Патенты с меткой «транскрипцию»

Вектор для клонирования генов, обеспечивающий регулируемую транскрипцию чужеродных генов, и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1275043

Опубликовано: 07.12.1986

Авторы: Баев, Семенова, Солонин, Таняшин

МПК: C12N 15/00

Метки: вектор, генов, клонирования, конструирования, обеспечивающий, регулируемую, транскрипцию, чужеродных

...в течение 10 мин во льду добавляют 50 мкл пан - креатической РНКазы (1 мг/мл), предварительно прогретой при 100 С в течение 5 мин, и 0,5 мл "лизирующей" смеси (0,3 мл 1 ОЕ тритон-Х, 7,5 мл М ЭДТА рН 8,0, 1,5 мл 1 М трис - НСЕ рН 8,0, 0,7 мл Н О). После инкубации2при постоянном помешивании стеклянной палочкой во льду в течение 10 мин получают осветленный лизат центрифугированием пробы в течение 1 ч при 17000 об/мин (КапегзЫ 2.). Полученный лизат разбавляют водой вдвое, обрабатывают равным объемом фенола, насыщенного 50 мМ тРис -НС 1, рН 8,0, при комнатной температуре в течение 10 мин, водную фазу собирают центриФугированием при 6000 об/мин. Остав - шийся в пробе Фенол удаляют эфирной экстракцией, а ДНК переосаждают 707. - ным спиртом.5...