Способ получения 3-кето -стероидов, замещенных в положении 7

% СН -СН 2- СН ССН - СН - СН - СЫ - СН12СН -С К С=СН-С 1 1 О=С-СН=С ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ССС О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ(57) Изобретение относится к замещенным стероидам, в частности к 3-кето- Ь-стероидам общей Формулы 1 где К, = С-С - алкил; Х + У разуют группу С С 11 СН С(О) или Х =ОН, а У =-(СН ) -С(О)-ОМе, при Ме = Н или щелочной металл, причем К находится в-положении, которые проявляют антиальдостероновую активность. Для выявления активности среди замещенных стероидов были получены новые 1. Их синтез ведут дегидрированием соединения 1, где Х+1 - указанная группа, с помощью, например, 2,3-дихлор,6-дициано,4- бензохинона в среде диоксана в инертной атмосфере. Полученный продукт при необходимости обрабатывают щелочью,например КОН происходит размыкание цикла с получением Х=ОН и У=СИ-СН-С(О)-ОМе). Далее также при необходимости образовавшийся продукт гидролизуют в присутствии кислоты и выделяют целевой 1. Испытания 1 показывают, что они малотоксичны и проявляют лучшую активность, чем известный продукт. 2 табл.1301317 О 10 Изобретение относится к способу получения новых производных стерои 1,4дов 3-кето- ь-стероидов, замещенных в положении 7, общей Формулы где К - С, -С 4-алкил ОО фХ и У вместе группаили15 Х - радикал гидроксил;У - радикал -СН -СН -СО Ме,где Ме - атом водорода илиатом щелочного металла,причем заместитель К, находится в о -положении,обладающих антиальдостероновой иантиандрогенной активностью.Цель изобретения - получениеновых стероидных соединений, обладающих преимуществами в фармакологическом отношении перед известнымиструктурными аналогами.П р и м е р . -Лактон 17 в гидрокси 7 с -пропил-оксо 17 о -прегна,4-диен 21-карбоновой кислоты.Растворяют в инертной атмосфере2 г-лактона 17 Ы -гидрокси 7 М -пропил в .-оксо 7 -прегн-ен 21-карбоновой кислоты и 1,44 г 2,3-дихлор 35-5,6-дициано 1,4-бензохинона в 1 О смдиоксана. Перемешивают с обратным хо-,лодильником в течение 1 ч 45 мин.Охлаждают льдом 10 мин, отсасываютосадок, прополаскивают его диоксаном .,Органический слой промьвают 10%- ным водным раствором тиосульфата натрия, а затем 1 н, раствором гидрата окиси аммония. Промьвные воды зано во экстрагируют,этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат соединенные органические слои и отгоняют досуха под уменьшенным давлением. Получают 2,8 г сырого продукта, который хрома тографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты.Собирают 1,4 г продукта, который кристаллизуют в 5 см этилового эфи3ра и отсасывают.Получают 1,3 г продукта, который можно перекристаллиэовать в изопропаноле. Т.пл. 202 С. 2Вычислено, %: С 78,49; Н 8,96.С Н С= 382, 52 .Найдено, %: С 78,6; Н 9,Вращательная способность со+32 (1; = 0,8% в хлороформе).П р и м е р 2. -Лактон 7 в (3-хлорпропил) 7-гидрокси 3-оксо17 М, -прегна,4-дне 21-карбоновойкислоты,Растворяют в инертной атмосфере3,5 г-лактона 7 с в (3-хлорпропил)7-гидрокси 3-оксо 17 о(, -прегн-ен21-карбоновой кислоты и 2,3 г 2,3-ди.хлор,6-дициано 1,4-бензохинона в17,5 см диоксана .Перемешивают с обратным холодильником в течение 3 ч, затем охлаждают льдом в течение 10 мин, отсасывают осадок, прополаскивают диоксаэном и разбавляют фильтрат 30 см этилового эфира уксусной кислоты.Промывают органический слой 0% -ным водным раствором тиосульфата натрия, а затем 0,5 н. раствором гидрата окиси аммония. Заново экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат, отфильтровываЮт и отгоня.ют досуха под уменьшенным давлением.Получают 4,7 г продукта, которыйхроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бенэол - этиловый эфир уксусной кислоты (8:2).,Собирают 2,4 г масла, которое кристаллизуют в 5 см этилового эфира.зПолучают 2,3 г продукта т.пл.о,196 С), который можно перекристаллиэовать в изопропаноле для получения 1,9 г чистого продукта. Т.пл.196 С.Вычислено, %: С 72,01; Н 7,98;С 1 8,50.С Н СОЙ = 416,97.Кайдено, %: С 72,0; Н 8,1;С 1 8,7,Вращательная способность в3 1301312 ч 30 мин, охлаждают льдом, отсасывают осадок, прополаскивают его диоксаном.ьРазбавляют фильтрат 30 см этилового эфира уксусной кислоты, промывают 10 Х-ным водным раствором тиосульфата натрия, затем 0,5 н. раствором,гидрата окиси аммония, а затем водой.Экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат, фильтруют и перегоняют под уменьшенным давлением.Получают 5,2 г масла, которое хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфируксусной кислоты (8:2). Собирают 151,8 г продукта, который кристаллизуют в эфире,Получают 1,7 г целевого продукта.Т.пл. 197 С.Вычислено,.: С 79,15; Н 8,69. 20СБНэОэ = 394,53Найдено, Х: С 79,3; Н 8,8.Вращательная способность Кп-гидрокси 3-оксо 7 О. -пропил 17 М -прегна,4-диен 21-карбоновой кислоты.2 г полученного в примере 1-лактона 17 Р -гидрокси 7 с -пропил 3-оксо 3017 сс -прегна,4-диен 21-карбоновойкислоты вводят в суспенэию в 11,2 см0,45 ч. этанолового раствора едкогокали и 11,2 смэ воды. Нагревают собратным холодильником 15 мин, перегоняют досуха под уменьшеннымздавлением и прибавляют 50 см ацетона. Охлаждают льдом и отсасываютцелевой продукт.40Получают 2 г продукта. Г,пл, 280 С.Этот продукт растворяется в теплой смеси вода - ацетон (1:1). Фильтэруют, прибавляют 70 см ацетона, леденят и отсасывают. 45Получают 1,7 г целевой соли калия в виде моногидрата. Т.пл. 280 С.Вычислено Х С 68 45 Н 8 04.С Н, КО 4 = 438,63 (продукт, высушенный при 100 С). 50Найдено,.: С 68,2; Н 8,0.Вычислено,.: С 65,75; Н 8,17,С Нэз КОО И 2 С (невысушенный) .15 эзНайдено, Х: С 65,5; Н 8,2.Вращательная способность К = 55 - -20 ф 1 О ф = 1 в воде). П р и м е р 5, Соль калия 7 о - (3-хлорпропил)17 -гидрокси 3-оксо 7 417 ос -прегна,4-диен 21-карбоновойкислоты.Действуя, как указано в примере 4,но исходя из 0,84 г полученного в примере 2 продукта, получают 0,62 г целевого продукта. Т.пл. 230 С.о,Вычислено, Х: С 60,29; Н 7,43;С 1 7,12.С Н э 4 С 1 К 04 = 473094 (сольват вы5 воды)Найдено, Х: С 60,4; Н 7,0;С 1 7,2 .К.фишер: 4,7-5,2 . воды.Вращательная способность еоР= - 22,5 + 1,5 (1 с = 1,1 . в воде).П р и м е р 6. Соль калия 7 ф -в (бут-энил)17(3 -гидрокси 3-оксо17 Ж -прегна,4-диен 21-карбоновойкислоты,Действуя, как указано в примере 4,но исходя иэ 1,16 г полученного впримере 3 продукта, получают 0634 гцелевого продукта, Т,пл. 270 С.Вычислено, Х: С 67,93; Н 7,89.С 6 Нэ К 04 1/2 НО = 459,65Найдено, Х: С 67,6; Н 7,8.К.фишер: 1,9-2,1 Х воды.Вращательная способность К- -32+1 (1 с = 1 Х в воде).ооП р и м е р 7, -Пактон 17 -гидрокси 7 М -пропил 3-оксо 17 с -прегна,4-диен 21-карбоновой кислоты.1 О,г-лактона 17 -гидрокси-К-пропил 3-оксо 17 -прегн-ен .21-карбоновой кислоты вводят в сусэпензию в инертной атмосфере в 60,5 смметанолового раствора едкого калияи 60,5 см воды. Нагревают с обратным холодильником в течение 15 мини получают раствор соли калия (раствор А), Отдельно готовят буферныйраствор, содержащий 13,6 г первичного фосфата натрия в 1,9 л воды.Прибавляют 60 см 1 н. раствора едэкого натра и доводят рН до 7,2 прибавкой 6,1 см 1 н. раствора едкого натра (раствор В).Смешивают 1,5 л раствора В с раствором А, а затеи прибавляют 50 мг 2-метил,4-нафтохинона, 100 смэ ферментативной мази АгейгоЬасйег вдшр 1 ех и О г гифлосуперцела.Суспензию перемешивают под барботированием воздуха в течение 24 ч при 33 4 1 С,Затем подкисляют при помощиэ100 см 5 н. соляной кислоты и перемешивают 30 мин при комнатной тем 13035пературе. Прибавляют 400 смз этилового эфира уксусной кислоты, перемешивают 15 мин, фильтруют на гифпосуперцеле и прополаскивают этиловымэфиром уксусной кислоты. 5Декантируют фильтрат, промывают10/-ным водным раствором тиосульфата натрия, затем водным растворомбикарбоната натрия, а затем водой.Заново экстрагируют этиловым эфиром Оуксусной кислоты, сушат, фильтруюти отгоняют досуха под уменьшеннымдавлением. Получают 9,5 г целевогопродукта.Осадок гифлосуперцела вводится заново в суспензию в 150 см метанолав течение 30 мин при перемешивании.Отфильтровывают, концентрируютфильтрат под уменьшенным давлением,разбавляют водой и экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты. Сушат, фильтруют и получают 0,6 г целевого продукта. Новая экстракциягифлосуперцела смесью хлористый метилен - метанол (1:1) позволяет рекуперировать 140 мг продукта,Соединяют три партии (т.е. 10,2 г),растворяют их в 300 см этиловогоЭоэфира уксусной кислоты при 50 С иприбавляют 41,5 г активированного 30угля, Перемешивают 5 мин и отфильтровывают на гифлосуперцеле. Отгоняютфильтрат досуха под уменьшенным давлением,35зЗабирают кристаллы в 25 см изопропилового эфира, отсасывают и собирают 9,6 г чистого продукта. Т.пл.202 С.Продукт идентичен продукту при- О мера 1.П р и м е р 8. -Лактон 17-гидрокси 7 К -пропил 3-оксо 17 К -прегна- -1,4-диен 21-карбоновой кислоты.1 г-лактона 17-гидрокси 7 Ф- -пропил 3-оксо )7-о);прегн-ен 21- -карбоновой кислоты в 1 О см безвод.Э ного толуола и 1,1 селенового ангидрида в бензоле нагревают при 00 С в инертной атмосфере. После 1 ч пере мешивания полученный раствор разбавляют 30 см этилового эфира уксусной кислоты, промывают водой и водным раствором бикарбоната натрия. Заново экстрагируют водные слои этиловым эфиром уксусной кислоты, сушат, фильтруют и перегоняют досуха под уменьшенным давлением. Получают 1,25 г маслакоторое хроматографируют на двуокиси кремния,элюируя смесью бензол - этиловыйэфир уксусной кислоты (8:2),Получают 850 мг целевого продукта. Т.пл. 202 С.Продукт идентичен продукту примера 1.П р и м е р 9.-Лактон 7 М,-бутил- 17 -гидрокси 3 в ок 17 К -прегна,4-диен 21-карбоновой кислоты.Действуя, как указано в примере7, но исходя из 2 г ) -лактона 7-бутил 17 -гидрокси 3-оксо-прегн-ен 21-карбоновой кислоты,получают 1,б г целевого продукта (чистого).Т,пл. 183 С.Вычислено, Ж: С 78,74; Н 9,15.СНзО = 396,5Найдено, Е: С 79,0; Н 9,3.Вращательная способность М 3оЭ-9,5+2 (к = 0,77 в СНС.П р и и е р О.-Лактон 7 О 6 - (2-метилпропил) 17)э -гидрокси 3-оксос -прегна-),4-диен 21-карбоновойкислоты,Действуют, как указано в примере7, но исходя из 1 г-лактона 7 в (2-метилпропил) 17 -гидрокси 3-оксо17прегн-ен 21-карбоновой кислоты, получают 0,9 г целевого продукта(первая партия),Собирают осадок гифлосуперцелахлористым метиленом, фильтруют, промывают фильтрат при помощи водногораствора бикарбоната натрия, сушат,фильтруют и упаривают досуха, получа.ют 0,2 г продукта (вторая партия),Обе партии соединяют, очищают хроматографически на двуокиси кремния,элюируя смесью бензол - этиловыйэфир уксусной кислоты (8:2). Собирают 0,925 г продукта, который можноперекристаллизовать в изопропаноле.Т.пл, 245 С.Вычислено, 7.: С 78,74; Н 9,15.С1 з С = 396, 5Найдено, Е: С 78,9; Н 9,4.-карбоновая кислота.Растворяют 500 мг 17-оксиив -пропил-оксо-)7 К-прегна-),4-диен)в -карбоксилата калия в 15 мл. воды, раствор охлаждают приблизительно до+5 С, добавляют при перемешивании 12 мл 0,1 н. соляной кислоты и продолжают перемешивание еще в течение3037 В момент проведения диуреэа животные получали водно-солевую перегрузку интраперитонеальным путемв количестве 5 мл 97-ного физиологического раствора (на одно животное)и 1 мг/кг моноацетата альдостеронав виде 2,5%-ного спиртового раствора подкожно.Затем крыс поместили по две в 10 клетку для диуреэа беэ еды и питьяна 4 ч.11 о истечении этого времени проводили усиленное мочеиспускание поддавлением на мочевой пузырь и измеряли объем собранной мочи.После тщательной промывки клеток и стеклянной посуды объем мочисоставил 50 см . В этом растворе проводили определение натрия и калиямочевого происхождения фотометриейпламени на автоанализаторе. Ингибирующее действие, 7., при введении продукта в дозе, мг/кгПродукт подкожном оральном 04 210 0,42 По примеру 4 94 80 30 81 58 69 Известный 22 По примерам 5, 10, 11 74 49 40 31 29 30 Известный Изучение антиандрогенной активности.Группы из 5 кастрированных самцов крыс в возрасте примерно 4 недель (вес примерно 100 г) получали одновременно (за две отдельные инъекции) и ежедневно в течение 8 дней подкожно испытуемый продукт и 50 мг 15 мин, Затем остаток обезвоживают, промывают водой и сушат до постоянного в са. Получают 420 мг целевого продукта, 1 М = 0,2 (метиленхлорид/этанол 8:2), т.пл. " 205 С (разл.).Вычислено, Л: С 74,13; Н 9,08 НО 1,.Найдено, Ж: С 74,1; Н 9,0; Н О 0,9.Изучение антиальдостероновой активности.Изучение проводилось с помощью теста, разработанного Кагава и Маркусом по следующей методике.Самцы крыс Яргадцеа Рач 1 еу ЯРГ 2 РРАСКЕРО весом 180 г были подвергнуты адреналэктомии эа семь дней до диуреза, анестезированы имальгеном (кетамином) интраперитонеально дозой 100 мг/кг, с момента операции и до начала эксперимента получали в качестве питьевой воды физиологический раствор.За 17 ч до диуреза животным не давали пищи, физиологический раствор заменили на воду с 5 Х глюкозы.Продукты вводили орально за 1 ч перед посадкой в клетку. Полученные результаты, выраженныев процентах ингибирования активности 1 мг/кг моноацетата альдостерона,введенного подкожно, на логарифм отношения концентрации натрия к концентрации калия (метод Кагава) приведены в табл.1,Таблица пропионата тестостерона (продукты суспендированы в карбоксиметилцеллюлоэе, содержащей 0,2 Х твина, их вводят в объем 0,5 см).Животных умертвили через 24 ч пос. ле последней обработки, изъяли простату и зафиксировали на 24 ч в 107- ном растворе формальдегида (на фиэи9 ЗоЗ ологическом растворе), потом рассекли и взвесили.Ингибирование увеличения веса, простаты, вызванного пропионатом тестостерона, рассматривается как антиандрогенная активность продуктов.Полученные результаты приведены в табл.2. 1 О 7ОХ и У вместе образуютгрУппУилиХ - гидрогруппа, а У - Сн,-СН 2-СООМе,где Ме - водород или атом щелочногометалла, причем заместитель К, находится в 06 -положении,1заключающийся в том, что соединениеФормулы 11 Таблица 2 Л Продукт 10 30 О где К имеет указанные значения,20 подвергают взаимодействию с дегидрирующим агентом и полученный продукт формулы 111 По примеру 4 10 13 Известный 9 о 1где К имеет указанные значения,при необходимости подвергают взаимодействию с гидроокисью щелочногометалла с получением соединения общей формулы 1 ЧОЙ 2 СИ СООИ,ии. форму ретен е эначени Н имеет указа атом щелочног тем при необх ислотному гид гдеМе о металл 1,4ето- Ьоложении лучения 3 Способ 45 мещенных1 тероидов,щей формул ислотного агента евого продукта Фо СР 2-ССООМе, гд е чего целевые п2. Способ по п 5 я те щ и окиси щелочногогидроокись кали НИИПИ Заказ 1163/58 Тираж 3 одпис Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужг ул. Проектная,Ингибирующее действие, 7,при введении продукта вдозе, мг Продукты, полученные по предлагае. мому способу, являются более активными, чем известные продукты, по целевой активности (антиальдостероновой).Кроме того, продукт примера 4 является меньшим антиандрогеном, чем известный продукт (антиандрогенная активность является побычным действием, которое стараются по возможнос" ти снизить). При испытаниях на токсичность в дозах 2,5-50-200 мг/кг на различных животных не обнаружено признаков клинической интоксикагде К - С -С -алкил ( 1 одимости подвергаролизу с помощью для получения цермулы 1, где У - е Ме - водород, пос родукты выделяют.1, отличаюто в качестве гидро. еталла используют