Способ получения рнк и белков вируса ящура

Номер патента: 602861

Опубликовано: 15.04.1978

Автор: Жгенти

МПК: G01N 33/16

Метки: белка, биосинтеза

...красителем бромфеноповым синим с сулемой, Выборкрасителей зависит от их пригодности дляколичественной питохимии,Все препараты обезвожнвают, диф 1 ерепиируют, просветляют и заключают в бальзам,Проводят морфо-фотометрию исследуемых суб"( "кувтЯИоирсЛЬ С ИклИЯЛКИУИНЯРедактор Ао "пииовоанлова :.Нхрзд Зб Фанта Корректор С, ГарасиннкЗаказ 184 О/4 О 7 ирюк 13.12ПодписноеЦНИИГП 4 Гоцдарсюзнииого кощтета Совета Министров СССРчо пел рик ик зобр Йени Й ик открьти й11 ЗИЗЗ, Москва, к Зб, Рнушсквн нвбд, 4/ЬРнлнн ППП Пнкннг", г. Ужгород, ул. ИИкснкгннн, 4 Кпвт сииио..",:.,. "., ".,. Ои р ко, .ини,Л Ь уй их .к Г: ди 3 О ЛИЗЧРОВдВЕ Г иУ" ЙЯП дик ЯХ к Г РОРУк 8 БпкиЬи ДЯБ ным оц зделзгит отнв-ителик кпяе обгче и остато.ДЬЗ Кж:".:=.ЕСТВЯНй И...

Номер патента: 1816797

Опубликовано: 23.05.1993

Авторы: Бобков, Гараев, Шуленин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48

Метки: антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, гибридного, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, конструирования, определяющая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рр1, свойствами, синтез, человека, штамм

...ДНК проводят методом равновесного центрифугирования в градиенте плотности СзС 1 с бромистым этидием (1 мкг/мл),Для получения плазмиды рР 1 фрагмент Н 1 пб 111 - Е.сой 1 плазмиды рйТЗ переклонируют в вектор рцй 290 по сайту Нпб 111, С этой целью 10 мкг ДНК плазмиды инкубируют с 30 ед. эндонуклеазы Е.соЯ в буфере, содержащем 100 мМ йаС 1, 10 тМ МдМ 12, 10 аМ трис-НС 1 рН 7,5, 1 щМ ДТТ, в течение 1 ч при 37 С. Затем добавляют 1/10 объема ЗМ ацетата йэ и осаждают ДНК 2,5 объемами этилового спирта на ценрифуге (10000 д, 10 мин, 4 С). Осадок высушивают и растворяют в буфере 10 мМ трис-НС 1 рН 8,0 и 5 мМ ЭДТА. Полученный препарат лигируют с 50 мМ адаптора Е.сой-Нпд 11 с помощью ДНК-лигазы фага Т 4 (30000 единиц/мл),из расчета 1 мкл...

Номер патента: 1708848

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Бобков, Бобкова, Гараев, Казеннова, Колот

МПК: C12N 15/48, C12N 15/70

Метки: pga9, антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, кодирующая, конструирования, первого, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, свойствами, синтез, типа, человека, штамм

...ген устойчивости к канамицину, и раг-участок СоА выделяют из плазмиды рАК 25. Для этого рАК 25 подвергают гидролизу рестриктазой Е,сой 1, ин кубируя 20 мкг ДН К рАК 25 с 20 ед, 10 фермента в присутствии 50 мМ МаС 3, 10 мММцС 32 10 мМ трис-НС 3, рН 7,5, 1 мМ ДТТ в течение 2 ч г.ри 37 С с последующим прогреванием при 75 С в течение 15 мии. Далее гидрслизовзииую ДНК разделяют в 0,8% 15 дгзрозном геле и выделяют нужный фрагмент ДНК, используя бумагу ДЕ 81.В качестве вектора используют плазмиду р 630, полученную следующим образом.Клетки бактерий Е.со 3 НВ 101, содержа щие плазмидную ДНК рОВ 290 выращиваютв 200 мл бульона до титра 1 х 10 клеток/мл. Клетки осаждают центрифугирсванием(5000 ц,5 мии,4 С) и ресуспендируют в 35 мл раствора,...

Номер патента: 933001

Опубликовано: 30.05.1982

Авторы: Масанори, Тадаказу, Такеси, Хирофуми, Цутому

МПК: G01N 33/48

Метки: активностью, двунитчатой, интерферониндуцирующей, обладающей, рнк, синтетической

...концентрированном растворе ЗЯС,в растворе БИС с концентрацией О, 1(рН 7,0) и т.д. Нерастворим в этаноле и ацетоне,Спектр ультрафиолетового поглощения. 0,02 мг/мл водного раствора,образца дают спектр ультрафиолетовогопоглощения, типичный для нуклеиновойкислоты. Максимум поглотительной спо.собности приходится на 260 нм, а минимум - на 230 нм.Цветовая реакция. Реакция положительна при проверке орсинолом и отрицательна для дифениламина и индола соответствует характеристике цве-товой реакции РНК,Реакция осаждения. К 0,5 мг/млводного раствора образца добавляютраствор этанола двукратного объемаи дают отстояться в течение болеечем одного часа при -20 С. В осадок выпадает почти 100 материала,Дабавление половины объема охлажденной...

Номер патента: 1628528

Опубликовано: 15.07.1994

Авторы: Малыгин, Микрюков, Попова, Рязанкина, Ставицкий, Щелкунов

МПК: C12N 15/39

Метки: pvh64, вируса, встройки, генов, геном, днк, информации, картирования, конструирования, ливп, направленной, осповакцины, плазмидная, предназначенная, рекомбинантная, чужеродной, штамма

...которого расположена, по-видимому, в Нпб И-О- и Н 1 пб И 1-Е-фрагментах.П р и м е р 3. Использование рекомби нантной плаэмиды рЧН 64, содержащейНпс И 1-Р-фрагменты ДНК ВОВ, в качестве векторов для направленной встройки чужеродной генетической информации в вирусный геном, демонстрируют следующим 10 образом.При анализе нуклеотидной последовательности Нпб 1 И-Р-фрагмента обнаружен один сайт для рестриктаэы ВавН 1, находящийся почти в середине фрагмента в гене 15 белка 36 К. Он может быть использован длявстройки чужеродных фрагментов ДНК. Для того чтобы этот сайт стал уникальным в рекомбинантной плазмиде, Нпс И 1-Р-фрагмент с помощью стандартных процедур 20 переклонируют по Нпс И 1-сайту в плазмидурВО, которая представляет собой плазмиду рВВ...