Способ получения 1-карбацефалоспориновых соединений

60-243 ЦЕФ цикли- получе- инений ф в1 - С - н СОО Изобретлучения нофалоспоринпредставлякого спектртивные прбактерий. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Эли Лилли энд Компани (ОЯ)(72) Джон Эдвин Манрой (ОЗ)-лы ние относится к способу по вых производных 1-карбаце овых соединений, которые т собой антибиотики широ действия, особенно эффек отив грамположительных Целью изобретения является способ получения новых соединений в ряду цефалоспориновых производных, обладающих более высокой активностью,1683499 АЗ где.йх - Н, трет-бутилоксикарбонильная, аллилоксикарбонильная или тритильная защитные группы; ВУ - нИзший алкил, бензил, хлорбензил, карбоксиметил, причем карбоксигруппа может быть защищена в форме бензгидрилового сложного эфира, или аминоэтил, где аминогруппа может быть защищена трет-бутилоксикарбонильной группой; йр - фенил или . бензотиен-ил;В - Н, трет-бутоксикарбонильная или алли- " Я локсикарбонильная защитная группа, или 4-зтил,3-диокси пи пера зинока рбонил;Й 1 - Н или метоксигруппа; й 2 - Н, А-ОН, С 1 - С 4 алкоксил, аллилоксил, бензилоксил или СНз, которые являются антибиотиками. Я Цель - разработка способа получения более активных соединений. Получение ведут деэтерификацией соединения ф-лы , где Й 2 - трет-бутил или аллил. 2 табл. П р и м е р 1. 7 Р -(2-тиенилацетиламино)-3-метоксикарбонил-карба-цефем-карбоновая кислота.Смесь трет-бутилВ-трет-бутилоксикарбониламино-метоксикарбонил-карба- цефем-карбоксилата (180 мг; 0,4541 ммоль) и 2 мл трифторуксусной кислоты перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. К раствору добавляют диэтиленовый эфир, выделяется осадок в виде белого твердого вещества. Смесь переносят в,пробирку и помещают в центри 1683499фугу, Верхний слой жидкости декантируют, добавляют свежий диэтиловый эфир, смесь обрабатывают ультразвуком и вновь центрифугируют. Эфир декантируют и твердую 7 Р -амина-метоксикарбонил-карба-цефем-карбоновую кислоту растворяют в смеси 1 мл ацетонитрила, 2,5 мл тетрагидрофурана и силилируют ВЯТКА(337 мг; 1,31 ммоль; 53 мкл). Твердое образование растворяют и раствор охлаждают до 0 С, К охлажденному раствору добавляют пиридин (52 мг;0,6548 ммоль; 41 мкл), после чего добавляют 2-тиофенацетилхлорид(53 мг). Смесь перемешивают на холоду и вливают в смесь 40 мл диэтилового эфира.и 20 мл воды. Смесь сначала дважды экстрагируют порциями по 40 мл диэтилового эфира, а затем продукт экстрагируют из смеси 15 изопропанола в хлороформе. Экстракт хлороформа высушивают над сульфатом магния, отфильтровывают и выпаривают под вакуумом с получением продукта в виде твердого вещества, Продукт перетирают три раза со смесью диэтиловый эфир/гексан и сушат с получением 45 мг целевого соединения.Вычислено, : С 52, 74; Н 4,43; й 7,69; Я 8,80;С 1 бН 5065Найдено, ; С 52,53; Н 4,50; й 7,49; Я 8,62. П р и м е р 2, 7 Р-(2-фенил-аминоацетиламино-метоксикарбонил-карба-цефем-карбоновая кислота;Аллил 7 Р-(2-фенил-аллилоксикарбоииламиноацетиламиио)-3-метоксикарбонил -1-карба- цефем-карбоксилата в виде белого твердого вещества (266 мг; 0,5346 ммоль) в 3 мл ацетонитрила, содержащего 1 мл диэтилового эфира, добавляют трифенилфосфии (28 мг; 0,1069 ммоль) и диацетат палладия (5,25 мг; 0,0214 ммоль) и смесь перемешивают в течение 10 - 15 мин при ОС. К охлажденному раствору затем добавляют гидрид три(и-бутил)олова(318,9 мг;1,099 ммоль) и смесь перемешивают 20 - 30 мин, нагревая раствор до комнатной температуры, К смеси добавляют концентрированную соляную кислоту (1,6 мкл) с помощью микрошприца, вызывая осаждение продукта в виде белого вещества, Смесь разбавляют 2 мл ацетонитрила и 2 мл диэтилового эфира в переносят в пробирку центрифуги. Суспензию центрифугируют и верхний слой жидкости декантируют. Белое твердое вещество промывают центрифугированием и декантироваиием три раза с использованием 25 мл смеси (1-1) ацетонитрила и диэтилового эфира и три раза пор 50 55 П р и м е р 3. 7 Р-(2-фенил-аминоацетиламино)-3-этоксикарбонил-карба-цефем-карбоновая кислота.Аллил 7 Я 2-фенил-аллилоксикарбоииламиноацетиламиио)З-этоксикарбонил -1- карба-цефем-карбоксилата (199,2 мг;0,3894 ммоль) в 5 мл сухого ацетонитрила, содержащего 2 мл дизтилового эфира, добавляют трифенилфосфин (20,4 мг; 0,07788 ммоль) в диацетате палладия (3,82 мг; 0,015576 ммоль) циями по 25 мл диэтилового эфира. Твердый продукт сушат в вакууме при комнатной температуре с получением 165 мг целевого соединения в виде беловатого твердого ве щества (выход 82,65).Полученный продукт очищают следующим образом: в 15-милилитровой пробирке центрифуги 123,5 мг (0,3307 ммоль) продукта смешивают с 3 мл ацетонитрила.10 К смеси добавляют 1 н.соляную кислоту спомощью пипетки и смесь взбалтывают до тех пор, пока твердое вещество большей частью не перейдет в раствор, Затем смесь центрифугируют и прозрачный верхний 15 слой жидкости отделяют отнежелательноготвердого осадка и переносят с промывочной порцией ацетонитрила в другую пробирку центрифуги. Прозрачный раствор обрабатывают 1,5 н. гидроокисью аммония до тех 20 пор, пока рН недоводятдозначения 4-4,5.Прозрачное масло отделяют от раствора и маточную жидкость отбирают пипеткой в другую пробирку центрифуги. К маслу добавляют 7 мл ацетонитрила и масло 25 отверждается. Твердое вещество дваждыпромывают порциями по 8 мл ацетонитрила и центрифугируют и промывочные растворы добавляют к маточной жидкости, Из маточной жидкости осаждается вторая 30 часть продукта. Первую часть продукта промывают 8 мл этилового эфира, центрифугируют и эфир декантируют. Твердый продукт затем сушат в вакууме при комнатной температуре с получением 92,3 мг первой час ти вещества в виде белого твердоговещества. Чистота вещества на этой стадии составляет 87. Вторую часть вещества промывают таким же способом, центрифугируют и сушат в вакууме при комнатной 40 температуре с получением 13 мг продуктав виде белого вещества. Чистота продукта составляет 97. Получают также третью часть вещества (5 мг). Первую и третью части вещества обьедиияют и промывают как 45 описано с получением трех частей: перваячасть 84,4 мг(чистота 93); вторая часть 13 мг (чистота 98 О) и третья часть 6,0 мг (чистота 95, 168349940 45 50 55 и смесь перемешивают в течение 20 - 25 мин. Затем реакционную смесь охлаждают до 0 С и добавляют с помощью шприца к реакционной смеси гидрида три(н-бутил)олова 233 мг; 0,8005 ммоль), Реакционной смеси позволяют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 20 мин. С помощью шприца при перемешивании к реакционной смеси добавляют концентрированную соляную кислоту (12 н, 0,0667 мл), Из желтого мутного раствора осаждается мелкий белый осадок. Смесь энергично перемешивают в течение нескольких минут и затем переносят в 40- миллилитровую пробирку центрифуги, содержащую несколько миллилитров смеси ацетонитрила и диэтилового эфира (1:1). Твердое вещество центрифугируют и маточную жидкость декантируют. Твердый продукт промывают и верхний слой жидкости декантируют три раза порциями в 25 мл смеси ацетонитрила и диэтилового эфира. Промытое твердое вещество сушат в вакууме при комнатной температуре с получением 144 мг промытого целевого соединения. Продукт перекристаллизовывают следующим образом. 144 мг продукта вносят в 40-миллилитровую пробирку центрифуги и добавляют 3,3 мл ацетонитрила, С помощью пипетки в пробирку центрифуги добавляют один эквивалент 1 н.соляной кислоты и пробирку взбалтывают до тех пор, пока большая часть твердого вещества не переходит в раствор. Нерастворенное коричневатое твердое вещество центрифугируют и верхний слой жидкости переносят в другую пробирку емкость 15 мл, В эту пробирку центрифуги добавляют по каплям при взабалтывании хлористый аммоний до тех пор, пока рН раствора не достигнет величины 4 - 4,5. Из раствора кристаллизуется белый продукт, смесь центрифугируют и маточный раствор декантируют, Твердое вещество три раза промывают порциями по 7 мл эцетонитрила и один раз 7 мл диэтилового эфира и после каждой промывки центрифугируют, причем промывочную жидкость добавляют к маточному раствору, Промытое вещество (первую часть) сушат в вакууме при комнатной температуре при комнатной температуре с получением 119,8 мг целевого соединения, После добавления промывочных жидкостей к маточному раствору осаждается вторая часть продукта. Вторую часть продукта промывают и центрифугируют по описанной методике, используемой для первой части продукта, с получением 16,6 мг целевого соединения, Общий выход составляет 136,4 мг, Чистота продукта первой и второй частей составляет 97.П р и м е р 4. 7 Р-(2-(2-а мин отиа зол-ил)- 2-метоксииминоацетамидо-ацетил-кар ба(детиэ)- 3-цефемкарбоновая кислота.К раствору 60 мг (0,1647 ммоль) аллил7 В -(трет-бутилоксикарбониламино)3-ацетил-ка рба(детиа)-3-цефем-карбоксилата в 5 мл этилового спирта добавляют 32 мг 10 (0,1679 ммоль) моногидрата пара-толуолсульфокислоты и смесь выпаривают при 45 С на роторном испарителе. Когда тонкослойная хроматография показывает только одно новое пятно (10-ный метиловый 15 спирт - этилацетат), то остаток дважды обрабатывают 6 мл толуола и выпаривают после каждой обработки. Продукт, аллилР-амино-ацетил-карба-(детиа)-3-цефем- карбоксилат толилсульфонилатной соли, 20 растирают с 3 мл диэтилового эфира и сушатпод вакуумом, Получают 71,5 мг продукта,Раствор 78,2 мг (0,274 ммоль) 2-(2-эллилоксикарбониламинотиазол-ил)2-метоксииминоуксусной кислоты в 2 мл хлористого 25 метилена охлаждают до 0 С и добавляют48,1 мг(0,274 ммоль) 2-хлор,6-диметокси,3,5- триазина и й-метилморфолина (0,274 ммоль), Смесь перемешивают в течение 1 ч и дополнительный эквивалент М-метилморфолина 30 (0,274 ммоль) добавляют к смеси, после чегодобавляют раствор аллил-амино-эцетил-карба(детиа)-3-цефем-карбоксилат толилсульфонилатной соли (полученной как описано) в 1 мл хлористого метилена. Смесь перемешивают в течение 20 ч, нагревая до комнатной температуры, Реакционную смесь вливают в смесь 15 мл этилэцетэта и 40 мл 1 н. соляной кислоты, органический слой отделяют, промывают последовательно 40 мл 1 н, соляной кислоты, дважды порциями по 35 мл воды, дважды порциями по 36 мл насыщенного водного раствора бикарбонэта натрия, сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают до масл ообраз ного твердого остатка. Остаток (150 мг) хроматографируют на 10 г силикагеля с использованием смеси 60;40 (по объему) этилацетат:гексан, и фракции, содержащие продукт (тонкослойная хроматография),объединяют и выпаривают досуха, Получают 70 мг продукта й-ацилирования, эллилф -2-(2-аллилоксикарбониламинотиэзол-ил) -2-метоксииминоацетэмидо-ацетил- карба(детиа)-3-цефем-карбоксилат. К раствору 51 мг(0;096 ммоль) указанного диблокированного 3-ацетил-карба-цефема в 1 мл . хлористого метилена и 1 мл диэтилового эфира добавляют 9,95 мг (0,381683499 45 50 55 Продукт, 200 мг (0,410 ммоль), растворяют в 3 мл диметилформамида и 300 мг (1,23 ммоль) пивалоилоксиметилиодида и 1,30 мг (0,144 ммоль) М-метилморфолина .добавляют к раствору, Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и затем вливают в смесь 50 мл этилацетата и 30 мл 1 н. соляной кислоты. Органический слой отделяют, дважды промывают порциями по 25 мл 1 н, соляной кислоты и один раз 30 мл насыщенного раствора бикарбоната натрия, сушат над сульфа том магния, фильтруют и выпариваютдосуха. Получают 240 мг сырого пивалоилоксиметилового сложного эфира. Сырой продукт хроматографируют на 20 г силикагеля, элюируя смесью (40;60 по объему) эти лацетата и гексана, Фракции, содержащиепродукт, объединяют и выпаривают с получением 155 мг (выход 63 ф) пивалоилоксиметилового сложного эфира.Пивалоилоксиметиловый сложный эфир 15 добавляют к 4 мл смеси (1:1) трифто уксусной кислоты и хлористого метилена и раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор выпаривают досуха и остаток растворяют в диэти ловом эфире, Когда продукт осаждается, тоэфир декантируют и твердое вещество добавляют к смеси хлороформа и воды. рН смеси доводят до 7 фосфатным буфером и слой хлороформа отделяют и сушат над 25 сульфатом натрия. Высушенный слой хлороформа выпариваютдосуха и остаток растворяют в диэтиловом эфире. Эфирный раствор хлористого водорода добавляют к реакционному раствору до завершения осаждения 30 соли, Соль отделяют и промывают центрифугированием и перекристаллизовывают из хлористого метилена путем разбавления раствора гексаном. Перекристаллизованную соль промывают диэтиловым эфиром и 35 сушат. Получают 70 мг(выход 620 ) целевогосоединения в виде беловатого твердого вещества,Аналогично получают и другие соединения формулы40 оя,-с-нн,-с(0)-4осооя 1Полученные 1-карбацефалоспорины подавляют рост микроорганизмов. Эти вещества представляют собой антибиотики широкого спектра действия, которые особенно эффективны против грамположительных бактерий.В табл.1 приведены минимальные ингибирующие концентрации (МИК) предлагаемых соединений в отношении инфекционных бактерий. Эти величины ингибирующих концентраций получены в стандартных испытаниях вне организма, которые осуществляют методом разбавления агаром,В табл.2 приведены сравнительные данные для соединений, полученных по предлагаемому и известному способам.1 б 83499 10 Численные значения, приведенные в табл.2, представляют собой МИК в микро- граммах на 1 мл, полученные для испытываемых соединений при помощи стандартного испытанияи ч 1 тго с разбавлением агара. В 5 качестве микроорганизмов используют стандартные испытываемые организмы, которые являются патогенными и которые, обычно используются для оценки противобактериальных свойств 3-лактамовых анти биотиков.В качесте испытываемых используют следующие соединения формулыН 11" ЕЫ ОСН 5 1 онсоонХ А где В 1 - .Ь 1- с 1. ТмхЬ 1 Н Э Ь 1 ОВ снг нн1яе, где Вх - водород, трет-бутил-оксикарбо нильная, аллилоксикарбонильная или тритильная защитные группы;20 Я- низший алкил, бензил, хлорбензил,карбоксиметил, причем карбоксигруппа может быть защищена в форме бензгидрилового сложного эфира или аминоэтил, вкотором аминогруппа может быть защище 25 на трет-бутилоксикарбонильной группой;Вр - фенил или бенэотиен-ил;Яо - водород, трет бутоксикарбонильнаяили аллилоксикарбонильная защитные группыили 4-атил,3-диоксипиперазинокарбонил;30 В 1 - водород или метоксигруппа;Я 2 - водород;А - гидроксил, С 1 - С 4-алкоксил, аллилоксил, бензилоксил или метил,отл и ч а ю щи й ся тем, чтосоединение35 общей формулы (1), где В 2 - трет-бутил илиаллил, подвергают деэтерификации,Соединение Таблица 1 Данные ИИК икг/лл соеднения Организм ЗсарЬу 1 ососсиз аегенз Х 1, 1 4 2 БсарЬу 1 ососсиз ерЫегз 181 з 222 4 4 Есгерсососсиз руоЕеоез О 125 0015 0,125 0,015 0,015 О,ООЕ 0,008 С 203 0,125ЕС 14 1 4 0 ОЭ ЕзЬес(сЬ(а со 11 о,оэ 0,5 Х 1 еЬз(е 11 аЕа 1 ноне 11 аРгосеиз вагЕан 11 О,ООЕо,оэ 0,1250,5 О, 125 О, 125 Х 26 0,5Х 514 05 рр 15 128 0,5 о,оэ 32 эг ЕпСегоЬас 1 ег аегобелез 025 0,125 32 сэг 1 г 8 16 Соединение 1 -7 Я-(О-фенилглициламнно)-3-метокснкарбонил-нефам-карбз-(1-детиа)-4-карбоновая кислота соединение г - 78-(О-фенилглнциламио)-3-бензилоксикарбонил-цефем-карба(1-детна)-4-карболовая кислота; соединение 3 - 78-(1-феннлглнциланно)-3-н-бутнлоксикарбонил-Э-цефем-карба(1-детна)-карбонавая кислота; соединение 4 - Щ-(О-бензотиен-илглнцнлаинно)-3-иетоксикарбонил-цефем-карба-(1-детиа)-4-карбоновая кислота; соединение 5 -77-(О-фенилглнцнламнно)-3-этокснкарбоил-Э-цефем"1-карба(1-детна)-4-карболовая кислота;соединение 6 - 7 Л-(2-(2-амннотназол-ил)сии-метоксигалнноацетамидо)-Э-матокснкарбоннлцефем-карба(1-детка)-4-карбоновая кислота. 1 -с 5- -ОСНз 2 -СН 2 -ОСНЗ3 -5- -ОСН 2 СНз 4 -СН 2- -ОСН 2 СНз причем соединения 2 и 4 - предлагаемые соединения, соединения 1 и 3 - известные цефалоспориновые соединения.Как видно иэ табл.2, по МИК для соединения 2 его ингибиторные концентрации, обычно ниже, чем соответствующие ингибиторные концентрации для соответствующего соединения 1 цефалоспорина. Это особенно верно для грамотрицательных организмов в испытании с организмами, начиная от Е.СоИ, представленными в табл.2. Аналогичная картина установлена для соединения 4 по сравнению с соответствующим соединением 3 цефалоспорина. Предлагаемые 1-карбасоединения обладают более высокой стабильностью в растворе, чем соответствующее цефалоспориновое соединение, в котором атом серы находится в 1-положении.Формула изобретения Способ получения 1-карбацефалоспориновых соединений общей формулы 1о о11 С щ 4 зо Гсоовг, Редактор И.Дербак Заказ 3423 Тираж ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 ЯЬтЕе 11 а вопцетРтоЬецв шот 8 аптт Ртотецв Тп сопИапвРтоЬецв теИЕетб Составитель Л.Иоффе Техред М.Моргентал