Способ определения перекисных соединений

. и др. ХемилюминТехника, 1966, с, 52 тся к аналитичеь использовано вмикробиологичеДля определения используют расрастворена навеорганичегрупп,есцентн- 54. ичн ГОСУДАРСТБЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ .,ВИДЕТЕЛ Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в химической, микробиологической, пищевой и фармацевтической промышленностях, медицине и других отраслях народного хозяйства при определении наличия перекисных соединений в различных субстратах.Известны способы обнаружения. перекисных соединений в различных субстратах с помощью соединений йода, железа, хрома, серебра, ванадия, свинца и др,Известен колориметрический способ обнаружения органических пероксидов, в котором используется состав, содержащий 1070-ный водный растер люминала и йод. В этом составе люминол играет роль восстановительного агента, а йод используется в качестве красителя, по изменению окраски которого яо времени судят о наличии в анализируемой пробе пероксидов. а по интенсивности ее оценивают их концентрацию.Недостатком данного способа обнаружения является отсутствие у него универсальности, так как с помощью него проводят определение только пероксидов. Кроме того, реакции мешают такие ионы, как хром, титан, никель, свинец, медь, марганец и железо, Точность определения низка из-эа не.Ы 1749795 А 1(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛНЫХ СОЕДИНЕНИЙ(57) Изобретение относской химии и может быхимической, пищевой иской промышленности.перекисных соединенийтвор люминола, в которомска гемина. б ил,достаточной специф ости и чувствительности состава.Цель изобретения - повышение универсальности, исключение влияния ионов металлов на реакцию, точности определения Щ пероксидов.Поставленная цель достигается тем, что для определения перекисньтх соединений в Я различных субстратах используют состав, .представляющий собой 0,10,8 (,-ный рас- . твор люминола в щелочи (рН = 10-13.8), в, одном литре которого растворена навеска4 .гемина массой 0,410 мг. Непосредствен-Дь ное определение перекисных соединений проводят с помощью счетчиков фотонов.В предлагаемом составе по сравне- . нию с известнымиспользован не водный, (Л а щелочной раствор люминала, Этим пол-, ностью исключено отрицательное влияние ионов хрома, титана, никеля, свинца, меди,3 марганца и железа на реакцию поскольку в а щелочной среде они находятся в гидратированном состоянии.При этом гечин используется не в качестве красителя, а в качестве катализатора распада перекисных соединений по свобод. но радикальному механизму по следующей схеме ракции переноса электрона (гомолиэ) гемового железа1749795 и последующим реакциям рекомбинаций 5 Ф Но+ Нгог- Нго+ Ног Н 02+ НОг -+ Н 202+ 02.108 процессе последних реакций рекомбинаций свободйых радикалов, приводящих в конечном итоге к образованию кислорода и воды, образуются возбужденные короткоживущие соединения типа ас социированного и неассоциированного Вае-дер-Ваальсовского комплекса кислорода, обладающие высокой избыточной энергией, достаточной для трансформации ее молекулами люминола в световую по реак ции И 25 .фС ного стакана 20 снимают дозатор 12 и извле кают из него пробирку 19, Наливают в нее0,5 мл люминолгеминового состава и помещают ее снова в подвижный стакан 20. На стакан устанавливают дозатор 12 и в его полость 23 наливают 0,1 мл пробы анализи руемых разведений перекиси водорода, Дозатор 12 закрывают крышкой 11 и нажимают на нее рукой, При этом стакан 20 перемещается до упора вниз и фокусируется там рычагом 18, Этот рычаг замыкает 40 контакторы блока 3 отключения напряжения, и оно подается на все блоки анализатора (фиг. 1), В это время центр отверстия 13 подвижного стакана 20 совпадает с центром чувствительного элемента фотоэлектронно го умножителя 16. состоящего из корпуса 14и крышки 17. В момент, когда стакан опуСтился до упора вниз. в крышке 11 из-за нажатия на нее рукой деформируется резиновая прокладка 22, в результате чего ана лизируемая проба перекиси водорода ввиде капли вводится через отверстие 13 в дозаторе в пробирку 19 с люминолгеминовым составом, Перекись водорода вызывает свечение ламийолгеминового состава, ко торое ФЭУ преобразуется в электрическийсигнал. Этотсигнал поступает на вход аналого-цифрового преобразователя 5 (фиг. 1), где он преобразуется в цифровой код и по-, дается на блок 6 индйкации измеряемого сигнала и на блок 9 для регистрации с по 3Гез + НО 2 Еег+ Н О Рв Н 202-фее,+ НО + НО 2ф 2 С Вф+02, (02)2 СгЯОН ОН 2СОО020212- 2 Ь ОСОО Таким образом, люминол выступает не в роли йосстановительного агента, а в роли трансформатора избыточной энергйи комплексов кислорода в световую. При этом кинетические характеристики процесса светообразования и накопления коротко- живущих соединений кислорода очень близки друг к другу, что позволяет определять концентрацию перекисных соединений с высокой точностью,Причем трансформация избыточной энергии короткоживущих соединений кислорода молекулами люминола в световую позволяет использовать для ее регистрации счетчики фотонов с высокой разрешающей способностью и точностью,. П р и м е р, Проводили обнаружение пероксидов в диэтиловом эфире и оценивали их концентрацию. Для этого сначала определяли нижнюю и верхнюю,границы эффективных концентраций люминола в щелочи и гемина в щелочном растворе люминола при различных рН. Готовили разведения перекиси водорода концентрацией 110 нУоль. Готовили по 10 мл люминола в щелочи (КОН) концентрацией 0,05.0,1 и 0,30.0,85 при рН = 11,5 и в каждом из них растворяли навеску гемина массой 0,01 мг. Готовили к работе анализатор. На фиг. 1 приведена блок-схема анализатора для осуществления способа; на фиг, 2 - схема блока преобразования сигнала в электрический; на фиг, 3-5 - графики зависимости измеряемого сигнала от концентрации перекиси водорода; на фиг. 6 - калибровочный график,Способ осуществляется следующим образом,От сети напряжение подается на блок 1 питания (фиг, 1), откуда оно подается на блок 2 преобразования напряжения, С блока 2 преобразованное напряжение подается на блок 3 отключения напряжения, на блок 8 регистрации времени измерения сигнала и блок 7 управления, Блок 4 имеет корпус 15 и отверстие 21.Открывают крышку 11 блока 4 преобразования светового сигнала в электрический (фиг. 2). Поворотом вправо (влево) с подвижмощью внешних устройство 10, С помощьюданного анализатора проводили анализразведений перекиси водорода и по,полученным данным строили график вкоординатах: величина измеряемого сигналв-концентрация перекиси водорода в анализируемой пробе (фиг. 3), Анализ графикапоказал, что эффективная концентрациялюминола в щелочи лежит в пределах 0,10,8 ф. Затем готовили разведения люминола в щелочи концентрацией 0,1-0,8 ф с рНсреды, изменяющейся в диапазоне от 9,0 до14,0 с интервалом между соседними показателями рН, равным 0,5. В приготовленныхразведениях растворяли навескугемина 15массой 0,01 мг и анализировали с помощьюэтого состава разведения перекись водорода. По полученным результатам анализастроили график в координатах: величина измеряемого сигнала-концентрация перекиси 20водорода (фиг. 4). Анализ графика показал,что рН среды для разведений леминола в .щелочи лежитвдиайазоне 10-13;8,Готбвили по 10 мл разведения люминола в щелочи концентрацией О;15 ь с рй 11,5 25и в них растворяли навески гемина массой0,010,04 и 0,1.0,15 мг. С помощью приго. товленных составов на том же устройствепроводили анализ перекиси водорода и по. полученным данным строили график в тех 30же координатах (фиг, 5). Анализ полученно, го графика говорит о том, чтоэффективная,лежит в пределах 0,04-10 мг,На втором этапе определяли пероксиды 35в диэтиловом эфире и оценивалиих концентрацию. Для этого готовили состав следующим образом. Брали стеклянную емкость спритертой пробкой обьемом 150 мл, налива" ли в нее 100 мл 0,150 о-ного раствора люминола в щелочи (рН 12,8) и растворяли в.немнавеску гемина массой 0,04 мг.В цилиндр йз стекла с притертой пробкой емкостью 25 мл наливали 15 мл эфира и4 мл свежеприготовленйой охлажденной. 45дистиллированной воды. Цилиндр закрывали пробкой и энергично встряхивали в тече ние 5 мин, после чегона анализатореопределяли всмеси пероксиды. Посколькущиктически невозмОжнополучить стандартньте пробы одних й тех же пероксидов, токонцентрацию их.в субстратах определялив эквивалейтах относительно перекиси водорода. Для этого готовили растворы перекиси водорода концентрацией 1;10 нМольи анализировали их на анализаторе с по-мощью приготовлен ного люмйнолгеминового состава; Йо полученным данныманализа Ь координатах. величина измеряемого сигнала - концейтрация перекисйводорода строили калибровочный график (фиг,6), Этот график в последующем использовался для определения пероксидов в анализируемых субстратах.Использование предлагемого составаи способа определения перекисных соедийений в субстратах имеет следующие преимущества.полностью устранено влйяние ионов тяжелйх металловйа результаты определения .перикисных соединений. в субстратах;точность определений перекисных соединений в субстратах зависит толькоот погрешности счетчиков фотонов;предлагаемый состав и способ позволяют автоматиэирбвать процесс определенияперекисных соединений, а его внедрениезависит только от желания закаэчика, поскольку аппаратура и реактивы отечественного проиэводства;-":состав и Способ позволяют определятьразные перекисные соеДинения, а шкаласчетчика фртонов может быть откалибрована в единицах их концентрации,Формула изобретенияСпособ определения перекисных соединений, включающий взаимодействие анализируемой пробы с люминолом ирегистрацию свечения полученного раствора, о т л. и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюповышенйя универсальноСти и точности засчет исключения влйянйя ионов металлов нарезультаты анализа, анализируемую пробув виде капли вводят в О; - 0,8-ной растворлюмйнола в щелочи с рН 1 О,8, в литрекоторого растворена навеска термина массой 0,04 - 10 мг, и измеряют ийтенсивностьлюминесцейций рэствора, по ееличине ко.торой йроводяг определение йе 1 эекисныхсоединений, оцениваяих кбнценграцию вэквивалентах Огноситбльно йерекксй водо-:рода,1,749795 ок ентуааиЯ пеРеиисы вьд"Роуэн, ьИоль о О,о оВелхчи 4,О ,Г И,О аа РБ разведчик лю МЗ,д й 5 нова з шело749795 Данко Редак Корректор С,Черни водтвенно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 1 Пр оставитель С,Рыжи ехред М.Моргентал каз 2591 Тираж В Н И И Г И Гоуда рст вен но го комитета по и зоб 113035, Москва. Ж, РауПодгисноетениям и сткрытиям при ГКНТ СССРская наб., 45