Способ выращивания микроорганизмов

(22) Заявлено 22,12,76(21) 2300690/28 1с присоединением заявки51) М, Кл. С 12 В 3/14 ееударствееый ееметет СССР в делам нзебретекел и еткрмтекДат ликования описания.02 Авторыизобретения Вишол, Э. А. ДомброН, Вытришак и Г, Я,А, Я. Лишманмс Латвийский ордена Т 71) Заявите ового Красного Знамениерситет им. П. Стучки осударственныи 54) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМО 2 Роэ яоЬт.1 т 1 в и др. питательной среде,углерода, азота и х, например ловиях аэра Изобретение относится к области мибиологии и может быть использовано ц и па сточ оде при ускорении"массы микрооИзвестны рмикроорганизм нии биоприроста и увели рганизмов.азные стимулятор ов как растительн - кукурузный экс ченный из листьев клеточный картофе осфора 3. Применение д имулятора в коросого рост биом татком и ает прНед кт, оэ,ляет Пнебо льшоиль изобретен прирост би ль вотного рит нового с кже хим мов.Поставленная цельчто в качестве стимуорганический пирофосффосфорнокислый натрийколичестве 0,0 1 - 0,2питательной среде доОптимальной выявленамулятора роста 0,1%.эффект пирофосфорнокирата, выявлен на следумикроорганизмов: бактпав Соогевсепв 310 ется тем, берут не- ример пирокоторый в лев ии этлятора ат, нап ирост биомассы сост е стимуляторы опроб гидрат ,о при осева бавляют к культуры, трация сти жах. Наиболее бл по техническойедлаг омуспос при 20 ти лся на ти являет е уц тиму лиру соб вырашивани менением стиму сульфоксида. Ст разных микроор бактериях, дрож ми роорганизмов а роста пиме ятор исследуе ято лого нат им юших классахриях РВеодото, Вас 1 Иов зоЬт. мах, в том числегрибах и актиномиах(дестиобиотинэкстракт, полуэкстракт чая,сок), так и жлизаты кератиния 111, а таа именно феррПри использов(кислотные гидрорья) происхождеческие соединения, люкозанат цинка 21 х стимуляторов ав ляе т 10-30%. ированы на дрожмети псу льфокси ца как ичестве 20 р.р.щ% ассы на 16%.звестного способа явприрост биомассы(16 Ъ) ия - увеличить и усомассы микроорганизЬБ,МсоЬос 1 егщп СосОсоГае, ГГдчоЬОС 1 Ег 1 Ов ЭоочЕОЮЕПВ,грибах АзрагрРРО 511 уЕГ, актиномицетах - АСбоо 1 пуСЕ 1 ЕЭсогеодс 1 епв.Способ вырашивания вышеперечиспенных микроорганизмов состоит в следующем.Проводят иикубацию микроорганизмовопри 28 С в течение 4 5 суток при помоши аэрации в питательной среде, со- цдержашей источник угперода, азота ифосфора, Одновременно сравнивают выходбиомассы с выращиванием микроорганизмов в контрольной среде, содержащейди мети псу иьфокс и д,15Выход биомассы в контрольной средес диметипсупьфоксидом во всех примерахпринят за 100%,П р и м е р 1, Проводипась инкубация культуры РяЕодотоиоэ БцогЕвсЕщ 2 Оо310 при 28 С в течение 5 суток на качалках (100 об./мин) в питательнойсреде спепуюшего состава: К НРО ЗН О005 3 о МЯЯС 47 НО 0003 о, янтарная,кислота 0,1%, глицерин 0,4%, смесьмикроэлементов 1 мп/и (Н ВО0,5%,фО 04 О 5/о40,04/ М.04НгО О 6% СО 45 Н о0,004%; СОВО 4 0,5%), дрожжевойавтопизат 0,001%, ( МН 4 ф 04 0,1%,Ге СЮ6 Н 0 0,000 1%, пирофосфорнокисиый натрий гидрат 0,1%, рН среды7,2-7,3.Состав контрольной средьц К НРО 4 х .ЗН 0 0,05%, Мц 604.7 Н О 0003%;ян"35тарная кислота 0,1%, глицерин 0,4%,смесь микроэлементов 1 ми/и, дрожжевой автоиизат 0,001%, (МН )г 904 0,1%,еСК6 НгО О 000 1%, диметилсульФок 4 Осид 100 рри . рН среды 7,2-7,3,Зффект стимуляции пирофосфорнокислого натрия гидрата на рост Рв 16 иогевСепЯна 3 сутки 186% (0,80 г/и), чтобольше биомассы в контрольной среде(1,60 г/и). П р и м е р 2. Проводилась инкубация Рвецдотспор ХСоогевсеоь 310о 50 при 28 С в течение 5 суток на качалках (100 об,/мин) в питательной среде следующего состава: Кг НР 04 3 НгО 0 05% МУо 047 Н О 0,003;и, янтарная кислота 0,1%, глицерин 0,4%, смесь мик 55 роэиементов .1 мп/и, дрожжевой автопизат 0,001 о, ( И Н 4) 804 О, 1%,ВС "; лНгО О,ООО.Г, пирофосфорнокиспый натрий гидрат 0,2%. рН среды 7,2-7,3,Состав контрольной среды: КгНР 04" КЭНДЗО 0,05 о, МД 5047 НО 0,003%, янтарная кислота 0,1%, глицерин 0,4" смесь микроэлементов 1 ми/и, дрожжевой автопизат О, 001"о, (М 44 ) 504 О," РЮССО6 НО 0,001%, диметйпсупьфоксид 100 р.р. тПрирост биомассы Рв, Йоогевсепя 310 в среде с пирофосфорнокисиым натрием гидратом на 3 сутки О, 79 г/п, что на 183,7% больше биомассы в контрольной среде (0,43 г/и), а на 4 сутки 120% (.1,53 г/и).П р и м е р 3. Проводилась инкубация Рьецйовопоэ Лоогевсепв 310 при 28 С в течение 5 суток на качалках (100 об/мин) в питательной среде спеюшн о состава К НР 043 Н 0 005%,ЯВО 4 7 Н 0 0,0039 о, янтарная кисдота 0,1% гпйцерин 0,4%, смесь микроэлементов 1 мп/и, дрожжевой автопизат 0,001%, (ин 4),воо,1%,гесе Н оз г 0,0001%, пирофосфорнокисиый натрий гидрат 0,1%. рН среды 7,2-7,3.Состав контрольной среды: К НР 04",ЗНгО 0,05/о, МфО7 Н 0 0,0039 о, янтарная кислота 0,1%, глицерин 0,4%, смесь микроэлементов 1 ми/и, дрожжевой автоиизат 0,001%, (Н 4)г 804 0,1%, РеСф 3 ф 6 КО 0 000 1 %, диметилсульфоксид 100 р,р.вПрирост биомассы Рв ЯоогебсЮВ 310 в среде с пирофосфорнокиспым натрием гидратом на 3 сутки 0,49 г/и, что на 116% больше биомассы в контрольной среде (0,43 г/и), а на 4 сутки 112% 1,43 г/и). П р и м е р 4, Проводилась инкубаци я Мъсоос 1 ег 1 ц ю 6 осЫсо 1 и т прио28 С в течение 5 суток на качалках (100 об,/мин) в питательной среде следующего состава: К НР 04 3 НгО 005 /о МО 47 Нг 0 0 00 Зло янтарная кислота 0,1%, глицерин 0,4%, смесь микроэлементов 1 ми/и, дрожжевой автопизат 0,0019 о, ( ЙН) 50, 0,1%,01%. рН среды 7Состав контрольной среды: КгНР 04 хЗНгО 0,05%, МЯ 304 7 НгО 0,003%, янтарная кислота 0,1%, гпицерин 0,4%, смесь микроэлементов 1 мп/п, дрожжевой автопизат 0,001/оl(ИН 4) 80 0,1%, ГеСФ6 Н О ф 0001%, диметилсульфоксид 100 р.р.е. рН среды 7,2-7,3,Эффект стимуляции пирофосфорнокисиого натрия гидрата на рост М СОСОСОРОФ на 2 сутки 200% (1,40 г/и), а на5 680 53 сутки 120." (1,65 г/и) по сравнениюс коцтроиьцой средой.П р и м е р 5. роводииась ицкуба., ВасЕЬ цЬБЕ 5 ри 28 остечение 5 суток ца качалках ( 100 об./миц)в питатеиьной среде следующего состава:КНРО,3 Н 0 0,05"о, МЦ 90,1 ( Н 00,003%, янтарная кислота 0,1%, глицерин О, 4%, смесь микроэ деме нтов 1 м и/и,дрожжевой автоиизат 0,201%, ( ЙН )90,)01%, ГЕСС Н О 00001%,рН среды 7,2-7,3,Состав контрольной среды: КР 043 Н 20 0,05%, М 50 (Н 0 0,003%,янтарная кисиота О, Го, гиицерин 0,4%,смесь микроэлементов 1 мл/и, дрожже -вой автоиизат 0,001%, ( МН)2 50,0,1%, Ге СС 6 Н 0 0,000.1%, диметиисуиьфоксид 100 р.р,т, рН среды 7,27,3,20Эффект стимуляции пирофосфорнокислого натрия гидрата на рост В.ЯоЬФЬЗна 120,4% (0,53 г/и) больше количества биомассы в контроиьной среде(100 об./мин) в питательной среде следуюшего состава: К НР 04 ЗН 0 0,05%,Мд 301 7 НО 0,003%, сахароза 6%,пептон 1%, смесь микроэлементов 1 мл/и,дрожжевой ввтолизат 0,003.%, ( МН 4)504 З0,1%, ЕС 0 6 Н 20 0,0001%, пирофосфорнокисиый,натрий гидрат 0,0 1 , рН сре-.ды 7,2-7,3.Состав контроиьцой среды: К 2 НРОг 3 НдО 0,05%, МЯО, 7 НдО 0,003%,сахароза 6%, пептон 1 %, смесьмикроэлементов 1 ми/и, дрожжевой автопизат 0001% (МН 4)д 5 04 О, 1 о,РеСЙ 6 Н 0 0,001%, диметилсульфоксид 500 р.р.ет. рН среды 7,2-7,3. Эффект стимуияции пирофосфорнокиспого натрия гидрата на рост Е. 500 чео Реп 9нв 11 ч 0,60 г/и, что на 162,1% превышает прирост биомассы в контрольной среде (0,37 г/л), а через 18 ч 1,13 г/и (11531%).П р и м е р 7. Проводилась инкубация Рвеобопова Ноогевсепэ 310 прио28 С в течение 24 ч иа качалках (100 об./мин) в питательной среде следующего состава; КНРОЗН 0 0,05%, МАЗО, 7 НО 0,0003%, са.хароза 6%, пептон 1%, смесь микроэлементов 1 ми/и,дрожжевой автолизат 0,001%, (%) 50О, 1" ГЮС 8 6 Н 0 0,0001%, пирофосфорнокисиый натрий гидрат 0,1%. рН сре.ды 7,2-7,3.Состав контрольной среды:.КПРО ЗН 10,05%, МАМБО, 7 Н 0 0,003%, сахароза6"., пептон 1%, смесь микроэлементов1 ми/и, дрожжевой автсиизат 0,001%,( Й Н 4) 504 О, 1 Ъ, ГАУССНО0,0001%, диметиисуиьфоксии 500 р,р.трН среды 7,2-7,3,Эффект стимуляции пирофосфорнокисиого натрия гидрата на рост Р.ЯООГЕ 5 СЕПВ310 на 11 ч 112,7% (0,71 г/и) посравнению с контрольной средой(0,63 г/л),а ца 18 ч 125% (1,50 г/и),П р и м е р 8. Проводилась инкубаоцияЭас 1005 эоЬЕГ 15 при 28 С в течение 26 ч на качаиках (100 об./мин)впитатеньной среде сиедующего состава:КНР 04 ЗНО 0,05%, МД 50, 7 Н 00,0003% сусио ( б = 1,028) 25 об./о,смесь микроэлементов 1 ми/и, дрожжевойавтоиизат 0,001%, ( М Н 4) 50, 0,1%,ГЕСС в 6 Н 0 0,0001%, пирофосфорнокис иый натрий гидра т О, 1%. рН сре ды7,2-7, 3.Состав контролькой средън КНРО ЗН 00,05%,МЯЛО+ " 7 НО 0,003, сусло(Д= 1,028) 25 об,%, смесь микроэиементов 1 ми/и, дрожжевой ввтоиизат0,001,ь,( МН 4) 50, 0,1%, ГесС 6 Н 00,0001%, диметилсуиьфоксид 500 р.р. 1 п.рН среды 7,2-7,3.Эффект стимуляции пирофосфорнокислого натрия гидрата ка рост В ВоЫ.1 Стбна 12 ч 133% (1,57 г/и) по сравнениюс контрольной средой (1,18 г/и), а нв15 ч 120% (1,63 г/и),П р и м е р 9.роводииась инкубаоция МсоЬас 1 егмв ГдсОсоЫщпри 28 Св течение 26 ч нв качалках (100 об./мин)в питатеиькой среде следующего состава:К 2 НР 04 ЗНО 0,05 о, МЯ 5." 7 Н 200,003%; сусло ( с = 1,028) 25 об.%.смесь микроэлементов 1 мл/и, дрожжевойавтоиизат 0,00 1 о, ( М Н,) 504 О, 1 о,ГеСС 6 Н 0 0,0001%, пирофосфорнокислый натрий гидрат 0,1%.рН среды7,2-7, 3.Состав контрольной среды.:К НРОЗН 20 0,05%,МАЗО 7 НО 0,003%,сусло 3 =1,028) 25 обЛ, смесь микроэлементов 1 ми/и, дрожжевой ввтоиизат 0,001%, ( г(Н 4 )504 0,1%,РеС 6 ф 6 НО 0,0001%, диметилсульфоксид 500 р.р емрН среды 7,2-7,3, 9 654680 10 ф о р м у и а н з о б р е т е н и я честве стимулятора используют неорганический пирофосфорнокиспый натрий1. Способ выращивания микроорганизмовю гидрат.преимущественно бактерий: ВОС 1 Иов ВИШЬ. Способ по и. 1, о т л и ч а ю щ и й 111 а, РЕачо Ьяс 1 Ейот ВцочЕ. Оспа, ЬЬсо. 3 с я тем, что пирофосфорнокиспый натрий цас 1 Ег 1 цв 6 ОСОсоСоп,РМцдопюв гндрат вводт в пнтатепьную среду Ицогевсейб 310,грибов АЯРегфИОВ п 1- количестве 0,01-0,2;о. от ее обьема. Дбг. и, актиномицетов: АСюощ 1 се 1 еэ оо- Источники информации, принятые во ГЮОЬЗС 1 СОбв условиях аэрации на пята- внимание при экспертизе тельной среде, . содержюцей источник ф 1. Авторское свидетепьртво СССР углерода, азота и фосфора в при- М 145875, кп. С 12 В 3/14, 1961. сутствии стимуляторов роста химичес. Авторское свидетепьство СССР кой природы, о т л и ч а ю щ и й- М 302361, кл. С 12 В 3/14, 1969, с я тем, что, с целью увеличения 3. Патент США М 3558434, и ускорения выхода биомассы, в ка- кл, 195-81, 1971.ОСоставитель И. ПриваловаРедактор М.,Пмитриева Техред, Н. Бабурка Корректор И. МускаЗаказ 2247/2 Тнраж 525 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам нзобретений н открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП фПатентг. Ужгород, уп. Проектная, 4