Способ получения антибиотика эндруцидина

Союз СоветскьеСоциалистицескивРеспублик оударстврннын-комете ссср но делам нзоБретеннй н открытейИностранцы отоо Шибата, Эйджи Хигашиде, Казунори Хатан Комеи Мизуно, Мицуко Асан и Мазаяки Мир(72) Авторы изобретения Иностранная фирмаТакеда Кемикал Индастриз, Лтд"(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИК ЭНДУРАЦИДИНАмеют ная; спороверхность рас ный сол сдсцв В - 5477 вь а, Ялония. Хранитриленд США под Штамм Ятгер делен из почвы ся в коллекции номером АТСС- Культурально обрусев Ъпв Нисиноми культур М 21013. м огические признаки. глицерин или про очника азота мож сахароэу, декстрин еле, В качестве и зовать пентозу, соатоку, мясной эк анические или нео В среду можно лактозу,сеянное ж евую муку, куку- тракт, аммониевую ганические соедине.добавлять небольшие но испол рузную и соль, орг иия азота Изобретение относится к области медицины в частности, к фармацевтической промышленности.Антибиотик эндурацидин новый и способ ег получения не описан.Целью изобретения является получение анти биотика эндурацидина, обладаюшего сильным антимикробным действием в отношении грам. положительных и кислотоустойчивых бактерийЭта цель достигается тем, что штамм Ятгер. тогпусев Фцпусдсцв В - 5477 (АТГС - 21013) или штамм Бсгертотусев 1 цпд 1 сйсцв В - 5477 (АТСС - 21014) выращивают в аэробных условиях на питательной среде, содержашей источн ки углерода, азота и минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта и при необходимости переводят антибиотик в Форма спорофор спираль ы иовал 0,9 х 1,6-1,1 мкм. П спор шероховатая,Агар Чапека. Вегетативный мицелий обильныйпространенный, проникает в среду, бесцвет. Воздушный мицелий обильный, порошкообразный.Растворимый пигмент отсутствует.Глюкозный агар Чапека. Вегетативный мицелий обильный, распространенный, бесцветный.Воздушный мицелий обильный, порошкообраз.ный, бледный (Рдж Х 1, 1 н- д), обратный -теплый, темно-желтый. Растворимый пигмент -нет или слабо-желтый.Глюкозо-аспарагиновый агар. Вегетативныймицелий обильный, ровный, бесцветный. Воздуш.ный мицелий обильный, светлый, оливково.сеф.рый (Рдж Ы, 23 - д) до бледного или иногдагрязно-белый, обратный - кремневогь цвета(Рдж ХЧ 1, 19 - Ф) или бесцветный. Растворимый пигмент отсутствует.Бульон. Вегетативный мицелийобильный, плаваюший на поверхности среды, небольшое количество бесцветного мицелия падает на дно,тивный ингредиент.Водный раствор экстрагируют н-бутанолом. Экстракцию водным раствором соляной кислоты и н.бутанолом повторяют несколько раз до получения бутанольного экстракта, содержащего большое количество активного ингредиента.3 633488 4 33488 11 633488рают и в нем доводят рН до 8,0 4 н, раство.ром едкого натрия, затем сразу же добавляют100 л и-Бутанола. Смесь перемешивают и даютотстояться до образования двух слоев. и Бутанольный слой промывают 50 л дистиллированной воды, затем дважды экстрагируют по 15 л1/200 н. раствором соляной кислоты. Солянокислые вытяжки соединяют и доводят их рНдо 8,0 4 н. раствором едкого натрия, затемсразу же добавляют 10 л н-бутанола, Смесь пе 10ремешивают и дают отстояться до образованиядвух слоев. Бутанольный слой отбирают и дважды промывают дистиллированной водой по 1/3объема бутанольного слоя.К промытому таким способом бутанольному 13слою добавляют дистиллированную воду в количестве 1/4 объема, Смесь упаривают под пониженным давлением при наружной температуре не выше 70 С, Концентрат подвергают такой же обработке как влажный мицелий по 20данному примеру, получают около 0,5 г сырцапорошка с активностью 5000 - 7000 ед/мг против 8 тдр 1 уОсоссця зцгецв,П р и м е р 4. 100 л кислого раствора,содержащего активный ингредиент, полученныйэкстрагированием и-бутанолом аналогично примеру 3, пропускают через колонку, заполненную1 кг активированного угля, причем колонкапредварительно промывается соляной кислотой,и получают 70 л почти бесцветной фракции, со- Едержащей активный ингредиент, Эту фракциюпропускают через колонку, заполненную 42,5 лАмберлита Зй с получением слабощелочноговодного раствора, Этот раствор упаривают присравнительно низкой температуре при понижен- Зном давлении, К концентрату добавляют и-бутанол, емесь перемешивают для переноса активного ингредиента в бутанольный слой. К бутанольному слою добавляют эфир, не содержащийперекисей, при этом выпадает активный ингре,циент; либо к бутанольному слою добавляют1 н, раствор соляной кислоты до рН 4,5, затемего упаривают или вымораживают, Соответственно получают 1,8 г порошкообразного веществас активностью 7500 - .10000 ед/мг против 81 арЬ,ацгеца или 1,9 г порошкообразного вещества сактивностью 7500-10000 ед/мг.П р и м е р 5. 1 г сырого порошкообразного вещества, полученного по примерам 3или 4, растворяют в смеси 500 мл метанолаи 1 мл 1 н. раствора соляной кислоты. Послепропускания раствора через колонку, заполнен.ную 10 г активированного угля, обработанно.го смесью 4 мл О. и. слпяидй киепоты и 1 йй мп Пример 7. Вдвеколбына 2 л вливают 500 мл среды, содержащей,%: 2 глюкозы, 3,5 кукурузной патоки, 1,5 углекислого каль.ция и воду. В среду вносят мутант 81 г, 1 цп. Г 1 РГР 11 с Й - чс 17 7 / А Г/ г ) 1 й 1 ЛЪСВоздушный мицелий обильный, белый, прозрач. ная среда, растворимый пигмент отсутствует.Глицериново. бульонный агар, Вегетативный мицелий обильный, распространенный, бесцветный. Воздушный мицелий обильный, порошкообразный; обратный - серовато-желтый (Рдж ХХХ, 19 - ). Раство имыи пигмент отс тств ети сорбозу, суорозу, раффинозу, зскулин. сук. цинат натрия, цитрат натрия.Проявляет антибнотическую активность в отношении грамм. положительных бактерий.Штамм 8 тгертогпусее 1 цпдсдсца В - 5477 (АТСС) получек из штамма В - 5477 ЛтСжЫ 1 г нри охлаждении. Осадок отфильтровывают и. промывают эфиром. Получают 500 мг гидрохло. рида с активностью 15000 ел/мг против 8 тарИ, ац геохи.Порцию осадка (гидрохлорида) 100 мг растворяют в 100 мл 20%-ного водного метанола, затем этот раствор пропускают через колонку, содержащую 5 мл Амберлита ЭВ. Колонку элюируют метанолом, элюат упаривают, получа. ют концентрат, который вымораживают, промы. вают ацетоном и эфиром.Получают 50 г белого порошка (свободная форма антибиотика) с активностью 10000 - 15000 ед/мг против 8 тарЬ. ацгецв. П р и м е р 6. 16 л бульона, полученного по примеру 1, фильтруют для отделения 4 кг влажного мицелия. Этот мицелий экстра. гируют трехкратным объемом 70%.ного раствора водного ацетона при перемешивании в течение 3-4 ч. К ацетоновой вытяжке добавляют 280 г активированного угля (Сирахаси-А, Япония) и 280 г Гифло Супер Цел (Джонс Мэн,вилл Сейсл Корп., США), смесь перемешивают в течение 1 ч, После фильтрования уголь промывают десятикратным объемом ацетона, затемдесятикратным объемом метанола по объемуфипьтрата. Обработанный таким образом угольдважды экстрагируют двадцатикратным объемом(по объему угля) подкисленного водного ацетона при перемешивании в течение 3 ч. Экстракты соединяют и доводят рН до 5,затем растворитель выпаривают и оставляют1,5 л водного раствора. Этот раствор пропуска.ют через колонку с 200 мл Амберлита 38.45(Н), затем перегоняют под пониженным давлением для удаления растворителя. После добавления 5 л воды рН доводят до 8,5 и триждыэкстрагируют и-бутанолом в количестве 1/3объема раствора. Вуганольиый экстракт промывают водой и упаривают под пониженным давлением до остатка в 500 мп водного бутанола.К последнему добавляют 5 л эфира и получаютосадок, который отфильтровывают и сушат сполучением 4 г порошкообразного сырца эндурацидина с активностью 10000 ед/мг против8 тарЬ, ацгвю,14 Составитель Г. СмирноваТехред О, Андрейко Корректор С. Шекмар Редактор Н. Потапова Тираж 5 Ф Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб д. 4/5Заказ 6417/50 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 13мала, 1 кукурузной патоки, 1 соевой муки, 0,3 хлористого натрия, 0,5 пептона, 0,5 утлекислого кальция и воду (рН 7,0), в которую вносят посевной материал,Инкубирование ведут при 28 С при переме. шиванни и скорости аэрации 30 л/мин. Максимальная активность культуральной жидкости наблюдается после 78 - 90 ч инкубации при рН среды 7,84 и равна 1500 ер/мл. Формула изобретенияСпособ получения антибиотика эндурацидииа,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что штаммБтгертоп;усеа топяс 1 йсца В - 5477 (АТСС - 21013)э или штамм Зтгертотусев Ъпд 1 сЫ 1 соа В - 5477(АТСС - 21014) выращивают в аэробных уело.виях на питательной среде, содержащей источни.ки углерода, азота и минеральные соли, с по.следующим вьщелением целевого продукта в,10 при необходимости переводят антибиотик в соль,3 3633489ББ Васй : И 0119309 Ва 1 е: 13/07/2001 ИыгпЬег ой радея : 2 Ргестз.оыя с 1 осцгпегг : ЯУ б 33488 Мех босцгпегг 1 : ЯБ б 33490ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕН ИЯК ПАТЕНТУ(22) Заявлено 23. 04,75(21) 2127438/28-12 Союз СоветскихСоциал истицескихРеспублик 23) Приоритет) 30,04.74 сударстеениви комитетсвета 1 йинистроа СССРпо делам изобретений(45) Дата опубликования описания 1 а.1 т.т шард Зьтмунд Янчи Иностранцы Тадэуш филипчак, Р и Марян Бартчакн Пахоль Иностранн альны Остродэк Бапредпри авч о-Р оз МАТЭКС НР) Ц Заявитель 4) УСТРОЙСТ ЕСКОЛЬЦЕВОГО ЕНИЯ в камере 1 разряж 8 поступают разд рые воздушным ви шими в камеру по и потоками, формирПои создании в нее по патрбк ные волокна, кото создаваемым входя налам 7 воздушным ени чен а ют(43) Опубликовано 15.1 Изобретение относится к текстильной промышленности и касается оборудования дляполучения пряжи бескольцевым способом.Известно устройство для бескольцевогопрядения, содержащее неподвижно смонтирова нную и подсоединенную к источникуразряжения цилиндрическую прядильную камеру с тангенциальными каналами длч ввода воздуха и патрубком для подачи волокон и головку с пряжевыводным каналом,установленную на противоположном источнику разряжения конце камеры 1.11,Недостаток известного устройства состоит в сложности обслуживания его, поскольку патрубок для подачи волокон выполнензакрытым и в нем не предусмотрены средства для обеспечения доступа во внутрьнего для удаления скапливающихся воло.кон и сорных примесей.Целью изобретения является упрощениеобслуживания,Цель достигается тем, что предлагаемоеустройство имеет пластину, свободно установленную на верхней части камеры, приэтом в патрубке вдоль него выполнен срез,а пластина размещена в плоскости среза оевы М ашын Влукенничых прижата к патрубку посредством пружиНа чертеже изображено устройство, разУстройство содержит цилиндрическую прядильную камеру 1, смонтированную неполвижно и полсоелиненпую олним концом к патрубку 2 источника разряжения 1 не показан 1. На противоположном конце камеры посредством втулки 3, прикрепленной винтами 4 к камере 1, установлена толовка 5 с осевым пряжевыводным каналом 6, В средней части камеры 1 выполнены тангенциальные каналы 7 для ввода воздуха. Над каналами 7 камера 1 имеет патрубок 8 для подачи волокон. На втулке3 свободно установлена пластина 9, прижатая пружиной 10 к патрубку 8. В патрубке вдоль него выполнен срез 11, в плоскости которого размещена пластина 9.