Патенты с меткой «геном»
Штамм бактерий sеrrатiа маrсеsсеns, используемый для трансформации днк с геном устойчивости к ампициллину
Номер патента: 1585327
Опубликовано: 15.08.1990
Авторы: Гимадутдинов, Порфирьева, Юсупова
Метки: serratia, ампициллину, бактерий, геном, днк, используемый, маrсеsсеns, трансформации, устойчивости, штамм
...был отобран мутант, неспособный продуцировать неспецифическую внеклеточнуюэндонуклеазу.1Полученный мутанг засевают в колбы с мясопептонным бульоном до оптической плотности 0,05 при 650 нм,Культуру выращивают на качалке дооптической плотности 0,5, осаждаютклетки центрифугированием, промывают 0,1 М цитратным буфером, рН 5,5в 20 раз измеряли оптическое поглоще ние при 260 нм на спектрофотометре Сф, За единицу активности принимали количество фермента, которое дает увеличение оптической плотности в опытных образцах, по сравнению с контрольными (реакционная смесь без фермента) на одну оптическую единицу за 1 ч инкубации в пересчете на 1 мл культуральной жидкости (опт, ед. мл ч 9 . В качестве субстрата использовали препараты...
Векторная плазмидная днк ртк 1261, предназначенная для интеграции чужеродного фрагмента в геном вируса осповакцины, и способ ее конструирования
Номер патента: 1640163
Опубликовано: 07.04.1991
Авторы: Микрюков, Приходько, Серпинский, Урманов, Чижиков
МПК: C12N 15/79
Метки: 1261, векторная, вируса, геном, днк, интеграции, конструирования, осповакцины, плазмидная, предназначенная, ртк, фрагмента, чужеродного
...ДНК разделяют электрофорезом в 43-ном полиакриламидном геле (ПААГ) и выделяютбольший Фрагмент ДНК.20 мкг плаэмидной ДНК рПС 18 расщепляют ферментами Нпй 111 и,Есо К 1,55как описано, и выделяют Ндпй 1 ПЕсо К 1-полилинкер из 87-ного ПААГ.Линеариэованную плазмидную ДНКрТК 1285 Нхат 111 Есо К 1 и Ный 1114 Есо К 1-полилинкер сшивают ДНК-лигазой Фага Т 4 (1 е.а.) в 50 мИ трисНС 1, рН 7,5; 0,5 мИ АТР, 10 мМ 2-мерокаптоэтанола, 5 мМ И 8 С 1 при 8 С12 ч. Препарат ДНК осаждают спиртом.1/10 часть ДНК трансформируют вкомпетентные клетки штаюа Е,со 11НВ 101, Пдазмидную ДНК (рТК 1261)выделяют щелочным методом из положительно гибридизующейся п здп колонии Е.со 1 и подвергают рестрикционному анализу. Структуру полилинкераподтверждают...
Векторная плазмидная днк ртк 1285, предназначенная для интеграции чужеродного фрагмента в геном вируса осповакцины, и способ ее конструирования
Номер патента: 1640164
Опубликовано: 07.04.1991
Авторы: Микрюков, Приходько, Серпинский, Урманов, Чижиков
МПК: C12N 15/79
Метки: 1285, векторная, вируса, геном, днк, интеграции, конструирования, осповакцины, плазмидная, предназначенная, ртк, фрагмента, чужеродного
...1 х НВ 101 проводятотбор колоний фенотипа "Ар Тс и рестрикционный анализ плазмидных ДНК(рВКНК)П р и м е р 3. Рекомбинантныеплазмидные ДНК рТК 108, рТК 1567,рТК 1238 и РТК 1285Плазмидную ДНК рВКНК подвергаютгидролизу эндонуклеазой рестрикцииРчц 11 в стандартных Условиях и сшивают ДНК-лигазой фага Т 4 по примеруЛигаэной смесью трансформируют компетентные клетки штавща Е.со 1 НВ 101и отбирают колонии, содержащие рекомбинантные плазмиды с Нпй 111 - Рсщ 1150фрагментом ДНК длиной 1708 н.п,(рТК 1708).Плазмидную ДНК рТК 1708 расщепляют последовательно рестриктазамиНЫЙ 111 и ХЬа 1, выделяют большийфрагмент ДНК, который инкубируют снуклеаэой З 1 по примеру 1. Затем пре парат ДНК сшивают ДНК-лигазой фагаТ 4 и проводят трансформацию компе 64...
Рекомбинантная плазмидная днк pvh64, предназначенная для картирования генов вируса осповакцины штамма ливп и для направленной встройки чужеродной информации в геном вируса осповакцины, и способ его конструирования
Номер патента: 1628528
Опубликовано: 15.07.1994
Авторы: Малыгин, Микрюков, Попова, Рязанкина, Ставицкий, Щелкунов
МПК: C12N 15/39
Метки: pvh64, вируса, встройки, генов, геном, днк, информации, картирования, конструирования, ливп, направленной, осповакцины, плазмидная, предназначенная, рекомбинантная, чужеродной, штамма
...которого расположена, по-видимому, в Нпб И-О- и Н 1 пб И 1-Е-фрагментах.П р и м е р 3. Использование рекомби нантной плаэмиды рЧН 64, содержащейНпс И 1-Р-фрагменты ДНК ВОВ, в качестве векторов для направленной встройки чужеродной генетической информации в вирусный геном, демонстрируют следующим 10 образом.При анализе нуклеотидной последовательности Нпб 1 И-Р-фрагмента обнаружен один сайт для рестриктаэы ВавН 1, находящийся почти в середине фрагмента в гене 15 белка 36 К. Он может быть использован длявстройки чужеродных фрагментов ДНК. Для того чтобы этот сайт стал уникальным в рекомбинантной плазмиде, Нпс И 1-Р-фрагмент с помощью стандартных процедур 20 переклонируют по Нпс И 1-сайту в плазмидурВО, которая представляет собой плазмиду рВВ...
Способ встраивания днк в геном аденовируса и рекомбинантный аденовирусный вектор celopuc 19
Номер патента: 1490962
Опубликовано: 10.04.1995
Авторы: Бендукидзе, Грабко, Фодор
МПК: C12N 15/09, C12N 7/01
Метки: celopuc, аденовируса, аденовирусный, вектор, встраивания, геном, днк, рекомбинантный
1. Способ встраивания ДНК в геном аденовируса, включающий гидролиз ДНКрестриктазой Xbal и трансфекцию ДНК, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, проводят гидролиз рестриктазой Xbal плазмидной ДНК и ДНК генома аденовируса CELO с последующим неполным гидролизом рестриктазои Bgli ДНК генома аденовируса CELO, затем смешивают Bgli фрагменты ДНК с мол.м. 12 мегадальтон, и два Xbal фрагмента Ad CELO с мол.м.18 и 2,4 мегадальтон, которые предварительно последовательно лигируют в Xbal сайте с линейной плазмидной ДНК, смесью указанных фрагментов проводят трансфекцию куриных эмбрионов и выделяют рекомбинантный вирус.2. Рекомбинантный аденовирусный вектор CELO/pVC 19 мол.м. 3,2