Способ получения трипептидов

(33) США11.78.Бюллетень51) 3) Приоритет С 07 С 103/5 А 61 К 37/02 аудврстаеииый иамитеавета Мииаатрав СССРа делам ивааретеиийи аткритий(43) Опубликовано 53) УДК 547.964 .4,07( 088.8) 45) Дата опубликования описания 10.11,7 ИностранцыАмедео Артуро Файлли ( Италия),Ханс Вели Иммер и Манфред Карл Гетц (Кана 2) Автори изобретен Иностранная фирма фЭйерст, Маккенна энд Харрис(71) Заявитель 4) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПЕП лици у пол их би ог т льО писываемым спосоидов общей формулы (12) СО-У-я, (1) ил- или диметиламид или группа формугается Цел ом по-Р о- М(й.т)СН- водород, мета; Я - водороСН(- аминогруппа,ппа формулы де Йогрупп этиламиногруппайН(СН ) йН; 25 зобретение относится к спос чения новых трипептидов, обладающ ологической активностью, которые м у найти применение в медицине.В химии пептидов широко применяется способ получения их путем деблокирования защитных групп И, Отщепление защитных групп проводят широко известными методами, например бензилоксикарбони ные группы отщепляют гидрированием в присутствии катализатора, а трет-бутоксикарбонильные - обработкой защищенного пептида в умеренно кислой среде )11.Целью изобретения является синтез новых трипептидных производных с ценными 5 Фармакологическими свойствами,или Й - метил;К - группа формулы СН СН(СН )Й - аминогруппа;,зУ - 2 - аланилпри условии, что, если Й - водород или диметиламиног р уппа, то К- этиламиногруппа или группа формулы Н М (СН.)г,ЙНа,заключающимся в том, что проводят деблокирование соответствующего соединения общей формулыЙ,- Ь-Рго- М(Р ) СН (Яя) СО-У-Б где йч, Я и У имеют указанные выше значения;Ц, - бензилоксикарбонил или трет-бутоксикарбонил; К-аминогруппа, этиламиногруппа или группа формулы Н Н(СН,)айН-Вос при условии, что если Й а - группа формулы КН(СН )й ИН-Вос, то йй - водород.Деблокирование целесообраствлять гидрированием в присутствии ката лизатора, содержащего благородный металл, если Я, -бензилоксикарбонил. В ка честве катализатора, включающего благо3 632299 4 родный металл, могут быть использованы пературе в течение четырех дней, промыпалладий или платина на угле, Если Й 4 - вают 57-ным раствором бикарбоната наттрет-бутоксикарбонил или й- группа рия и насыщенным раствором хлорида наформулы ЯН(СН), К Н-Вос, деблокирова- трия, Затем сушат, фильтруют и фильтрат ние можно осуществлять в умеренно кис упаривают. Остаток очищают хроматогралой среде. фией в колонне с силикагелем с использоП р и м е р 1, Бенэилоксикар- ванием смеси хлороформ-метанол (98:2) бонил - Ь - пролил -3 М, ( М - диме- в качестве элюента. Элюат упаривают и тиламино) лейюилглицинэтиловый эфир получают указанное в заголовке соедине 1 О нне.2 Рго-йй(СН ) 3 СНСН (СН ) 2 СО-Гли-ОИ).б) Процесс ведут так же, как описаноа) 12,45 г (50 моль) бензилоксикар- выше, но используют трет-бутоксикарбобонил-(,-пролина в 50 мл обезвоженного нил-Ь -пролин вместо бенэилоксикарбонилхлористого метилена добавляют к раство- -.-пролина и метиламино-изопентилиру 7,05 г (55 моль) изовалеральдегид ден вместо изовалеральдегид- й, й-диме- -ЯК-диметилгидразонаи 6,21 г(55 ммоль) тилгидразона, Получают два изомера А этилиэоюианоаюетата в 50 мл обеэои Б трет-бутоксикарбонил- Ь -пропил- Щ- воженного хлористого метилена при О С, -( М -метил) -лейюилглиюинэтилового сложСмесь перемешивают при комнатной тем- ного эфира(Бос-Ь-Рго-й(СН )-СНСН СН(СН )д 3 СО-Гли-ОЯ). щенном растворе безводного аммиака в обезвоженном метаноле (150 мп) и раствор выдерживаютпри 0 С в течение трех дней. Смесь упаривают при пониженном давлении, остаток хроматографируют иа колонке с силикагелем, используя хлороформ-метанол (95;5) в качестве элюента. Зпюируют по отдельности два изомера А и Б укаэанного в заголовке соединения.Изомер А; пФ г(СУСИ ): д 0,97 (о(;= 6 гю), 2,28 ( Я, 6 Н), 5,00 ( , 2 Н), 7,29 ( 5, 5 Н).Иэомер Б: ИФг (СЭССЮ); д 0,95 (Ф 3 = 6 гю, 6 Н), 2,25 ( 6 Н), 5,10 ( 6, 2 Н), 7,29 ( 8 5 Н)б) Осуществляя процесс аналогично, но применяя вместо бензилоксикарбонипе) Осуществляя процесс аналогично, но используя смесь этиламина с изобути ральдегидом вместо иэовалеральдегидо 45 -М, й -диметилгидраэона, получают бензилоксикарбонил-ь -пролил-ХИ,-( Й -етил)-валилглицинэтиловый сложный эфир(2 Рго К й(СН ) (СН)СН СН(СН ) 3 СО Гли ИН )а) 8,33 г (17 ммоль) промежуточного соединения - бензилоксикарбонил-).- -пролил Ж ( И -диметиламино)лейюилглицинэтилового сложного эфира, описанного в примере 1 а, растворяют при 0 С в насы- о Изомер А:с(3 = +318 (с = 1, диме- пег(СБСЕ)1 до 9(ьН)1.24 (ЗН), 1,40 (9 Н), тилформамид, ЯМР спектр пг) (СЭССЮ): 20 (5 Н), 3-5 (11 Н)7,8 (1 Н). о 1,0 (М 6 Н), 1,3 (Ф, 3 = 7 гю,ЗН), Б г) Процесс осуществляют вышеописан,4 (59 Н), 3,1 (6; ЗН), 4,2 (ф = ным способом, но используют свесь 1,1- = 7 гц). Изомер Б: д.3 = -76,7 ф(с =-диэтилгидразина с ацетальде гидом вмес= 1, диметилформамид), масс-спектромет- то иэовалеральдегидо- й, М -диметилгидрария (3 п/е): 247 (М ), зона. Получают бензилоксикарбонил. -в) Процесс ведут, как описановпп. а 3 -пролил-Ш,-( Й -диэтиламино)-аланилглии б но используют трет-бутоксикарбо- иинэтиловый сложный эфир нил- Ь -пролин вместо бензилоксикарбонил- Р-Ь-Рго- КГЙ(СН )дЗСН(СН)СО-Глн-ОК)в (. -пролина и смесь формальдегида с изо- д) Используя смесь 1,1-ди(н-пропил)- бутиламином вместо изовалеральдегид- -гидразина с иэобутиральдегидом вместо - я, К -диметилгидразона. Получают трет- иэоваперальдегида-йй-диметипгидраэо 3-бутоксикарбонил-( -пролил-(И -изобутил)- на, и условиях, описанных в п. а, попуча-глиюилглициновый сложный эфир ют бенэипоксикарбонил-Ь-пролил- ЭЬ-М ди(н-пропил)амино-валилглиюинэтиловый сложный эфир(Н- РГО-И(СН. 1 СНГСН СН(СН., .С-,11,иа) РаствОР безводнэго хлоРистого вэдэ- в пэРэшэк с безвэ,.11 сх 1 зтлс:Нзтат 1 ирода в безводном этилацетате ( 1,5 н, раствэрптель отделяют декчнтаце.,:,55 мл, 82,5 ммоль) дэбавляют пэ кап- чеш;ый эсадэк растворяют в АезвэдпэмЛЯМ В теченИЕ 40 Мин К ЭХЛажДЕННОЙ В МатаНЭ,Е, РаСТВОР фКЛЬТРУЮТ И :НТ" Ч 1 ПКледяной бане суспензии кзэмера А трет- упарква 1 с 1 в вакууме, Остаток 11 рэ.,1,вас.-Аутоксикарбонил- ). -пролил-( И -метил)- СМЕСЬЮ ЭТ 1 ЛОНЭТат-ПЕТрОЛЕйнь:И З,051.с .;.Е 1,пейцилглицинамида (6,56 г, 16,5 ммоль), дкэтиловый эфир-петрэлейпый зфкрописанного в примере 26, Смесь переме- (1: 1) к дизткловым эфиром. ОсадокШИВаЮт ПРИ тЕМПЕРатУРЕ ЛЕДЯНЭй баНИ В СУШат В ВНКУУМЕ Нац П 5 ТИО 1;Ксс.чктечение 30 мин и при кэмнатнэй темпе " фосфора к Гидратом Ок 1 с кал 1;я сратуре в течение 17 ч. Раствэритель от- получают изомсер А хлоргкдратаделяют декантацией, твердый продукт пе- ПРОНИ.-с сф 1 сМЕТПЛ .Р 1 пссЛ .111 ЦИс,ремешивают с одновременным исткранкем аМИДа Обшэй фЭРМУЛЬ () с ГА -С ЯН Я СН 2 СН(СН) Ч И 1 М ГЛИ(НРГО М АН СН 1( Н с Н,-,,1,й масс-спектр ( т/е): 298 (М+).Аналогично, но используя вместо изомера А трет-Аутоксикарбонил- (, -пролил- -Э). -( М -метил) пейцилглицинамида эквивалентное количество изомера Б трет-АутОКСс 1, 1, соо;ИЛ 1- ссоти - ,с с., 1 Э 1 тпГлкцина;,кда ( ОП 11 Санн ГО В ПрМЕсЕ 2 61. Попучают;зомеэ Б:".поргидэата Ь -ропкп- -33. -(1 -метил; - лейципгпицппамида общей формулы (1),ГА Я -СН Л -СНСН(СН );В -МН ",М-) ЛИ(Н-Ь-рго-М-(СНЛСНСН СН(СН ) 1 Са-;1-МНэ масс-спектр (1/е): 298 (М+).6) Осуществляя процесс так же, как описано в примере 36, нэ используя вместо изомера А трет-Аутоксикарбэнил- , -55 -пролил-(Й -метил) пейцилглицинамиДа ЗКВ 11 ВаЛЕНТ 11 ОЕ КОЛИЧЕСТВО ТРЕТ-АУстонсикарбонкл- ь -пролил-( М -кзобутил) -Гпицклглкцинамкда пэлучаОт хлэргидрат Ьс-пролил-( ь -изэоуткл) глкцклГлицинампда эбщеи формулы ( 1 ),ГДв Я-СН,СН(СН,),Р,-Н;Ч-ЪИ.,Я; ИН(Н-Ь- Р;О-М-ССН СН(СН. СН,СО-М-МН,),ч--прэлил-Рь -( и -д пмет илам инэ ) лейцилглицинзтиловогэ сложного эфира эквивалентное количество изомера А тэет-бутоксикарбонил- Ь -пролил- З. -( М -метил) лейцилглицинэтиловэгэ слэжнэгэ эфира, эпксанного в примере 16, пэлучааот изэмерА трет-Аутоксикарбонил- ь -прэлИ 1 - 2 в-(1 -метил) -лейцилглицинамида 1 Бос-Ь-Ро-(СН )СН 1 СН СН(СН. .-1;О-Гли-В), т.пл. 130-132 С, Щ =+ 50,2 (с= 2, в диметилформамиде).Аналогично, но кспользуя вместо бензилоксикарбонил -пролил.1 Ь (Йдкметиламино) лейцилглкцинэтклового сложного эфира эквивалентное копичество изомера Б трет-Аутоксикарбонил- .1 ролил.1( -мет 1 л лейцилглицинэтилового сложного зфкра (описанного в примере 16), получают изомер Б трет-бутоксикарбонил- -Ь -пролил-Ы (М -метил)пейцилглицин- амида В) ОС;сссссотссля 5 1 ОЭ 11 ЕСС анадЭГКЧНЭ НЭМят 5 ВсЕСсЭ АЕПЗПЛЭКСИКНОАЭН 11- -(, -пропил- З-(Я-димет 1 ламино) лейцил- ГЛКНИНЭТИЛОВС ГСс Слэжногс эфира ЗКВКВНЛЕНТЯЭЕ Кэ, ИсЕСТВЭ ТОЕТ-бУТЭКСКс.ООЭНИЛ Ь 11 ОЛ 1 Ц 1-1 с КЗЭОУТКЛс -ГЛПЦИПГЛИЦН зтиловэгэ сложна э эфира (эписаннэгэ в примере 1 в), пэс.зют тжт ЗтокспкарбэНил- -1 эсэлсЛ-( 1 с -.ИзэоуТ 1 Г 1) ГЛ 11;Гс 1У Гки(Н Ь Рго ХГХ(СН 1 д 1 СН Н,На) Раствор 4,45 г (9,07 моль) бензилоксикарбонил- . -пролил Ь -( М -диметиламинэ) -лейцилглицинэтилового сложного эфира, описаннэго в примере 1 а, в1 н. метанольчом (23 мл) растворе гидрата экиси натрия (12,25 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем добавляют 50 мл насыщенного раствора хлористого натрия, выпавший эсадэк этфильтрэвывают, фильтратохлаждают до ОС и подкисляют 13,3 мл1 н. соляной кислоты. Продукт экстрагируют хлороформом, Органический экстрактпромывают вэдой до нейтрального рН, высушивают над сульфатом магния и упаривают в вакууме, в результате чего получают бензилоксикарбонил- )4-пролил-(,-( М -диметиламино) - лейцилглицин;Итг(СЭССЮ ): СР О,93 (6 Н), 2,53 (6 Н), 258,6 (1 Н),б) К перемешиваемому раствору3,477 г (7,5 ммэль) бензилоксикарбонил-пролилЬ -( М -диметиламино)-лейцилглицина, описанного в примере 4 а, в З 014 мл обезвоженного диметилформамида,поддерживаемэго в сухой атмосфере, при-15 С дэбавляют 1,19 г(7,5 ммоль) И,Х-карбонилдиимидазола, Смесь перемешиваоют при -15 С в течение 30 мин. К полученной смеси. прибавляют раствор(1,685 г,7,5 ммоль) хлоргидрата моно-(трет-бутоксикарбонил) -1,4-диаминобутана и(1,26 мл) триэтиламина в 6 мл обезвоженного диметилформамида, смесь перемешивают 40при комнатной температуре в течение20 ч и упаривают. Остаточный продуктупаривания растворяют в 200 мл этилацетата и промывают 10%-ным раствором бикарбоната натрия, а затем 20%-ным раст 45вором хлористого натрия,Органический слой отделяют и высушивают над сульфатом магния и упаривают,Остаток хроматографируют на колонке с50силикагелем, используя в качестве элюента смесь хлороформ-метанол-пиридин ( 96.";5;1), В результате элюируют по отдельности два изомера - А и Б бензилоксикарбонил- Ь -пролил,1) Ь-( М -диметиламино)- 55(ф 1 =- 6 гц, 6 Н), 143 ( с; 9 Н)5,10 (5, 2 Н), 7,30 (3, 5 Н).в) Смесь 2,26 г (3,58 ммэль) изэмера А бензилоксикарбонил- .-пролил-ПЬ-( Й -диметиламинэ) лейцилглицин-трет-бутоксикарбониламино н-бутиламида, описанного в примере 4 б, и 0,250 г 5%-нэго палладия на древесном угле, которыйслужит катализатором, в 50 мл уксуснэйкислоты перемешивают в атмосфере водорода в течение 21 ч с использованием сосуда гидрэгенизации, соединенного с колбой, где находится 1 00 мл 4 н, растворагидрата окиси натрия. Катализатор отфильтровывают, фильтрат охлаждают в смеси ледвода и добавляют к нему по каплям 12 мл1,6 н. раствора хлористого водорода вобезвоженном этилацетате. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч в отсутствии влаги, Растворитель упаривают в вакууме и следы уксусной кислоты удаляют азеотропной перегонкой с обезвоженным бензолом. Остатокподвергают хроматографическому разделению в колонке, наполненной декстраном споперечными связями между молекулами,который служит адсорбентом (эерЬадех ЬН-ЛО),используя для элюирования метанол, Зпсатобесцвечивают активированным углем, фильтруют и упаривают. Остаток перемешивают= - 43,6 (а = 2, в диметилформамиде),Найдено, %; С 47,10; Н 8,5517,55; С 15,24.С, Н К О .2 НСР,Вычислено, %: С 47,70; Н 8,52;М 17,60; Сб 14,86.Осуществляя процесс аналогично, нэиспользуя вместо изомера А бензилэксикарбонил- (. -пролил-Щ -( К -диметиламино) -лейцилглицин-трет-бутоксикарбониламино-н-бутиламида соответствующий изомер Б указанного соединения (описанныйв примере 46), получают изомер Б целевого соединения:А = -18,6 (с = 2,в диметилформамиде) .Найдено, %: С 4688; Н 8,50;Я 17,51.(описаннэгэ в примере 1 е) и вмес э .; эргидрата моно-(трет-бутоксикарбэнпл) -, -.- -диаминэбутана эквивалентное кэличес 1 в; метиламина, пэлучают хлэргидрат Ь -пролил, -( М "-этил) -валилглицинметилампна общей фэрмулы ( 1 ),е) Аналогично, но применяя вместо бензилоксикарбонил -пролил-З ( М -диметиламино) -дейцилглицинэтИловэго сложного эфира эквивалентное количество бензилоксикарбонил- . -пролил- Э. -( М -этилвалилглицинэтилового сложного эфира) А Й 1 НСНЯ СН(СН)1 3 Н 1У-Гли(Х-Ь-Рго-ГМ(СН СН )СН 1-СН(СН ) -Гли-ХНСН)П р и м е р 5. Альтернативный спо- лил-.-(й -метил)-лейцилглицинэвэгэ с:,.Ожсоб синтеза трет-бутоксикарбонил-(.-про- З 5 ного эфира(изомер Б, описанный в примере 1 б). няют, остаток подвергают хроматэграфцРаствор 4,2 г (15 ммоль) соединения ческому разделению на колонке с силикаХ - Ь-( И -Ме)-Лей-ОН, (2,96 г,15 ммоль) О гелем, испэльзуя в качестве элюанта смес:2,4,5-трихлорфенола и (3,09 г, 15 ммоль) хлороформ-этилацетат (85;15). Элюат упадициклогексилкарбодиимида в 21 мл обез- ривают и получают соединение фэрмулывоженногэ хлористого метилена перемещи- Е - М Й -Ме) -Лей-Гли-ОЕ 1,ар (СХСвают при -15 С в течение 1 ч и затем . д 0,93 (6 Н), 1,27 (ЗН), 2,85 (ЗН),при комнатной температуре в течение 2 ч, 45 3,97 (2 Н), 4,20 (2 Н), 5,17 (2 Н),Полученный осадок удаляют путем фильт,34 (5 Н),рации и фильтрат упаривают, Получают-1, -( М -Ме)-Лей-ОТср. 9С Н ц О 2 НСР Н О.1 Ч ЗВ 6Вычислено,; С 46,62; Н 8,64;й 17,20.г) Аналогично, но применяя вместо 1. -пролил-З 1.-( М -диметиламино лейцил глицинэтилового сложного эфира эквивалентное количество бензилоксикарбонил - Ь -пролил-Э.-( К -диэтиламино)-аланилд) Осуществляя процесс аналогичным образом, но используя вместо бензилоксикарбонил- -пролил-Э),-( М -диметиламино)-лейцилглицинэтилового сложного эфира эквивалентное количество бензилоксикарбонил--пролил); М-ди(н-пропил)-аминэ- -валилглицинэтилового сложного эфира Раствор- Я й-Ме) -Лей-ОТср50 (15 ммоль, описанного выше) в диметилформамиде (10,5 мл) добавляют к 2,09 г (15 ммоль) раствора хлоргидрата глицинэтилового сложного эфира и 1,92 мл ( 15 мОль) Й этилмэрфэлина В 35 мл 55 диметилформамида при 0 С, после чего смесь перемешивают при 0 С в течениео30 мин, а затем при комнатной температуре в течение 20 ч. Растворитель отгоглицинэтилэвэго сложнэгэ эфира ( эписаннэго в примере 1) и вместо хлэргидрата мэнэ-(трет-бутэксикарбэнил)-1,4-диаминобутана эквивалентнэе кэличество диэтиламина, пэлучают хлэргидрат Ь -прэлил- -3), -( И -диэтиламинэ)-аланилглициндиэтилачида общей фэрмулы (1 ),(эписаннэгэ в примере 1 д) и вместо хлэргидрата моно-( трет-бутэксикарбонил ) --валилглицин -н -пропиламида общей формулы ( 1),Раствор бромистоводородной кислоты в уксусной кислоте (30-32%, 4,9 мл, 24 моль) приливают к раствору соединения Е - ), -(М -Ме) Лей-Гли-ОБЕ (2,9 г, 7,96 ммэль), описанного выше, в 4,7 мл уксусной кислоты и полученную смесь перемешивают при кэмнатной температуре в течение 4,5 ч. Растворитель упаривают в вакууме, остаток подвергают повторной азеотропной перегонке со смесью бензол-метанол, Полученный остаточный продукт высушивают в вакууме над гидратом окиси калия. В результате получают гидрэфурана ( 300 мл) и диметилфэрмамиГН-Ь-(Н-Ме)-Лей-Глл-ОЕ 12 НВ де (70 мл). Этот раствор охлаждают дооРаствор Бэс- . -Про-ОН (0,645 г, 0 С и добавляют к нему К -этилмэрфэ 3 ммоль), 1-оксибензотриазола(0810 г, дин (642 мл, 50 ммоль), после чегэ6 ммоль) и дициклэгексилкарбоциимида 5 прикалывают раствор дициклогексилкарбо(0,680 г, 3,3 ммоль) в эбезвоженнэм диимида (10,3 г, 50 ммоль) в эбезвэжентетрагидрэфуране (15 мл) перемешивают ном тетрагидрофуране (80 мл), Реакционоо опри -5 С в течение 1 ч, а затем при 25 С ную смесь перемешивают при О С в течев течение 1 ч, Смесь охлаждают до 0 С ние 1 ч, затем при комнатной температуи обрабатывают раствором сэединения 10 ре в течение еще 1 ч, фильтруют и раст",Н, -( М -Ме) -Лей-Гли-ОЕ 1 3 НВ) ворители удаляют в вакууме. Остаточный(3 ммоль, описанного выше) и М -этил- продукт растворяют в этилацетате и эк-мэрфопина (0,384 мл, 3 ммоль) в эбез- страгируют водой и насыщенным растворомвоженном тетрагидрофуране ( 14 мл) при хлористого натрия. Остаточный прэдукт,0 С. Эту смесь перемешивают при 00 С 15 полученный после сушки и упаривания этилв течение 30 мин, а затем при комнатной ацетатных слоев, подвергают хрэматэгратемпературе в течение 40 ч, Полученный фическому разделению в колэнке с силикаосадок этфильтровывают и фильтрат упари- гелем ( 1 кг, хлороформом с сэдержаниемвают в вакууме, Остаточный продукт раст% метанэла), После упаривапия элюентаворяют в этилацетате (100 мд). Раствор 20 получают соединениепромывают охлажденным льдом, 1 н, Е-НМ-Ме)Лей-Э-Ала-оме;пщг (СЭССЮ,:раствором лимонной кислоты, водой, 5%- К 2,86 (ЗН, ), 3,74 (ЗН, с; ) 5 2 ным раствором бикарбэната натрия и на- (2 Н,Б ), 7,42 (5 Н, ),сыщенным раствором хлористого натрия. Смесь бензилэксикарбонил- Ь -(-меОрганическую фазу высушивают над суль- тил)-пейцил-аланинметиловэгэ слэжнэ 25фатом магния и упаривают. Остаточный го эфира (10,5 г), описанного вьлце и)продукт пэдвергают хрэматографическому 5%-ного палладия на древесном угле(1,0 г)разделению в кэлонке, наполненной сиди- в уксусной кислоте (120 мл) с солянойкагелем, используя в качестве элюента смесь кислотой (2 н 28,8 ммоль) перемешиваЗВхлорэформ-этилацетат-пиридин (50:50:0,1). ют в атмосфере водорода в течение 24 ч.В результате получают целевое соединение- Катализатор отфильтровывают фильтратз-этип)-лейцилглицинэтиловый сложныйэфир, Н -( М -Ме)-Лей-З-Ала-ОМе НСс,. Растг 5о1 э, = -73,1 (с = 1, в диметилфэрм- вор этэго соединения (28,8 ммэль), 13амиде). Этэ соединение, полученное ука- -гидроксибензотриазэда ( 3, 9 г 28, 8 ммод),занным способом, идентично изэмеру Б бензилэксикарбонил- , -пролин-и-нитрэфетрет-бутоксикарбонил- -пролил-З) -( й - нилового сложного эфира ( 10,7 г,-метил) пейцилглицинэтилового сложного 28,8 ммоль) и М -этилморфолина (3,7 мл,эфира, который получен способом, описан,8 ммоль) в диметилформамиде (70 мл)сным в примере 1 б. перемешивают при 0 С в течение трехП р и м е р6, Пролил-ь -( й -метил)- дней. После упаривания растворителей в-лейцил-ЛЭ-аланинамид вакууме полученный остаточный прэдукт(Н-Рго-Ь-(В-Ме)-Лей-А а-МН 1растворяют в этилацетате и промываютгводой, насыщенным раствором бикарбонаб ф рмул (1)та натрия, водой и насыщенным раствором хлористого натрия. Органическую фагде-СН;Й -СН СН(СНзу высушивают над сульфатом магния иупаривают, Остаточный продукт пэдверга -ИН,; У-Э-АлО, ют хроматографическому разделению в наполненной силикагелем колонке, используяБензилоксикарбэнил- Ь -( й -метил) пей- в качестве элюента смесь хлороформ-мьцин (14,0 г, 50 ммоль), Э-аланинме- танол (98;2), Элюаты упаривают и полутиловый сложный эфир (7,0 г,50 ммоль) чают бензилоксикарбонил-Ь-пролил-и 1-оксибензотриазол (13,5 г,10 ммоль) 55 -(й -метил)-лейцилЭ-аланин-метпловыйрастворяют в смеси обезвоженного тетра- сложный эфир13 1 н. раствор гидрата окиси натрия(3,02 мп) добавляют по каплям при перемешивании к суспензии бензипоксикарбониппропип-), пейципгпицинэтипового сложного эфира(1,0 г, 2,24 ммопь) в метаноле (5,6 мп) при 0 С, раствор перемешивают при 25 ОС в течение 20 мин. Затемраствор разбавпяют насыщенным раствором хлористого натрия (25 мп), охлажден-,оным до О С, и подкиспяют 1 н. растворомсоляной кислоты (3,3 мп). Смесь переомешивают при 0 С в течение 20 мин. Осадок отфильтровывают, промывают холодной водой, высушивают в вакууме над пятиокисью фосфора и перекристаппизовывакт из смеси метанол-вода. Получают соединение Е - 1-Про-Ь-Лей-Гпи-ОН, т.пп. 163165 СЕаЗ = -55,8 (с = 2, в диметипформамиде ),Смесь последнего соединения (9,48 г,22,6 ммопь), хпоргидрата моно-(трет-бутоксикарбонип)-1,4-диаминобутана (5,06 г,22,6 ммопь), й -этипморфопина (28,9 мп),1-оксибензотриазопа (6,1 г, 45 ммопь)и дицикпогексипкарбодиимида (4,98 г,24,85 ммопь) в диметилформамиде (225 мл),перемешивают при ООС в течение 1 ч, аозатем при 25 С в течение 4 ч, Полученный осадок отфильтровывают и маточникупаривают. Остаточный продукт растворяют в этипацетате, осадок отдепяют ифипьтрат промывают 10%-ным растворомбикарбоната натрия, водой, 1 0%-ным раствором лимонной кислоты и водой, Органическую фазу сушат над сульфатом магнияи растворитель отгоняют. Остаточный продукт подвергают хроматографическому разделению в колонке, наполненной сипикагепем, используя в качестве эпюента смесьхпороформ-метаноп-пиридин ( 98: 2: 1) . Эпюат упаривают и получают соединение 15 Осушествпяя процесс аналогично, используя в качестве исходного продукта бензипоксикарбонип)-(й -метил) пейцин вместо Ь -энантиомера, описанного выше,-ь-Рго-ь-лей-Гли-йн(сн2Р 0,92 (6 Н), 1,42 (9 Н), 5Смесь последнего соединения (7,4 г, 12,55 ммопь) и 5%-ного паппадия на древесном угле (0,505 г) в уксусной кислоте (50 мп) перемешивают в атмос 145 Н бо Пю" (СЭССЮ):,16 (2 Н), 7,36 (5 Н),фере водорода в течение 5 ч с испопьзованием сосуда гидрогенизации, соединенного с колбой, в которой находится перемешиваемый раствор гидрата окиси натрия 6322Последнее соединение (1,7 г, 3,68 ммоль)орастворяют при О С в метаноле, насыщенном аммиаком (85 мп), и выдерживают при 0 С в течение трех дней. Растворитепь отгоняют и остаточный про дукт выкристаппизовывают из смеси изопропиповый эфир-ацетон. В результате попучают бензипоксикарбонип-). -пропил-Ь - -( Й -метил) лейцип-апанинамидС Ъ-Ь-Йро-Ь-Сй-Ме 1 леи-Э-Ала-Кн 1102т. пп, 148-150 оС,Результаты элементарного анализа, формула соединения:Найдено, %: С 61,67; Н 7,82;8 12,66.С 2 НЯ 4 М 4 05Вычислено, %: С 61,86; Н 7,67;М 12,55,Смесь описанного выше соединения Е- Ь- Про- Ь-(К-Ме) Лей-Ало- МН2 (1,29 г, 2,9 ммопь) и 5%-ного паппадия на древесном угле (013 г) в уксусной кислоте (20 мп) с соляной кислотой(1 н, 2,9 мп) перемешивают в атмосфере водорода в течение 20 ч. Катапизатор отфипьтровывают и фипьтрат пиофипизуют. Получают требуемое соединение в виде хпористоводородной кислой соли, Остаточный про- ЗО дукт обрабатывают методом ионообменной хроматографии в колонке, наполненной карбоксиметипцеппюпозой (%йа 11 папп СМ), используя 0,04 н. водный раствор ацетата аммония. Эпюат подвергают пиофипизации и получают нужное соединение в виде киспой уксуснокиспой.сопи,ц(.1 = -77,625(с = 1, в 1 о-ной уксусной кислоте),В результате повторной пиофипизации 40последнего соединения получают требуемоесоединение в виде свободного основания:11 вг(СЭССЮ ); Р 0,90 ( б, 6 Н), 1,22(4 н 250 мл). Смесь фильтруют и фильтрат млаждают в ледяной бане. Затем прикапывают раствор хлористого водорода в обезвоженном этилацетате (4,6 н., 16 мл) и смесь перемешивают при 10 С в течеоние 30 мин, а затем при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитепь упаривают, остаточный продукт растворяют в бензоле и растворитель отгоняют. Остаточный продукт растворяют в метаноле, до 1 О бавляют активированный уголь, фильтруют и растворитель упаривают, получая требуемое соединение в виде кислой хлористоводородной соли. Последнее соединение15 растворяют в 0,1 н. растворе соляной кисСмесь этилового эфира трет-бутоксикарбонил- ь-пропил- Э-( й -метиллейцилглипина ( 1, О г, 2, 34 ммоль изоме ра А, описанного в примере 1 б) и безводного этигь лена (20 мл) выдерживают в бутыли под давО пением при комнатной температуре (25 С) ЯМР-спектр (СЗСО): д 1 4 (синглет,9 Н),3,05 (синглет,ЗН),0,75-1,25 (мультиплет,9 Н).Последнее соединение (400 мг,0,938 ммоль) растворяютпри 0 Свтрифторо 35уксусной кислоте (10 мп) и раствор перемешивают в течение 30 мин, Реакционнуюсмесь упаривают досуха, Остаток растворяют в воде и раствор пропускают через4 Оионообменную колонку, заполненную Амберлитом ХК(ОН) (5 мл, 2 мкг/мл),Элюат лиофилизируют и получают указанное в заголовке соединение. Аминокислотный анализ; глицин 1,0, пролин 0,92.По альтернативному варианту элюатрастирают с 0,1 и. раствором серной кислоты (при рН 4,5) и раствор лиофилизируют с образованием указанного в заголовке соединения в виде сульфата. Электрофорез продукта, полученного после гидролиза соли, показывает четыре положительных нингидринсвых пятна (это соединениеэнантиомер с Э-лейцином),формула изобретения1. Спосэб получения трипептидов общей фсрмуль лоты и обрабатывают методом ионээбменной хроматографии с использованием анионообменной смолы (ВсММ 1" СЯА 540) в форме ацетата, Элюаты упаривают, остаточный продукт смешивают (с одновременным истиранием) с эфиром и нетролейным эфиром, сушат и получают требуемое соединение в виде кислой уксусной соли.Найдено, %: С 52,13; Н 8,70;Й 1 4, 35 У СН С 02 Н 23, 2 еС Н Я 0 2 СН СО Н 1/2 Н 0 (484,6).17 33 Е В 3 2 2Вычислено, %; С 52,04, "Н 8,73;Й 14,45; СН СО Н 24,78П р и м е р 8. 1.-Пролил-З-(И -метил)-р пейцилглицина общей формулы (Х ),в течение двух суток, Затем упаривают досуха и остаток кристаллизуют из смесиэтилацетат-гексан, Получают изомер Аэтипамида трет-бутоксикарбонил- ), -пролил-) -( Я -метил) -лейцилглицина где К- водород, метил или диметиламиногруппа;йводород или группа формулыг СнгС"(С"згВ - аминогруппа, этиламинэгруппа или группа формулы ЯН(СН 2) МНУ - глицил,или К- метил; й - группа фэрмупы2СН СН(СН)р; Вз - аминэгруппа, У-З- -аланилпри условии, что, если Р - водород или диметиламиногруппа, то Р - этиламиногруппа или группа формулы МНЩ ИН о т л и ч а ю щ и й с я тем, что провэ= дят деблокирование соответствующегосоединения общей формулы, Р -МК)СН СО1 . где К, К и У имеют указанные вьпле1значения;Р - бензилоксикарбонил ипи трет бут.фоксикарбонил;Б- аминогруппа, этиламинэгруппа или группа формулы МН(СН )1 МН-Воспри условии, что, если йк - группа формулы ИН(СН )ЙН-Вос, то Рф - водород.Заказ 6215/1 Тираж 517 ПодписноеПНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раущская наб., д, 4/5 филиал ППП "Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 2, Способ по п.1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что деблокирование осуществляют гидрированием в присутствии катализатора, содержапего благородный металл, если К-бензилоксикарбонил, или в умеренно кислой среде, если К, -трет-бутоксикарбонил или Р- - группа формулыЯН(СМ ) ХН - 3 дс,Источники инфорглации, принятые вовнимание при экспертизе5 1, Шредер Э., Любке К, Пептиды, ч, 1,М., "Мир,1967 с. 112.