесь встряхивают. до полного растворения твердого вещества, затем отделяют эфирную фазу, промывают 20 мп2 н. серной кислоты 20 мп воды, сушат над сульфатом натрия и упаривают.Полученное в остатке масло (5,7 г)растворяют в 30 мл зтилацетата, смешивают с 3,7 г (20 ммоль) РЕРОН,смесь охлаждают до 5 С и смешиваютс 4,12 г (20 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают в течение часа при этой температуре, затем выпавшую в осадокдициклогексилмочевину, фильтрат упаривают и полученное в остатке маслорастворяют в 30 мл н-гексана, Раствороставляют в холодильнике на час, приэтом вновь высадившуюся дициклогексилмочевину отфильтровывают и фильтратразбавляют 70 мл н-гексана. Разбавленный раствор промывают,в делительной воронке пять раз 40 мп 1 н. раствора бикарбоната натрия, дважды40 мп воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученноев остатке масло кристаллизуют. Получают 8,48 г Вос-СЬа-ОРДЕР (97 оттеоретического), т.пл.75-77 С,К" =0,88,Вычислено, С 5492 Н 553И 3,20 Р 21,72,С Н,ОНайдено, Ъ : С 54,67; Н 5,66И 311 Е 2143Мол. вес 437,41.2-я стадия: гидрохлорид Ь-циклогексилаланил-Ь-пролинамид.Раствор 2,28 г (20 ммоль) Н-Рго-ИН и 4,37 (10 ммоль) Вос-Спа-ОРГРв 40 мл диметилформамида после5 мин стояния упаривают в вакууме,Полученное в остатке масло растворяют в 80 мп хлороформа растворпромывают в делительной воронке трижды 20 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 20 мл 1 н. раствора бикарбонатанатрия и, наконец, один раз 20 мпводы, сушат над безводным сульфатомнатрия и упаривают. Полученное востатке масло растворяют в 8 мп этилацетата, смешивают с 10 мл 5 н. раствора соляной кислоты в этилацетатег терез час реакционную смесь разб в яют эфиром. Выпавший в осадокг.з, кт отфильтровывают и сушат в-ОР 1:Р растворяют в 20 мл диметилформамида, выдерживают 5 мин и упариваютв вакууме. Полученное в остатке маслорастворяют в 30 мл хлороформа, растворпромывают в делительной воронке дважды 10 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 10 мл 1 н. раствора бикарбонатанатрия, сушат над безводным сульфатомнатрия и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 4 мл этилацетата и смешивают с 5 мл 5 н. рас- А 5 Аминокислотный анализ: 1 ц 1,00(1,0). вакууме над безводным едким натром.Получают 2,98 г Н-СЬаго-МЬНС 1-1.-пироглутамил-,-циклогексилаланилпролинамид.Раствор 2,43 г (8 ммоль) -СЛа-Рго-ЯГ НГ 1 и 3,60 г (8,4 ммоль)2-С 1 Р-ОГР в 25 мл диметилформамидасмешивают с 1,12 мл (8 ммоль) триэтиламина. Спустя 5 мин добавляютеще 1,12 мл (8 ммоль) триэтиламинаи реакционную смесь перемешивают20 мин и упаривают в вакууме, Остаток растворяют в 80 мл хлороформа,5раствор промывают в делительной воронке трижды 20 мл 1 н, соляной кислоты, трижды 20 мп 1 н, растворабикарбоната натрия и, наконец, одинраз 20 мл воды, сушат над безводнымсульфатом натрия и упаривают Полученное в остатке масло кристаллизуют из эфира, полученный сырой продукт (3,88 г) перекристаллизовываютиз 30 мп этилацетата. Получают 3,32 г 25Ер-Сйа-Рго-Я (81 от теоретического), т.пл .165-166 С, й-. 0,17,СИЗ= -67,3 (с=1, в уксусной кислоте).Вычислено,Ъ: С 63,26; Н 7,08;И 10,93.СО,Найдено, Ъ: С 63,15 Н 7,04;И 10,91Мол,вес 512,61,4-я стадия: Ь-пироглутамил, - 35-циклогексилаланил.-проли намид,Раствор 3,07 г (б ммоль):-Г 1 Р-СЬа-Рго-ИН 2 60 мл этанола, смешивают с 0,6 г 10-ного катализаторапалладий/активированный уголь и через смесь в течение 2 ч пропускаютгазообразный водород. Катализаторотфильтровывают, фильтрат упариваюти остаток растирают с эфиром. Получают 2,15 г аморфного твердого С 1 р-СЬа-Рго-Х (95 от теоретического),Й 4= 0,50,Я= -70,9(с=1, в уксусной кислоте) . твора соляной кислоты в этилацегате.Реакционную смесь выдерживают 1 чпри комнатной температуре и разбавляют эфиром, отфильтровывают осадок исушат в вакууме над безводным едкимнатром. Получают 2,05 г Н-ТЬг(В-)-Гго-М 1 НГ 1 (95 от теоретического)Н 4) - 0,40.2-я стадия: бензилоксикарбонил, -(6,27 ммоль) :-61 р-ОРРГ в 21 мп диметилформамида по каплям прибавляют0,84 мл (6 ммоль) триэтиламина и после 5 мин стояния добавляют еще0,84 мп (б ммоль) триэтиламина,20 мин реакционную смесь перемешивают, а затем упаривают в вакууме, остаток растворяют в 50 мл хлороформа,раствор промывают в делительной воронке дважды 10 мл 1 н. соляной ки-слоты и трижды 10 мл 1 н, растворабикарбоната натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.Полученное в остатке масло обрабатывают эфиром и охлаждают, продуктзастывает в. аморфном состоянии. Полученный продукт (2,76 г) растворяютв этилацетате и раствор обесцвечивают активированным углем. Уголь отфильтровывают, фильтрат упаривают итвердый, аморфный, вспененный остаток рас 7.ирают с эфиром. Получают2,47 г -61 р-ТЬг(В:1)-Рго-%, (75от теоретического).3-я стадия: 1,-пироглутамил-Ь-треонил,-пролинамид.Раствор 2,04 г (3,7 ммоль) Е-С 1 р-ТЬг(В 1)-Рго-Х 1 в 40 мл уксуснойкислоты смешивают с 0,4 г 10-ногокатализатора палладий/активированныйуголь и через смесь в течение 4 ч пропускают газообразный водород,Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растираютс эфиром. Полученный аморфный продукт(1, 31 г) помещают в колонку, содержащую 30 г силикагеля (размер частиц:0,063-0,2 мм) и элюируют продукт смесью растворителей (3). Фракции элюатов, содержащие чистый продукт, объединяют и упаривают, полученный в остатке сырой продукт обрабатывают эфиром. Получают 0,72 г 61 р-ТЬг-Рго-М-ного катализатора палладий/активированный уголь, через смесь втечение 30 мин пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, Фильтрат упаривают, Полученное в остатке масло кристаллизуют ф 0из эфира, кристаллы отфильтровываюти сушат. Получают 2,50 г 61 р-Бег(Вц )" -60,8 (с=1, в уксусной кислоте) . 63 50 8,0 г (70 ммоль) Н-Рго-ИНр и 16,0 г (34,7 ммоль) 2-Бег(Вц+) -ОРРР растворяют в 120 мп диметилформамида и раствор после 5 мин стояния упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют в 300 мп хлороформа, раствор промывают в де лительной воронке трижды 80 мп 1 н, соляной кислоты, трижды 80 мп 1 н, раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 80 мп воды сушат над безводным сульфатом натрия .и упаривают. Полученное в остатке масло (18 г) и 4,37 г (34,7 ммоль) дигидрата щавелевой кйслоты растворяют в 300 мп метанола, раствор смешивают 15 с 3 г 10-ного катализатора палладий/ активированный уголь и через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают, остаток 20 растирают с этилацетатом и сушат в вакууме.Получают 10,8 г Н-Бег(Вц )-Рго-МН (СООН (90 от теоретического выхода, считая на 2-Бег(Вц )-ОРРР у в Форме аморфного гироскопичного вещества), к = 0,22.4)2-я стадия: бензилоксикарбонил-Ь- -пироглутамил"О-трет-бутил-Ь-серил--1 -пролинамид. 30Раствор 6,43 г (18,5 ю)оль) Н-Бег (Вц) -Рго-ИН (СООН) и 3 97 (18,5 ммоль) 2-61 р-ОРРР в 80 мл дйметилформамида смешивают с 5,18 мл (37 ммоль) триэтиламина. После 5 мин3 стояния реакционную смесь упаривают в вакууме и кристаллический остаток растирают с эфиром. Полученный сырой продукт (9,53 г) перекристаллизовывают из 120 мп метанола. Получают 7,70 г 2-С 1 р-Бег(Вцг)-Рго-ХН (83 от теоретического), т.пл., 226-229 С К= 046 ЬДа = 71 бе.П р и м е р 11. Ь-Пироглутамил-Р-лейцил-Ь-пролинамид.1-я стадия: пентафторфениловыйэфир трет-бутилоксикарбонил-лейцилэРаствор 4,62 г (20 ммоль) Вос-В-Ьец-ОН и 4,23 г (22 ммоль)РЕРОН в 50 мп этилацетата при охлаждении льдом и перемешивании смешивают с 4,12 г (20 ммоль)дициклогексилкарбодиимида. Реакционнуюсмесь перемешивают, охлаждая в ледяной бане, отфильтровывают выпавшуюв осадок дициклогексилмочевину, фильтрат упаривают. Полученное в остаткемасло растворяют в 100 мп н-гексана,раствор оставляют на час в холодильнике и выпавшую в осадок дициклогексилмочевину отфильтрбвывают. Фильтрат промывают в делительной воронкепять раз 50 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и.дважды 50 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрияи упаривают. Полученное в остаткемасло кристаплизуют в течение ночиПолучают 7,0 г Вос-Ьец-ОРРР (88от теоретического), т.пл,53-55 фС,ЯЯ= +31,7 (с=1, в этилацетате).Вычислено,%: С 51,39; Н 5,07;И Зф 53 Р 23 к 91.СО, ЫРЧНайдено,: С 51,51; Н 4,68,.И 3,66 Е 2365.Мол.вес 397,35.2-я стадия: гидрохлорид 1)-лейцил-Ь-пролинамид.Раствор 3,42 г (30 ммоль) Н-Рго-МНу и 60,0 г (15 ммоль) Вос-П-Ьец-ОРРР в 60 мп диметилформамида после 5 мин стояния упаривают в вакууме, Остаток растворяют в 100 мп хло-,роформа,раствор промывают в делительной воронке дважды 20 мп 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 20 мп1 н. раствора бикарбоната натрия и,наконец, один раз 20 мп воды, сушатнад безводным сульфатом натрия и упаривают, Полученное в остатке маслорастворяют в 10 мп этилацетата, раствор смешивают с 15 мп 4 н. растворасоляной кислоты в этилацетате,черезчас реакционную смесь разбавляютэфиром, осадок отфильтровывают исушат в вакууме над безводным едкимнатром. Получают 3,66 г Н-Ьец-Рго-ИН НС 1 (92,5 от теоретическоговыхода, считая на Вос-Э-Ьец-ОРДЕР),