Способ определения чувствительности микробитестов для выявления дрожжей и плесневых грибов в молочных продуктах

СООЗ СОНЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ 007 РЕСПУБЛИН САНИЕ ИЗОБРЕТЕН ДЕТЕЛЬСТВ Н ДВТОРСИОМ флоры, битестелямизведениропитан пределяемои микри высев на микрые подкисленнойом с последующим ст их й мице кульатов,что,ив и оценкои резуль щ и й с я тем, ения чувствитель и мчаю ью по т с ц Стасаитите их дополнител асеой битесто взвесью ки однов икр ают ьтуры киш с высево ст емен ало л рыцр С иа СЛ Вь СР ГОСУДАРСТВЕННЬЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЭОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТОЕ(7 1) Литовский филиал Всесоюзного научно-исследовательского института маслодельной и сыродельной промьппленности(56) Микробитесты для определения редуцирующи бактерий. ТУ 49 927-83.Микробитесты транспортные для отбора и хранения проб молока и молочных продуктов. ТУ 49 748-80.Микробитесты для определения дрожжей и плесеней, ТУ 49 1033-83.(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРОБИТЕСТОВ ДНЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ДРОЖЖЕЙ И ПЛЕСНЕВЫХ ГРИБОВ В МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТАХ, включающий приготовление взвесей тест-культур, являющихся пред 12 Я 1/02,1/04 //С 12 ( 1/02, С 12 К 1:1 культур определяемых дрожжеи и пл невых грибов, при этом оценку рез татов осуществляют визуально по и лению или отсутствию колоний бакт рий, причем в качестве тест-культ кишечной палочки используют ЕзсЬе сЬа со 1 ВКМВ, а в качестве тест-культур дрожжей и плесневых бов соответственно СапйЫа шусоде ВКМУи Сеоггсйцш сапдЫцщ ВКМГ.чтобы в нем сохранился воздух, запаиовают и термостатируют при 25 С 4 сут,Затем проводят у ет результатов попримерам.П р и м е р 1, При исследованиичувствительности микробитестов партии 1 на 15 микробитестах определеныколичества микроорганизмов, соответственно при посеве СапдЫа шусойегша 15,13,7,12 и 16 круглых выпухлых колоний кремового цвета дрожжей; припосеве Сеогг 1 сЬцш сапйИцш - 26,19,18,21 и 25 колоний белого цвета плесневого гриба; прн посеве ЕзсЬегсМасо 1 х 0,0,0,0 и 0 красных колоний кишечной палочки.Чувствительность проверенной пар-тии микробитестов нормальная, Ихможно применять для определения количества дрожжей и плесневых грибовв молоке и молочных продуктах.П р и и е р 2При исследованиичувствительности мнкробитестов партии 2 на 15 микробитестах определены количества микроорганизмов, соответственно при посеве СапдЫа шусойегша - 10,14,8,13 и 7 круглых выпухлых колоний кремового цвета дрожжей;при посеве Сеогг 1 сЬцш сапйхдцш - 5,19, 13, 17 и 19 колоний белого цветаплесневого гриба; при посеве ЕесЬегдсМа со 1 д - 25,24, 19,21 и 22 красныхколоний кишечной палочки,Чувствительность проверенной партии микробитестов низкая (недостаточная). Причиной этого могут бытьошибки в технологии изготовлениямикробитестов - неправильно осуществлена закладка компонентов питательнойсреды для пропитывания бумаги илиошибочное определение активной кислотности среды и т.д,Иикробитесты непригодны для определения количества дрожжей и плесневых грибов в молоке и молочных продуктах.На наличие дрожжей и плесневыхгрибов исследуют сливочное масло (готовый продукт), сгущенные молочныеконсервы (готовый продукт), молокопастеризованное из ванны для производства творога (в случае вспучивания творога), сливки пастеризованныеиз ванны для производства сметаны(в случае вспучивания сметаны),Определение количества дрожжейи плесневых грибов в молоке и молочных продуктах проводят после предва-рительного разведения этих продуктов1254007 2Изобретение относится к молочнойпромышленности и может быть использовано при контроле качественных показателей централизованно вырабатываемых микробитестов для определениядрожжей и плесневых грибов в молочныхпродуктах.Целью изобретения является повышение чувствительности микробитестов,выявляющих дрожжи и плесневые грибы Ов молочных продуктах.Предлагаемый способ заключаетсяв том, что в известном способе,включающем выращивание тест-культур, получение смывов их клеток, нормализацию физиологическим раствором до мутности определенной степени разделение и высев на микробитесты и с последующим культивированием и оценкойрезультатов, одновременно используют 2 Отест-культуры микроорганизмов, представляющих определяемую микробитестами микрофлору, и тест-культуру присутствующей в молочньг продуктах ки"- шечной палочки.25Способ определения чувствительности микробитестов для определениядрожжей и плесневых грибов осуществляют следующим образом.Тест-культуры СапйЫа шусойегшаВКИТи Сеосг 1 сЬцш сапдЫцшВКМГвыращивают в течение 4-хсуток лри 25 С, а тест-культуруЕзсЬег 1 сМа со 11 ВКМВ"18 ч при37 С на скошенном питательном агарес гидролизованным молоком в пробирке, Далее готовят отдельные смывыупомянутых культур, смывая выросшиеколонии со скошенного агара с 5 ммФизиологического раствора.40Содержание клеток в каждом смывенормализуют физиологическим раствором по оптическому стандарту мутнос"ти на 10 ед. Полученные смьщы разводят физиологическим раствором до7-го разведения. Из Ч-го разведения45каждого смыва производят посев напять микробитестов для определениядрожжей и лесневых грибов (всегона 15 микробитестов), Для этогэ полиэтиленовый мешочек с одного конца раз"резают ножницами, микробитест вынимают иэ него за перфорированный конеци погружают в пробирку с 7-ым разведением нормализованного смыва соответствующей тест-культуры. Смачива"ние проводят в течение 5 с, послечего микробитест помещают в полиэтиленовый мешочек поперек для того,3 1254 физиологическим раствором, Для анализа приготовляют следующие разведения: сливочного масла 1,Ц; сгущенные мо.- лочные консервы 1; молоко пастеризованное иэ ваньы для производства тво. рога 1, 11; сливки пастеризованные из ванны для производства сметаны 1, 11. Перед употреблением полиэти" леновый мешочек с микробитестом вынимают иэ бумажного пакета и с одно О го конца разрезают его ножницами, Микробитест вынимают из полиэтиленового мешочка за перфорированный конец и погружают в исследуемое разведение на 5 с. При погружении микроби тест впитывает 0,2 см жидкости.Затем микробитест вновь вкладывает в полиэтиленовый мешочек поперек для того, чтобы в нем сохранился воздух, необходимый для роста дрож жей и плесневых грибов. При герметизации мешочка нЬвый шов делают также поперек первоначального шва.Разрезанную сторону мешочка зажимают между двумя стеклянными пластинками и запаивают на пламени горелки. Микробитесты термостатируют при (25+ +1) С в течение (2+6) ч в горизонтальном положении. Затем производят подсчет колоний дрожжей и плесневых грибов на обеих сторонах микробитеста. Дрожжи растут в виде крупных, выпуклых колоний белого, розового или кремового цвета, а плесневые грибы - колониями разной окраски,35 (белой, розовой, зеленой, черной, коричневой и др.), по внешнему виду 007 И=5 а 103 Количество КОЕ в 1 см, г Образец Объект исследования кробитесты, проверенные на чувствительность редлагаемым способом известным способом рожжи Гесневые грибы Дрожжи Плесневые грибы О 0 350 150 Оценка результатов невозможна Молоко сгущенное отличного качества 0 0 0 Молоко сгущенное низкого качества 950 200 Оценка результатов невозможнаа Масло сливочное отличного качества 3 Масло сливочное низкого качествааналогичными их колониями на чашках Петри.Количество дрожжей и спор плесневых грибовв 1 см (г) исследуемого образца подсчитывают по формуле где а - количество колоний дрожжейили плесневых грибов на микробитесте;б - разведение продукта.Результаты применения микробитестов, проверенных двумя способами определения чувствительности для определения дрожжей и плесневых грибов в молоке и молочных продуктах, представлены в таблице,Следовательно, точно определить качество продукции возможно только при применении микробитестов, проверенных на иувствительность предлагаемым способом.Преимуществом предлагаемого способа является одновременное использование в качестве тест-культур представителей определяемой микрофлоры и кишечной палочки, присутствующей в молочных продуктах, что повышает чувствительность выпускаемых микробитестов, при этом отсутствие роста кишечной палочки на микробитестах свидетельствует об их высокой чувствительности по отношению к. дрожжам и плесневым грибам, выявляемым с их помощью в молочных продуктах,1254007 бПродолжение таблицы Обре- Обьект исследованиязец Количество КОЕ в 1 сиз, г робитесты, проверенные аа чувстзительыость едлагаеыюи с бои ожжи Плесне 0 350 нка результатов невозможна 40 105- Колонии, образующие единицы: образцымикробитесты чистые; образцы а, Ь (потестах отмечены красные колонии кишешой обсеменности продуктов еще можнодержат дрожжей и плесневых грибов; обрасобу) - на микробитестах сплошной ростневых грибов, Подсчет колоний нельзялоний разных микроорганизмов. гаемому способу) бу) - на микроако из-за небольиэв ной т пукты не со о известному спо,дрожжей и плеса слившихся коше вести из-з Составитель В. Соин Гехред М.Ходаничипенкб рректор Л овхан акто Заказ 4 б 87/29 Тираж 490 ВНИИПИ Государственного по делам изобрет .ний 13035, Москва, Ж, РауПодписноССР митета Сткрытийая наб.,роизводственно-полиграфическое предприятие г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Молоко пастеризованное из ванны дляпроизводства творога(в случае вспучиваниятворога) 16 Сливки настеризованные из ванны для производства сметаны вслучае вспучиваниясметаны Ь, по предл стноиу спос палочки, од новить, что д,е(п ной палочки